Используя опухоли пациента, полученных в подкожный доклинической модели является отличным способом для изучения эффективности новых методов лечения, открытие предиктивного биомаркеров и путей лекарственной устойчивостью. Эта модель, в процессе разработки лекарственных средств, имеет важное значение в определении судьбы многих новых видов лечения противоопухолевыми до клинического исследования.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Разработка и ведение доклинической пациента Derived Опухоль модели ксенотрансплантата для исследования принципиально новых видов лечения рака
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Модели ксенотрансплантата опухоли пациента (PDTX) обеспечивают необходимую платформу для облегчения разработки противораковых препаратов до испытаний на людях. Кусочки опухоли человека вводятся подкожно обнаженным мышам (с ослабленным иммунитетом, с дефицитом Т-клеток) для создания банка опухолей, а затем передаются разным поколениям мышей, чтобы сохранить эти опухоли у пациентов. Важно отметить, что клеточная гетерогенность исходной опухоли тесно имитируется в этой модели, которая обеспечивает более клинически значимую модель для оценки исследований эффективности лекарств (одного агента и комбинации), анализа биомаркеров, резистентных путей и биологии раковых стволовых клеток. Некоторые ограничения модели PDTX включают замену стромы человека стромой мыши после первого поколения у мышей, невозможность исследовать влияние лечения на метастазирование из-за подкожных инъекций опухолей, а также отсутствие оценки иммунотерапии из-за использования мышей с ослабленным иммунитетом. Тем не менее, даже с учетом этих ограничений, модель PDTX обеспечивает мощную доклиническую платформу в процессе разработки лекарств.
Введение
Колоректальный рак (CRC) является существенным фактором смерти от рака в Соединенных Штатах. В 2015 году насчитывалось 132,700 новых случаев КПР с 49,700 смертей 1. Хотя прогноз у пациентов с локализованным заболеванием превосходна, у пациентов с прогрессирующим заболеванием имеют плохие результаты, делая это основным приоритетом в разработке новых видов лечения. Несмотря на стандарт медицинской помощи химиотерапевтических препаратов и новых биопрепаратов, которые развернуты против этого заболевания, наблюдается лишь постепенное увеличение общей выживаемости. Соответственно, существует значительное усилие в понимании путей водителей, участвующих в обеспече....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Заявление по этике: Пациент полученные образцы опухоли ободочной аденокарциномы были получены от пациентов, соглашаясь в Университете Колорадо больницы в соответствии с протоколом, утвержденным Советом Колорадо Multiple Institutional Review (08-0439). Все для животных работа была выполнена в соответствии с протоколами животных, утвержденных в университете Колорадо Денвер Institutional уходу и использованию животных комитета (IACUC, Протокол № 51412 (06) 1E и 96813 (04) 1E).
1. Прием и подготовка крови больных
- Соберите 1 - 2 мл крови в пробирку для разделения крови / клеток, содержащей цитрат натрия (фазы трубки включены являютс....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Сходства Общих Мутации в моделях CRC PDTX и TCGA
Мы исследовали , были ли процент общих мутаций (KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA, APC, CTNNB1 и TP53) в банке CRC PDTX представитель частоты мутаций видели в популяции пациентов CRC. Как показано на рисунке 2А (TCGA) и B (CRC PDTX банка), частота мутаций в этих генах были очень похожи между TCGA (п = 276 пациентов) и банком CRC.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Платформа открытия препарата PDTX предлагает улучшенную модель к недостаткам других доклинических моделей, которые являются ненадежными при прогнозировании клинической активности новых соединений. Важно отметить, что опухоли в этой модели являются биологически стабильными, сохраняют метастатический потенциал, и демонстрируют аналогичную отзывчивость наркотиков из поколения в поколение. В этой модели опухоли пациента происходит впрыскивают в бестимусных голых мышей, пассируют, а затем использовать в терапевтических оценк.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Эта работа была поддержана грантом 1R01CA152303-01.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| RPMI или DMEM | Corning | 10-040-CV | |
| Пенициллин-стрептомицин | Corning | 30-002-CI | |
| Заменимые аминокислоты | Corning | 25-025-CI | |
| Фетальная бычья сыворотка | Corning | 35-010-CV | Размораживание при -4 °Deg; C, затем активировать на 30 мин при 60 °°; C водяная баня |
| CPT пробирка для крови | BD вакутайнер | 362761 | |
| микроцентрифужная пробирка | Surelock | A-7002 | |
| Фосфатно-солевой буфер | Corning | 21-040-CV | |
| Цирогенные флаконы | Cyroking | C0732901 | |
| Пластиковая чашка для резки опухолей | Trueline | TR4001 | |
| Ножницы | Roboz | RS-5881 | |
| Щипцы | Roboz | RS-5135 | |
| Matrigel (смесь желатинового белка) | Corning | 354234 | хранить при -20 или -80 ° C, затем разморозить на льду, не оставлять на RT |
| 10% Формалин чашки | Протокол | 032-059 | |
| Жидкий азот Дьюар Хранение | Термолин | CY50900 | |
| Портативный жидкий азот Дьюара | Nalgene | 4150-2000 | |
| Диметилсульфоксид | Фишер | 67-68-5 | |
| Контейнер для заморозки: Mr Frosty | Nalgene | 5100-0001 | |
| Изопропиловый спирт | Decon | 64-17-5 | |
| Троакары | Innovative Research of America | MP-182 | |
| Наркозный аппарат | Паттерсон Ветеринарный | ||
| бокс для анестезии | Паттерсон Ветеринарный | ||
| изофлуран | Vet один | 1038005 | |
| канистра F-Air | Bickford Omnicon | 80120 | |
| Meloxicam | Vet one | 5182-90C | |
| Штангенциркуль | Fowler | 54-100-167 | |
| Весы | Ohaus | Scout Pro SP601 |
Ссылки
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. 2015. CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).
- Comprehensive molecular characterization of human colon and rectal cancer. Nature. 487 (7407), 330-337 (2012).
- Arcaroli, J. J., et al.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
