Dieses neuartige Modell für orthotoper hinteren Gliedmaßen Transplantation in der Maus, eine nicht-Naht Manschette Technik für supermikrovaskulären Anastomose Anwendung bietet ein leistungsstarkes Werkzeug für die in-vivo-mechanistisch zu vaskularisiert Verbund Allotransplantationen bezogene immunologische Forschung (VCA).
Ein Abonnement von JoVE ist erforderlich, um diesen Inhalt anzuzeigen. Melden Sie sich an oder beginnen Sie noch heute mit einer kostenlosen Testphase.
Methodenartikel
Orthotopische Hind Gliedmaßen Transplantation in der Maus
* These authors contributed equally
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
In vivo Tiermodellsysteme, insbesondere Mausmodelle, haben sich zu leistungsfähigen und vielseitigen wissenschaftlichen Werkzeugen entwickelt, die für die Grundlagen- und translationale Forschung im Bereich der Transplantationsmedizin unverzichtbar sind. Eine breite Palette von Reagenzien ist exklusiv in dieser Umgebung erhältlich, darunter mono- und polyklonale Antikörper sowohl für diagnostische als auch für interventionelle Anwendungen. Darüber hinaus ermöglicht eine Vielzahl von genotypisierten, inzüchteten, transgenen und Knock-out-Stämmen eine detaillierte Untersuchung der individuellen Beiträge humoraler und zellulärer Komponenten zum komplexen Zusammenspiel einer Immunantwort und machen die Maus zum Goldstandard für die immunologische Forschung.
Vaskularisierte Komposit-Allotransplantation (VCA) beschreibt ein neuartiges Gebiet der Transplantation, bei dem Allotransplantate verwendet werden, um bei Patienten, die traumatischen oder angeborenen Gewebeverlust erlitten haben, "Gleiches durch Gleiches" zu ersetzen. Dieses chirurgische methodische Protokoll zeigt die Verwendung einer unnahtbaren Manschettentechnik für die supermikrovaskuläre Anastomose in einem orthotopen Maus-Transplantationsmodell für die Hintergliedmaßen. Das Modell ermöglicht insbesondere den Vergleich zwischen etablierten Paradigmen in der Organtransplantation mit einer neuartigen Form von Transplantaten, die aus verschiedenen Gewebekomponenten besteht. Einzigartig ist, dass dieses Modell die Transplantation eines lebensfähigen vaskularisierten Knochenmarkkompartiments und einer Nische ermöglicht, die das Potenzial haben, einen positiven Effekt auf das Gleichgewicht von Immunakzeptanz und -abstoßung auszuüben. Diese Technik bietet ein Werkzeug zur Untersuchung der Alloantigenerkennung und der Abstoßung und Akzeptanz von Allotransplantaten und ermöglicht die Durchführung von Studien zur funktionellen Nervenregeneration, um dieses neuartige Gebiet der Transplantation weiter voranzutreiben.
Einleitung
Die späten neunziger Jahre läuteten die Pioniertage der rekonstruktiven Transplantation ein, als 1998 die erste erfolgreiche Handtransplantation in Frankreich durchgeführt wurde. Seitdem wird der Einsatz von VCAs zur Rekonstruktion verheerender Gewebedefekte bei einem breiten Spektrum von Patienten erfolgreich eingesetzt. Bis heute zählt die Welt 76 Empfänger von 112 oberen Extremitäten sowie 31 Gesichtern 1-3. Darüber hinaus wurden mehrere andere Arten von VCAs wie Bauchdecke 4, Kehlkopf 5, Luftröhre 6, vaskularisierte Gelenke 7 und sogar Penis 8 durchgeführt. Darüber hinaus wurde kürzlich über die Leb....
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Protokoll
Alle Experimente wurden in Übereinstimmung mit dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren des National Institute of Health (NIH) durchgeführt und wurden von der Johns Hopkins University Animal Care und Verwenden Committee (JHUACUC) zugelassen. Die spezifischen Verfahren wurden im Rahmen der genehmigten ACUC Protokoll MO13M108 durchgeführt.
1. Spender Betrieb
- Verwalten Analgesie an der geeigneten Zeitpunkt für jeden pharmakologischen Formulierung vor der Operation. Gemäß dem genehmigten Tierpflege und Verwendung Protokoll Verwendung 0,1 mg / kg Körpergewicht von Buprenorphin subkutan 1 Stunde vor dem Hautschnitt.
- Sedate de....
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Ergebnisse
Darstellende vaskularisierten Verbund Allotransplantation in einem Maus-Modell eine nicht-Nahtmanschette Technik ermöglicht eine ausgezeichnete und langfristige Transplantat und das Überleben der Tiere zu erzielen, wie in 1 gezeigt ist. Darüber hinaus ist es, ein zuverlässiges Verfahren zum Erhalten reproduzierbarer Ergebnisse der schrittweisen Transplantatabstoßung in vaskularisierten Verbund darstellt Allotransplantation wie durch die Bilder dokumentiert in Fig.......
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Diskussion
Vaskularisierte Verbund Allotransplantation, wie der oberen Extremitäten und im Gesicht Transplantation für den Wiederaufbau der verheerenden Gewebedefekten hat sich als eine gültige Behandlungsmöglichkeit entwickelt für Patienten, die nicht abänderbar zu herkömmlichen rekonstruktive Eingriffe. Der technische Fortschritt im Bereich der rekonstruktiven Mikrochirurgie sowie eine langjährige Erfahrung mit immunsuppressiven und immunmodulatorischen Therapien im Bereich der Organtransplantation, ermöglicht jetzt langfristige.......
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Offenlegungen
Die Verfasser erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde von der Armee, Marine, NIH, Luftwaffe, VA und Health Affairs unterstützt das AFIRM II Aufwand, unter Auszeichnung Nr W81XWH-13-2-0053 zu unterstützen. Die US-Armee Medical Research Acquisition Activity, 820 Chandler Street, Fort Detrick MD 21702-5014 ist die Vergabe und Verwaltung von Erwerb Büro. Meinungen, Interpretationen, Schlussfolgerungen und Empfehlungen sind die des Autors und nicht notwendigerweise durch das Department of Defense unterstützt.
Die Autoren möchten Jessica Izzi, DVM, Caroline Garrett, DVM und Julie Watson, DVM für ihre ausgezeichnete Veterinär Unterstützung während dieser Studie danken.
....Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Nahtmaterial, 6-0 Nylon | MWI | 31849 | |
| Nahtmaterial, 6-0 Polysorb | MWI | 72667 | |
| Nahtmaterial, 10-0 Nylon | Aero Surgical | TK-107038 | |
| Polyimidschlauch, Größe 25 | Vention Medical | 141-0023 | |
| Polyimidschlauch, Größe 27 | Vention Medical | 141-0015 | |
| Mikrovaskuläre Klemmen (einzeln) | Synovis | 00396 | |
| Mikrogefäßklemmen (doppelt) | Synovis | 00414 | |
| Mikroschere | Synovis | SAS-18 | |
| Mikrozange | Synovis | FRS-15 RM-8 | |
| Mikrodilatatoren | Synovis | FRS-15 RM-8d.1 | |
| Mikronadeldreher | Synovis | C-14 | |
| Micro-Clamp Applikator | Synovis | CAF-4 | |
| Micro-Flushing Needle | Hamilton | 10MM, 30°, 33G | |
| Laktierte Ringer Lösung | Fisher | Scientific NC9968051 | |
| Buprenorphin | DEA Anzahl erforderlich; Bezogen aus der Krankenhausapotheke. | ||
| Enrofloxacin; Baytril | Bayer Health Care | 186599 | |
| Heparin | Gewonnen aus der Krankenhausapotheke |
Referenzen
- Khalifian, S., et al. Facial transplantation: the first 9 years. Lancet. , (2014).
- Petruzzo, P., Dubernard, J. M. The International Registry on Hand and Composite Tissue allotransplantation. Clin. Transpl. , 247-253 (2011).
- Shores, J. T., Brandacher, G., Lee, W. A.
Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.
Nachdrucke und Genehmigungen
