Summary
रेटिना नाड़ीग्रंथि कोशिकाओं के माध्यमिक अध (RGCs) मोतियाबिंद में आमतौर पर होता है । इस अध्ययन के आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection के लिए एक अभिनव ऑपरेटिव दृष्टिकोण का वर्णन । इस अंतरिक्ष की बचत ऑपरेटिव दृष्टिकोण का उपयोग है मॉडल आवेदन रेंज फैली हुई है, और एक नए तरीके से RGCs में माध्यमिक चोट तंत्र की खोज की अनुमति देता है ।
Abstract
पिछले अध्ययनों से पता चला है कि रेटिना नाड़ीग्रंथि कोशिकाओं (RGCs) के माध्यमिक अध कि मोतियाबिंद में आमतौर पर होता है । आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection एक उपयोगी और प्रतिलिपि मॉडल माना जाता है । अंय ऑप्टिक तंत्रिका चोट मॉडल के साथ तुलना में सामांयतः माध्यमिक अध: पतन का आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया, पूरा ऑप्टिक तंत्रिका transection और ऑप्टिक तंत्रिका क्रश मॉडल, आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection मॉडल बेहतर है के रूप में यह प्राथमिक भेद सीटूमें माध्यमिक अध... इसलिए, यह माध्यमिक अध कि मूल्यांकन के लिए एक उत्कृष्ट उपकरण के रूप में कार्य करता है । इस अध्ययन के एक उपंयास ऑपरेटिव दृष्टिकोण आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection के सीधे retrobulbar ऑप्टिक तंत्रिका के क्षेत्र में पहुंच के द्वारा कक्षीय गोलक के पार्श्व दीवार के माध्यम से वर्णन करता है । इसके अलावा, हम transection के साथ सहायता करने के लिए एक नए डिजाइन, कम लागत शल्य चिकित्सा उपकरण पेश करते हैं । के रूप में प्राथमिक और माध्यमिक चोट क्षेत्रों की सीमा भेद में प्रतिनिधि परिणामों द्वारा प्रदर्शन किया, नए दृष्टिकोण और साधन शल्य चिकित्सा के लिए पर्याप्त स्थान प्रदान करके उच्च दक्षता और मॉडल की स्थिरता सुनिश्चित करता है । यह बारी में transection से पहले मस्तिष्कावरणीय म्यान और नेत्र वाहिकाओं ऑप्टिक तंत्रिका से अलग करने के लिए आसान बनाता है । एक अतिरिक्त लाभ यह है कि इस अंतरिक्ष को बचाने के ऑपरेटिव दृष्टिकोण ' जांचकर्ताओं को आंशिक रूप से transected ऑप्टिक तंत्रिका के स्टंप को दवाओं, वाहक, या चयनात्मक RGC अनुरेखकों प्रशासन की क्षमता में सुधार, पीछे तंत्र की खोज की अनुमति RGCs में माध्यमिक चोट, एक नए तरीके से ।
Introduction
द्वितीयक अध कि सामान्य रूप से केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में होता है (सीएनएस) दर्दनाक चोटों के बाद, और तीव्र और जीर्ण neurodegenerative रोगों का पालन. 1 , 2 , 3 , 4 , 5 प्राथमिक रोग की घटनाओं का एक प्रारंभिक परिणाम के रूप में न्यूरॉन्स और glial कोशिकाओं की मौत प्राथमिक अध..., जबकि माध्यमिक अध कि नहीं कर रहे हैं या केवल आंशिक रूप से प्रभावित प्राथमिक उत्पादन न्यूरॉन्स और glial कोशिकाओं की मौत के लिए संदर्भित करता है नुकसान. RGCs के माध्यमिक अध कि मोतियाबिंद में होने के लिए भी माना जाता है । ६ Yoles एट अल. 7 पुष्टि की कि RGCs के माध्यमिक चोट ऑप्टिक तंत्रिका चोट मॉडल में होता है । उंहोंने दिखाया है कि ंयूरॉंस जिनके axons घायल नहीं थे के बाद एक गंभीर अंततः अपक्षयी इन axons आसपास चोट द्वारा उत्पादित वातावरण के कारण पतित होगा । यह माध्यमिक अध कि एक प्रगतिशील नुकसान की गंभीरता से संबंधित फैशन में न्यूरॉन्स प्रभावित करता है दण्डित । अब तक, मोतियाबिंद में अंतर्निहित RGC क्षति तंत्र अस्पष्ट रहते हैं, विशेष रूप से उन माध्यमिक चोट से संबंधित है, जो अपर्याप्त नैदानिक उपचार में परिणाम है । 8 , 9 , 10 इसलिए, यह मोतियाबिंद के विकास के दौरान RGCs के माध्यमिक अध-पतन के अंतर्निहित तंत्र का पता लगाने के लिए आवश्यक है । 11 माध्यमिक चोट के पशु मॉडलों की स्थापना है कि मात्रात्मक आकार, वितरण का आकलन कर सकते हैं, और RGCs के माध्यमिक अध कि व्यवस्था के RGCs के माध्यमिक चोट का अध्ययन वैज्ञानिकों से बढ़ती ध्यान आकर्षित करती है ।
इस मुद्दे को स्पष्ट करने के लिए, एक चूहे पोंट मॉडल Levkovitch-Verbin एट अल द्वारा स्थापित किया गया था । 12 axonal चोट का मूल्यांकन करने के लिए और RGCs की मौत प्रेरित अध... इस मॉडल को माध्यमिक अध के तंत्र की खोज और संभावित न्यूरोप्रोटेक्टिव एजेंटों की पहचान के लिए एक अच्छा उपकरण का गठन माना जाता है । माध्यमिक चोट के इस मॉडल को उत्पन्न करने के लिए इस्तेमाल किया साधन ऑप्टिक तंत्रिका की एक मात्रात्मक transection को पूरा करने के क्रम में, डायल घुंडी के माध्यम से abscission की गहराई की स्थापना के द्वारा मात्रात्मक transect करने के लिए एक पैमाने के साथ एक हीरे चाकू है. ऊपर या लौकिक कंजाक्तिवा गोलक से सर्जिकल पथ दृष्टिकोण । ऑपरेटिव प्रक्रिया के दौरान, रेटिना और ऑप्टिक नसों संदंश के बल से प्रभावित हो सकता है, जो बारी में प्राथमिक चोट के कारण हो सकता है. इससे भी महत्वपूर्ण बात, उजागर ऑप्टिक तंत्रिका के सीमित स्थान के कारण, यह चीरा से पहले मस्तिष्कावरणीय म्यान अलग करने के लिए मुश्किल है. इसलिए, यह आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection, रेटिना ischemia और मॉडल की विफलता में जो परिणाम के दौरान नेत्र जहाजों को नुकसान संभव है । इसके अलावा, हीरा चाकू महंगा है, और प्रत्येक का उपयोग टिप तेज घट जाती है । यह बारी में हो सकता है मॉडलिंग की गहराई और प्रभाव को प्रभावित।
इस अध्ययन में वर्णित RGCs के माध्यमिक अध कि मॉडल की गोलक के पार्श्व कक्षीय दीवार से एक नए ऑपरेटिव दृष्टिकोण के माध्यम से प्राप्त किया गया था । यह उपंयास ऑपरेटिव दृष्टिकोण सीधे retrobulbar ऑप्टिक कक्षीय मांसपेशी शंकु द्वारा घेर लिया तंत्रिका तक पहुंचता है, गोलक और ऑप्टिक तंत्रिका को प्राथमिक चोट से बचने जब नीचे की ओर खींच या नाक के पार्श्व पक्ष की तरफ । यह भी मॉडल स्थापना के दौरान शल्य चिकित्सा आपरेशन के स्थान बढ़ जाती है, और आंशिक रूप से ऑप्टिक तंत्रिका transecting से पहले मस्तिष्कावरणीय म्यान अलगाव सक्षम बनाता है । यह सूचना है कि अनजाने की भागीदारी और नेत्र जहाजों की चोट मॉडल की विफलता के लिए नेतृत्व कर सकते है महत्वपूर्ण है । इसके अलावा, मॉडल एक अनुवर्ती transfected कोशिकाओं, दवाओं और आंशिक रूप से transected ऑप्टिक तंत्रिका के स्टंप पर एजेंट का आकलन करने के लिए सक्षम बनाता है । आत्म डिजाइन शल्य चिकित्सा उपकरण सस्ता है और कई बार इस्तेमाल किया जा सकता है, जिससे मॉडलिंग की लागत को कम करने । इस पद्धति द्वारा स्थापित RGCs के सेकंडरी इंजरी मॉडल में अच्छी reproducibility और स्थिरता दिखाई गई थी.
Protocol
- रोकनेवाला तकनीक का उपयोग कर प्रयोगों बाहर ले; पशु उपयोग के लिए प्रोटोकॉल विशिष्ट संस्था होना चाहिए ।
- उपकरणों और सामग्री (समाधान, परीक्षण पदार्थ, अनुरेखकों, सुई, आदि ) रहने वाले ऊतकों के साथ संपर्क में आने के लिए संक्रमण और पशु कल्याण पर प्रतिकूल प्रभावों के साथ ही अध्ययन पर संभावित नकारात्मक प्रभावों को रोकने के लिए निष्फल .
- Anesthetize एसडी एक पशु चिकित्सा isoflurane vaporizer प्रणाली का उपयोग चूहों । isoflurane गैस को भाप करने के लिए 1 L/मिनट की दर से मेडिकल ग्रेड ऑक्सीजन का प्रयोग करें । संलग्न संज्ञाहरण बॉक्स में पशु प्लेस और धीमी गति से सांस लेने और पशु बेहोश होने तक ४.५% की एकाग्रता पर isoflurane चलाते हैं । गैस मास्क लगाव करने के लिए गैस के प्रवाह स्विच
- और ऑपरेशन टेबल पर जानवर जगह है । isoflurane एकाग्रता कम करने के लिए 2% और संज्ञाहरण की निगरानी. बड़ा जानवर (& #62; ३०० g) isoflurane की उच्च एकाग्रता की आवश्यकता हो सकती है । सर्जरी के दौरान संज्ञाहरण की निगरानी, isoflurane खुराक तदनुसार समायोजित के साथ । लगातार गहराई और श्वास की दर का मूल्यांकन, और पैर की अंगुली चुटकी मूल्यांकन हर 5 मिनट प्रदर्शन, गहरे दर्द के अभाव को सुनिश्चित करने के लिए.
- एक बार शल्य चिकित्सा के पूरा हो गया है, isoflurane बंद करो और कई मिनट के लिए आपरेशन तालिका से हटाने से पहले पशु सांस ऑक्सीजन के लिए अनुमति देते हैं । एक शल्य कंबल के साथ पशु को कवर और/या सर्जरी के दौरान एक विनियमित हीटिंग कंबल का उपयोग करके शरीर के तापमान को बनाए रखने ।
- एक स्टेनलेस स्टील के बने SSAI का उपयोग करें, और मुख्य रूप से एक हाथ से आयोजित की पोल (लंबाई, १०० मिमी; व्यास, 9 मिमी) और एक नाली सिर (< मजबूत वर्ग = "xfig" > चित्रा 1 ) शामिल हैं । नाली सिर की नाली सतह अर्द्ध परिपत्र है, ऊर्ध्वाधर गहराई, चौड़ाई, और लंबाई के साथ २०० & #181; मी, ५०० & #181; m, व १,००० & #181; मी, क्रमशः. दो भागों के बीच, ५० मिमी की लंबाई के साथ एक संयुक्त अनुभाग है । नालीी सिर & #39; s एज ३०० & #181; m यापक.
नोट: नाली सतह transection के लिए ventral ऑप्टिक तंत्रिका के स्थिरीकरण सक्षम बनाता है । पृष्ठीय ऑप्टिक तंत्रिका नाली के बाहरी उजागर जब ऑप्टिक तंत्रिका के ventral पक्ष के भीतर देता है; इस बीच, पृष्ठीय ऑप्टिक तंत्रिका नाली किनारे से अवगत कराया जब ऊर्ध्वाधर काटने transected किया जाता है हो सकता है । ventral ऑप्टिक तंत्रिका नाली सतह के भीतर रखी द्वारा संरक्षित है नाली सिर & #39; s एज. - मात्रात्मक transected ऑप्टिक तंत्रिका axons (पृष्ठीय पक्ष) करने के लिए इसी RGCs में प्राथमिक चोट को प्राप्त करने, जबकि माध्यमिक चोट RGCs ऑप्टिक तंत्रिका untransected करने के लिए इसी axons में प्रदर्शन किया जाएगा (ventral पक्ष) प्रत्यक्ष क्षति के बिना.
- सर्जन के सिर के साथ शल्य मेज पर ऊपर की ओर चूहे के दाहिने पक्ष जगह । देखने के सर्जिकल क्षेत्र के केंद्र में सही कक्षा समायोजित करें । फिर, चीरा क्षेत्र सही कक्षीय त्वचा के बाहरी ध्वनिक फोरमेन करने के लिए पार्श्व canthus साथ कई बार साफ, ७५% इथेनॉल में ०.५% chlorhexidine लागू. आईरिस कैंची का उपयोग कर बाहरी ध्वनिक फोरमेन के लिए पार्श्व canthus के बीच फर निकालें.
- 1 सेमी ०.५ की लंबाई के साथ बाह्य ध्वनिक फोरमेन के लिए पार्श्व canthus साथ आइरिस कैंची का उपयोग कर एक त्वचा चीरा बनाते हैं । फिर, प्रावरणी चुटकी और ऊपर खींच 0.12 मिमी दांतेदार संदंश के साथ एक त्रिकोणीय कील बनाने के लिए । चीरा क्षेत्र में Vannas स्प्रिंग कैंची के निचले ब्लेड डालें और एक ही कतरनी दिशा में प्रावरणी खोलने में कटौती ।
- Vannas स्प्रिंग कैंची के साथ प्रावरणी में कटौती और कक्षीय नस बेनकाब । कक्षीय नस के पक्षों को दबाना और चीरा के दोनों किनारों को खोलने के लिए तीखे-दांतेदार संदंश का प्रयोग करें । कक्षीय मांसपेशी सतह, जो अनुवर्ती कार्रवाई की सुविधा के लिए और कक्षीय नस की सर्जरी से संबंधित रक्तस्राव से बचने के लिए तैनात है की शल्य चिकित्सा दिशा में कक्षीय नस प्लेस ।
- का उपयोग आइरिस कैंची के अलावा चीरा लाइन के साथ सही पार्श्व canthus कटौती करने के लिए पूरी तरह से पालन के दौरान कक्षीय मांसपेशियों के कुंद विच्छेदन के लिए दृष्टि के क्षेत्र का पर्दाफाश.
- subfascial कक्षीय मांसपेशी के फ़ोल्डर दबाना जारी है, और कुंद त्वचा और प्रावरणी चीरा की दिशा में खड़ी अलग । परिक्रमा वसा ऊतक की उपस्थिति तक, कक्षीय गहराई तक पहुँचने के लिए धीरे-अलग पक्षों के साथ.
- कक्षीय वसा ऊतक के जोखिम के बाद, सर्जन के दाईं ओर करने के लिए खड़ी शल्य चिकित्सक का सामना करना पड़ से चूहा सिर दिशा बदल जाते हैं । इस बीच, क्षेत्र लगातार रखें बाँझ पंजाबियों युक्त शल्य चिकित्सा या कपास झाड़ू का उपयोग कर नम । इस प्रक्रिया के सर्जिकल क्षेत्र की एक स्पष्ट दृष्टि सुनिश्चित करता है, जबकि ऊतकों नम और नरम रखते हुए ।
- कक्षीय गुहा में ऑप्टिक तंत्रिका के चारों ओर कक्षीय मांसपेशी शंकु को कवर कक्षीय वसा ऊतकों से काट प्रवेश । यह उचित शल्य चिकित्सा दृष्टिकोण का एक बेहतर प्रदर्शन सुनिश्चित करता है । निरंतर रक्तस्राव से बचने के लिए सीमित वसा वाले ऊतकों का लकीर रखें ।
- वसा ऊतक काट, पार्श्व rectus को उजागर । पार्श्व rectus जावक दबाना, और फिर इसे Vannas स्प्रिंग कैंची से काट । यदि वसा ऊतक पार्श्व rectus के तहत रहता है, ऊपर खींच वसा ऑप्टिक ०.१२ mm दांतेदार संदंश का उपयोग कर तंत्रिका और यह Vannas स्प्रिंग कैंची के साथ काट ।
नोट: इस समय में ऑप्टिकल नर्व के आसपास के टिशू म्यान दिखाई देने चाहिए । - के लिए कक्षीय गहराई में ऑप्टिक तंत्रिका की दिशा के साथ ऊतक म्यान अलग जारी, ऑप्टिक तंत्रिका की कुल जोखिम तक । शल्य झाड़ू का उपयोग करके ऊतक हटाने से उत्पन्न होने वाली रक्त की छोटी मात्रा को साफ करने के लिए क्षेत्र को साफ रखें ।
नोट: अब, ऑप्टिक तंत्रिका दिखाई जानी चाहिए । - आदेश में यह उपयोग करने के लिए, मस्तिष्कावरणीय म्यान कि नेत्र धमनी को नुकसान पहुँचाए बिना तंत्रिका चारों ओर से घेरे निकालते हैं । धीरे से एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप के तहत उच्च आवर्धन पर बाडी के संवहनी पैटर्न की जांच करने के लिए म्यान घुमाएँ ।
- रक्त वाहिकाओं से रहित क्षेत्र की पहचान, और बाडी पर एक अनुदैर्ध्य कटौती प्रदर्शन । < सुप वर्ग = "xref" > 13 एक 26G सुई टिप या नीलमणि शल्य जांच के knifepoint के साथ ऑप्टिक तंत्रिका की दिशा के लिए म्यान समानांतर चीर ध्यान से, पार्श्व कटौती के साथ vasculature को नुकसान से परहेज ।
नोट: केवल बचे हुए तंत्रिका को कवर रेशेदार membra होना चाहिएne, जो बहुत पतली और पारदर्शी है ।
- रक्त वाहिकाओं से रहित क्षेत्र की पहचान, और बाडी पर एक अनुदैर्ध्य कटौती प्रदर्शन । < सुप वर्ग = "xref" > 13 एक 26G सुई टिप या नीलमणि शल्य जांच के knifepoint के साथ ऑप्टिक तंत्रिका की दिशा के लिए म्यान समानांतर चीर ध्यान से, पार्श्व कटौती के साथ vasculature को नुकसान से परहेज ।
- चरण ५.२ के समान, एक 26G सुई टिप या नीलमणि शल्य जांच के knifepoint, ऑप्टिक तंत्रिका की दिशा के समानांतर के साथ धीरे रेशेदार झिल्ली चीर । < सुप वर्ग = "xref" > 13
- साधन नाली के भीतर ऑप्टिक तंत्रिका रखना धीरे और ध्यान से, पृष्ठीय ऑप्टिक तंत्रिका में जिसके परिणामस्वरूप थोड़ा नाली सिर किनारे से अधिक जा रहा है । इस समय, transect एक 26G सुई टिप या नीलमणि शल्य जांच के knifepoint के साथ नाली सिर मंच के किनारे के ऊपर पृष्ठीय ऑप्टिक तंत्रिका आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection. पूरा करने के लिए
- के बाद मुक्त करने के लिए ऑप्टिक तंत्रिका की ऊर्ध्वाधर दिशा की दिशा में थोड़ा गहरा साधन चाल । फिर, धीरे से साधन के नाली सिर हटा दें । आंख की मांसपेशियों या अंय ऊतकों खरोंच करने के लिए अतिरिक्त नुकसान से बचने की कोशिश नहीं की । आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection के स्टंप मनाया जा सकता है ।
- पार्श्व rectus, प्रावरणी और आंख के अंय आसपास के ऊतकों को अपने मूल पदों की जगह । फिर, मांसपेशियों और अनुक्रम में कक्षा की त्वचा परतों सीवन । अगर खून बह रहा है, धीरे घाव बंद करने से पहले एक चिकित्सा कपास की गेंद के साथ भरें, और समय की अवधि के लिए इस बनाए रखें । संक्रमण को रोकने के लिए घाव के लिए एंटीबायोटिक मरहम लागू करें ।
- isoflurane स्रोत बंद कर देते हैं और कई मिनट के लिए ऑक्सीजन सांस करने के लिए पशु की अनुमति दें । चूहे पुनर्जीवन की प्रक्रिया में, एक गर्म चटाई के साथ थर्मल इंसुलेशन तैयार, या सूखी गद्दी के साथ पिंजरे की सतह को कवर । कंबल के साथ जानवरों को कवर, वसूली की प्रक्रिया के दौरान चूहे airway प्रत्यक्षता सुनिश्चित करने के लिए ।
- घर जानवरों व्यक्तिगत रूप से सर्जरी के बाद । संस्थागत पशु देखभाल अधिकारियों द्वारा प्रदान किए गए दिशानिर्देशों के अनुसार सर्जिकल एनाल्जेसिक के बाद प्रशासन । सावधानी से सर्जरी के बाद जानवरों की निगरानी ।
Representative Results
SSAI (चित्र 2a)का उपयोग करके नए ऑपरेटिव approach के साथ द्वितीयक चोट मॉडल की स्थापना के संबंध में सफलता की पुष्टि करने के लिए, RGCs मॉडल स्थापना के तुरंत बाद पीछे लेबल किए गए थे । इस प्रक्रिया के प्रयोजन के लिए प्रतिगामी RGCs लेबल था एक तंत्रिका अनुरेखक डाई (3% fluorophore (जैसे, Fluorogold) बाँझ फॉस्फेट बफर खारा में) बेहतर colliculus (चित्रा बी2)में इंजेक्शन द्वारा. इस दृष्टिकोण पैदावार थोड़ा भिंनता के साथ व्यवहार्य RGCs के लेबल प्रतिलिपि । 14 , 15 , 16 , 17 , 18 रंग प्रतिगामी रूप से रेटिना में RGCs द्वारा लिया जाएगा और लाइव RGCs के लिए एक मार्कर का गठन, axons सही आंख में नहीं transected के साथ । इस बीच, RGCs सही आंख में आंशिक रूप से transected ऑप्टिक तंत्रिका axons के लिए इसी अनुरेखक डाई के साथ लेबल नहीं किया जा सकता है (चित्रा 2c). एक नियंत्रण आंख के रूप में, आपरेशन के बिना बाईं आंख, रेटिना के ऑप्टिक तंत्रिका साथ RGCs सभी बेहतर colliculus (चित्रा 2d)से एक प्रतिगामी तरीके में फ्लोरोसेंट सोने की डाई के साथ लेबल थे ।
सात दिनों के बाद आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection और RGCs के प्रतिगामी लेबलिंग, रेटिना काटा गया, स्थिर, समतल, और घुड़सवार । लेबल RGCs रेटिना के परिभाषित क्षेत्रों में एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत imaged थे । प्रतिदीप्ति-लेबल RGCs के साथ या बिना आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection के परिणाम चित्रा 3में दिखाया गया है । केवल सही रेटिना में RGCs ऑप्टिक तंत्रिका के untransected भाग के लिए इसी फ्लोरोसेंट सोने के साथ लेबल थे, और unlabeld और लेबल RGCs की एक स्पष्ट सीमा visualized किया जा सकता है (चित्र 3ए, चित्र बी), ऑप्टिक तंत्रिका के आंशिक लेनदेन का प्रदर्शन । एक नियंत्रण नजर के रूप में, बाईं आंख रेटिना के सभी RGCs प्रतिदीप्ति (चित्रा3 सी, चित्रा 3d)दिखाया.
का आकलन करने के लिए कि ऑप्टिक तंत्रिका सिर और नेत्र धमनी कि entoretina को रक्त की आपूर्ति के आसपास vasculature घायल हो गए थे और आपरेशन के दौरान प्रभावित, सही आंख fundus से पहले और सर्जरी के बाद छवि थी । छवियों को सही आंख (ऑपरेटिव आंख) से पहले और ऑपरेशन के बाद 1 घंटे के लिए रक्त की आपूर्ति दिखाई । धमनियों में रक्त पर्याप्त मात्रा में था । नस का कोई बाधा नहीं मनाया गया । इन निष्कर्षों से संकेत दिया कि आपरेशन के दौरान रक्त की आपूर्ति प्रणाली (चित्रा 4a, चित्रा 4B)के लिए कोई नुकसान नहीं था । इसलिए, RGCs के द्वितीयक अध कि मॉडल सफलतापूर्वक स्थापित किया गया था ।
चित्र 1 : आत्म डिजाइन शल्य चिकित्सा सहायक साधन, SSAI की तस्वीरें । (क) शल्य चिकित्सा यंत्र का एक मनोरम दृश्य, जिसमें दो मुख्य भागों के साथ-साथ एक हाथ से रखी हुई पोल तथा एक नाली का प्रमुख भाग है. उन दोनों के बीच ५० मिमी की लंबाई के साथ एक संयुक्त खंड है । हाथ से रखी पोल की लंबाई १०० एमएम है, और हाथ से रखी पोल का व्यास 9 एमएम है । (B) SSAI ग्रूव की एक सुविधा । नाली सिर की नाली सतह अर्द्ध परिपत्र है, जो ऑप्टिक तंत्रिका के भीतर रखना सक्षम बनाता है, transection के लिए स्थिर किया जा रहा है । grooveed सतह २०० µm की एक ऊर्ध्वाधर गहराई और ५०० µm और १,००० µm की लंबाई की एक चौड़ाई के साथ है । नाली सिर के किनारे की चौड़ाई ३०० µm है । इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्र 2 : स्व के साथ सही ऑप्टिक तंत्रिका के आंशिक transection के बाद रेटिना पर RGC लेबलिंग के योजनाबद्ध आरेख-शल्य चिकित्सा सहायक साधन (SSAI) डिजाइन और प्रतिगामी fluorophore के साथ बेहतर colliculus लेबल. (क) स्व-अभिकल्पित शल्य चिकित्सा सहायक यंत्री (SSAI) के साथ चूहों में आंशिक दाएँ ऑप्टिक तंत्रिका transection का शल्य-चिकित्सा दृश्य. (ख) मॉडलिंग के बाद, RGCs मस्तिष्क में बेहतर colliculus में तंत्रिका अनुरेखक डाई (पीला रंग, बाँझ फॉस्फेट बफर खारा में 3% fluorophore) इंजेक्शन द्वारा प्रतिगामी लेबल थे. RGCs के axons के बाद से बेहतर colliculus में रहते हैं, अनुरेखक डाई ऊपर प्रतिगामी RGCs द्वारा लिया जाता है और जीवित कोशिकाओं के लिए एक मार्कर का गठन. चित्रा में अनुप्रस्थ अनुभाग एक पार ऑप्टिक तंत्रिका की धारा का प्रतिनिधित्व करता है । ओडी, संचालित नेत्र; ओएस, आपरेशन के बिना नियंत्रण आंख । में (ग), केवल RGCs ऑप्टिक तंत्रिका के untransected भाग के लिए इसी fluorophore के साथ लेबल थे । ब्लू अलग ventral ऑप्टिक नसों और रेटिना पर इसी RGCs का प्रतिनिधित्व करता है; लाल आंशिक रूप से transected पृष्ठीय ऑप्टिक नसों और रेटिना पर इसी RGCs को दर्शाता है । (घ) शल्य प्रक्रिया के बिना बाईं आंख (नियंत्रण नेत्र) की रेटिना RGCs सभी डाई द्वारा लेबल थे. पृष्ठीय और ventral ऑप्टिक नसों सभी डाई द्वारा लेबल के रूप में अच्छी तरह से थे । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 3 : पूरे रेटिना epifluorescence माइक्रोग्राफ fluorophore लेबल RGCs 7 दिन आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection मॉडल और बेहतर colliculus के प्रतिगामी लेबल स्थापित करने के बाद । रेटिना पर Fluorogold दाग RGC क्षेत्रों के इसी योजनाबद्ध चित्र भी प्रस्तुत किए गए हैं. (क) और (ग) fluorophore के साथ लेबलिंग के बाद, क्रमशः सही (ऑपरेटिव) और वाम (नियंत्रण) आँखों के रेटिना में RGCs के योजनाबद्ध आरेखों का प्रतिनिधित्व करते हैं. पीला फ्लोरोसेंट गोल्ड डाई के साथ लेबल क्षेत्र को इंगित करता है । रेटिना पृष्ठीय, ventral और मध्य भागों में विभाजित है । (ख) और (घ) पूरे रेटिना epifluorescence एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के तहत प्राप्त माइक्रोग्राफ प्रतिनिधित्व करते हैं; पीला fluorophore के साथ लेबल RGCs के क्षेत्र का प्रतिनिधित्व करता है । शल्य आंख (दाहिनी आंख) में दिखाया ख, unलेबल्ड क्षेत्र RGCs के क्षेत्र का प्रतिनिधित्व करता है ऑप्टिक तंत्रिका जो आंशिक रूप से transected है, मुख्य रूप से रेटिना के पृष्ठीय पक्ष पर । फ्लोरोसेंट गोल्ड डाई द्वारा लेबल क्षेत्र RGCs ऑप्टिक तंत्रिका जो transected नहीं है और मुख्य रूप से मध्य और ventral रेटिना के पक्षों में ध्यान केंद्रित करने के लिए इसी क्षेत्र है । bounअनलेबल्ड और त्यसपछि RGCs के क्षेत्रों के बीच डरय स्पष्ट है । RGC निकायों के प्राथमिक अध कि पृष्ठीय रेटिना तक ही सीमित हो जाएगा, और केंद्रीय और ventral रेटिना में RGC निकायों के सभी नुकसान माध्यमिक अध... (घ) fluorophore के साथ RGCs के लैबल लगाने के बाद बायीं आँख की पूरी रेटिना photomicrograph. शल्य प्रक्रिया के बिना बाएँ नियंत्रण आँख की RGCs पूरी तरह से fluorophore से सना हुआ था. स्केल बार्स = ५०० µm. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्र 4 : fundus कैमरा द्वारा प्राप्त सही आँख के fundus के ऑपरेटिव और पश्चात की छवियों. चूहों में सही नेत्र शल्य चिकित्सा से पहले fundus की (क) छवि, fundus की अच्छी रक्त की आपूर्ति दिखा रहा है, धमनी भरने, और कोई शिरापरक वापसी या बाधा, एक अच्छा रेटिना रक्त की आपूर्ति प्रणाली का संकेत. (ख) सही आँख के fundus की छवि 1 घंटे सर्जरी के बाद । fundus के ऑपरेटिव छवि के साथ तुलना में, रेटिना रक्त की आपूर्ति में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन मनाया गया, यह दर्शाता है कि आंखों की रक्त आपूर्ति प्रणाली मॉडलिंग की प्रक्रिया के दौरान प्रभावित नहीं था. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 5 : retrobulbar ऑप्टिक तंत्रिका और मस्तिष्कावरणीय म्यान पर स्थित नेत्र धमनी की तस्वीरें, शल्य दृष्टिकोण के माध्यम से कब्जा कर लिया । पूरी तरह से ऑप्टिक तंत्रिका की लक्षित लंबाई को हटाने के बाद, नेत्र धमनी (ऐरोहेड) ऑप्टिक तंत्रिका के मस्तिष्कावरणीय म्यान के साथ सहवर्ती उजागर किया गया था, और ऑप्टिक तंत्रिका के समानांतर । स्केल बार्स = ५०० µm. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्र 6 : ऑप्टिक तंत्रिका में प्राथमिक और माध्यमिक उत्थान स्थानों के योजनाबद्ध आरेख । ऑप्टिक तंत्रिका का आंशिक चीरा आत्म डिजाइन शल्य चिकित्सा सहायक साधन (ऐरोहेड) का उपयोग कर हासिल किया गया था । axons में सीधे क्षतिग्रस्त साइटों (पृष्ठीय काटने ऑप्टिक तंत्रिका के ग्रे में अनुप्रस्थ अनुभाग में साइट) प्राथमिक अध..., जबकि परोक्ष रूप से क्षतिग्रस्त स्थलों में उन (अनुप्रस्थ अनुभाग में पीले रंग में ऑप्टिक तंत्रिका के मध्य और ventral क्षेत्रों) से गुजरना माध्यमिक अध... कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
Discussion
प्रचालन प्रक्रिया
मॉडल निर्माण की प्रक्रिया में नोटिस के योग्य कुछ बिंदु हैं । चरण ४.२ में, शल्य चिकित्सा आंदोलन सावधानी से किया जाना चाहिए subfascial मांसपेशी के ऊपर vasculature हानिकारक से बचने के लिए । विशेष रूप से, जब बाहरी पार्श्व canthus में चमड़े के नीचे प्रावरणी को काटने, तेज-दांतेदार संदंश प्रावरणी सतह पर खड़ी ऊपर की ओर चमड़े के नीचे खींचने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए; प्रावरणी Vannas वसंत कैंची के साथ काट दिया जाना चाहिए बाहरी canthus पर कक्षीय नस को नुकसान से बचने के लिए, जो अत्यधिक रक्तस्राव से मॉडल विफलता में परिणाम कर सकते हैं । कदम ४.३ संभावित रक्तस्राव को रोकने के लाभ है जब सीधे रक्त वाहिकाओं से हटाने । ४.५ कदम में कक्षीय मांसपेशियों को अलग करने में, तेज-दांतेदार संदंश लेकिन नहीं Vannas स्प्रिंग कैंची उठा के लिए कारण लगातार खून बह रहा है और रक्तस्राव से बचने के लिए है । मांसपेशियों को कुंद से सीधा दिशा में दोनों पक्षों पर त्वचा प्रावरणी चीरा करने के लिए अलग कर रहे हैं; इस बीच, गहरी मांसपेशियों की कक्षा जावक और बाह्य रूप से फैला रहे हैं । इस प्रक्रिया में कक्षीय गुहा के गहरे भागों प्रकट, एक बड़ा शल्य विंडो प्रदान करने और ऑप्टिक तंत्रिका ओवरले ऊतकों के लिए बेरोक उपयोग की अनुमति होगी । उपरोक्त प्रक्रियाओं में, अगर खून बह रहा है, दबाव बाँझ शल्य या कपास झाड़ू का उपयोग कर लागू किया जाना चाहिए । मामूली रक्तस्राव इस प्रक्रिया के द्वारा कई सेकंड के बाद बंद हो जाएगा । ४.६ कदम के प्रयोजन के लिए अनुवर्ती कार्रवाई की सुविधा के लिए आसानी से कक्षा मांसपेशी शंकु में कुछ वसा और अलग मांसपेशियों को दूर करने के लिए कक्षीय गहराई में ऑप्टिक तंत्रिका की दिशा के साथ ऑप्टिक तंत्रिका बेनकाब ।
वर्तमान प्रोटोकॉल के सबसे महत्वपूर्ण भागों चरण 5.1-5.6 हैं । यह महत्वपूर्ण है ऑप्टिक तंत्रिका सिर के आसपास vasculature नुकसान नहीं है । ऑप्टिक तंत्रिका आंशिक रूप से transected से कम 1.5-2.0 मिमी आंख के पीछे से होना चाहिए, नेत्र धमनी कि आंख के 1 मिमी के भीतर तंत्रिका प्रवेश और भीतरी रेटिना को रक्त की आपूर्ति करने के लिए किसी भी नुकसान से बचने के लिए । पार्श्व rectus काटने के उद्देश्य के रूप में पार्श्व rectus व्यापक और स्पष्ट रूप से ऑप्टिक तंत्रिका के दृश्य ब्लॉकों है ऑप्टिक तंत्रिका के बेहतर प्रदर्शन को प्राप्त है । इस बीच, मस्तिष्कावरणीय म्यान के साथ जुड़ा हुआ है कि नेत्र धमनी को दूर करने से बचने के लिए (चित्रा 5), यह अलग और ऑप्टिक तंत्रिका के आसपास बाडी अलग और मस्तिष्कावरणीय म्यान के संवहनी पैटर्न की जांच करने के लिए आवश्यक है, संदंश का उपयोग धीरे म्यान घुमाने के लिए । इसके अलावा, रक्त वाहिकाओं से रहित एक क्षेत्र की पहचान की जानी चाहिए, मस्तिष्कावरणीय म्यान में एक अनुदैर्ध्य कटौती की अनुमति दी । यह भी जरूरी है कि आंखों के पीछे से थोड़ी सी वर्किंग दूरी बनाए रखी जाए, जिससे नेत्र धमनी के साथ बारीकी से जुड़ी बाडी के हिस्से से बचा जा सके । रेटिना सामांय रूप से पारदर्शी है, और रक्त वाहिकाओं स्पष्ट रूप से demarcated जा सकता है । क्षतिग्रस्त रेटिना रक्त की आपूर्ति के मामले में, रेटिना पतित है, एक दूधिया सफेद flocculent उपस्थिति के लिए अग्रणी. आंख के अवलेह चैंबर और लेंस आम तौर पर के रूप में अच्छी तरह से बादल बन जाएगा, समय के साथ कम आंखों आकार के साथ । इस अध्ययन में, fundus के ऑपरेटिव और पश्चात छवियों के ऊपर कदम लागू करने के बाद मॉडल में fundus रक्त की आपूर्ति करने के लिए कोई नुकसान की पुष्टि की ।
इसके अलावा, विशेष देखभाल इस मॉडल के कई चरणों में की आवश्यकता है । जब तीव्र घुमावदार दांतेदार संदंश या अंय शल्य चिकित्सा उपकरणों का उपयोग करने ऑप्टिक तंत्रिका बेनकाब, सर्जन अत्यधिक बल से बचना चाहिए, क्योंकि यह ऑप्टिक तंत्रिका, गोलक या नेत्र धमनी, प्राथमिक चोट और रेटिना ischemia में जिसके परिणामस्वरूप नुकसान हो सकता है । इसके अलावा, आंख के आसपास रक्त वाहिकाओं क्षतिग्रस्त नहीं किया जाना चाहिए, निरंतर रक्तस्राव से बचने के लिए, जो मॉडलिंग की विफलता के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । इस प्रयोग में प्रयुक्त SSAI को नाजुक उपयोग की आवश्यकता है । जब ऑप्टिक तंत्रिका साधन नाली के भीतर रखा गया है, ऑप्टिक तंत्रिका और नाली सतह को कसकर अच्छी स्थिरता और प्रत्येक पशु मॉडल की पुनरावृत्ति सुनिश्चित करने के लिए फिट होने की जरूरत है । अभ्यास के साथ, पूर्ण शल्य प्रक्रिया आंख के अनुसार 15-20 मिनट के भीतर पूरा किया जा सकता है, प्रारंभिक प्रवेश कटौती के बाद किया गया है ।
वांग एट अल. 19 आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection का एक समान पशु मॉडल प्रकाशित एक ऑप्टिक तंत्रिका मात्रा विच्छेदन का उपयोग कर स्थापित किया । सर्जिकल प्रक्रियाओं में शामिल हैं: 1) के अलावा बाहरी canthus काटना, सस्पैंड और palpebral सुपीरियर फिक्सिंग; 2) ऑप्टिक तंत्रिका खोज, और ऑप्टिक तंत्रिका विच्छेदन का उपयोग कर के बेहतर भाग transecting; और 3) कंजाक्तिवा और त्वचा को Suturing । हालांकि शल्य प्रक्रिया अपेक्षाकृत सरल थी, आपरेशन के दौरान निंनलिखित समस्याओं का सामना करना पड़ा । हालांकि पार्श्व canthus चीरा आपरेशन के लिए कुछ जगह का पर्दाफाश कर सकता है, वहां एक अपरिहार्य को लगातार गोलक खिंचाव की जरूरत थी ताकि retrobulbar ऑप्टिक तंत्रिका म्यान को बेनकाब करने के लिए, विशेष रूप से जब सर्जन के लिए एक लंबा बेनकाब वांछित retrobulbar ऑप्टिक तंत्रिका म्यान आगे म्यान अलगाव की सुविधा के लिए; गोलक खींच के लिए बल अधिक से अधिक था, जो गोलक और ऑप्टिक तंत्रिका के प्रत्यक्ष कर्षण चोट का कारण होने की संभावना है । कोई विशेष ध्यान रक्त वाहिकाओं कि ऑप्टिक तंत्रिका म्यान के साथ एक साथ काटा जा सकता है के लिए भुगतान किया गया था, और रक्त वाहिकाओं को नुकसान के लिए विफल मॉडल स्थापना के लिए नेतृत्व की संभावना है । माध्यमिक चोट इस पत्र में वर्णित मॉडल के प्रमुख प्रक्रियाओं रहे हैं: एक नया ऑपरेटिव दृष्टिकोण के पार्श्व कक्षीय दीवार से सीधे retrobulbar ऑप्टिक कक्षीय मांसपेशी शंकु से घिरा हुआ तंत्रिका का उपयोग करने के लिए, प्राथमिक चोट से बचने गोलक और ऑप्टिक तंत्रिका, जब नीचे की ओर खींच या आंखों की नाक पार्श्व पक्ष की तरफ । इस नए ऑपरेटिव दृष्टिकोण मॉडलिंग के दौरान शल्य चिकित्सा आपरेशन के अंतरिक्ष बढ़ जाती है, और मस्तिष्कावरणीय म्यान, जो बारीकी से नेत्र धमनी के साथ जुड़ा हुआ है की आसान अलगाव, ऑप्टिक तंत्रिका के आंशिक transection से पहले सक्षम बनाता है । आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection एक आत्म डिजाइन शल्य चिकित्सा उपकरण है, जो लागत प्रभावी और पुन: प्रयोज्य है, मॉडलिंग की कुल लागत को कम करने के साथ किया गया था । चूहे की कक्षीय संरचना canthus और कोई बोनी संरचना के निकटतम कक्षा के साथ अन्य स्तनधारियों के उन लोगों से अलग है, लेकिन मांसपेशियों के साथ कवर किया । शल्य चिकित्सा दृष्टिकोण कक्षा की हड्डी और periosteum को नष्ट करने की आवश्यकता के बिना गोलक के पीछे भाग तक पहुंच सकता है । सख्त ऑपरेटिव संक्रमण और पश्चात एंटीबायोटिक प्रोफिलैक्सिस के माध्यम से, संक्रमण, सूजन और सूजन बहुत कम थे ।
आत्म डिजाइन शल्य चिकित्सा सहायक साधन
आंशिक ऑप्टिक नर्व transection के चूहे मॉडल को स्वयं डिजाइन किए हुए शल्य सहायक यंत्र का उपयोग कर स्थापित किया गया, जिसकी मुख्य विशेषताएँ इस प्रकार हैं. यह भी विभिन्न जानवरों के बीच transection निरंतरता सुनिश्चित करने, नाली किनारे करने के लिए उजागर ऑप्टिक तंत्रिका की आंशिक मात्रात्मक transection में सहायता कर सकते हैं. हम परीक्षण और SSAI के साथ मॉडल स्थापना की पुनरावृत्ति सत्यापित । भिंनता का अधिकतम गुणांक १.८५% था, जिसमें औसत मान 0.67% ± 0.44% था । 20 इन परिणामों से संकेत मिलता है कि SSAI आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection मॉडल की स्थापना के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, संतोषजनक reproducibility और संयुक्त राष्ट्र के साथiformity ।
नाली सतह की चौड़ाई और अर्द्ध नाली के भीतरी सतह के डिजाइन ऑप्टिक तंत्रिका पर एक अधिक निश्चित प्रभाव हो सकता है और नाली सतह और ऑप्टिक तंत्रिका और अधिक कसकर देते हैं, यह भी प्रयोगात्मक त्रुटियों और प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं को कम कर सकते हैं । इस नाली में एक बेहतर संरक्षण की अनुमति देता है ऑप्टिक तंत्रिका आपरेशन के दौरान नाली में, जो ऑप्टिक तंत्रिका नाली में नुकसान नहीं होगा, कटर के तेज की परवाह किए बिना । नाली बढ़त का एक अंय लाभ क्रश चोट की रोकथाम ऑप्टिक तंत्रिका transection के दौरान है ।
यह गहरी और संकीर्ण अंतरिक्ष में परिचालन के लिए उपयुक्त है । हालांकि नए ऑपरेटिव दृष्टिकोण का विस्तार किया गया है, मार्ग गहरी बनी हुई है, और हाथ से आयोजित ध्रुव और संयुक्त खंड ऑप्टिक तंत्रिका म्यान के तहत आसानी से नाली सिर जगह के लिए अनुवर्ती कार्रवाई करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । जब साधन आपरेशन के लिए प्रयोग किया जाता है, कटर की एक विस्तृत श्रृंखला transection के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, एक 26 जी सुई टिप उदा । यहां तक कि एक नीलमणि शल्य जांच चाकू चोट और कुचल कैंची की वजह से चोटों से बचने के लिए चुना जा सकता है । नाली सतहों विभिंन ऊर्ध्वाधर गहराई में बनाया जा सकता है ऑप्टिक तंत्रिका काटने की डिग्री अलग पूरा करने के लिए ।
वांग एट अल के विच्छेदन के साथ तुलना में SSAI एक सरल संरचना है । इसके अलावा, काटने कदम SSAI का उपयोग अधिक सुविधाजनक है, बेहतर स्थिरता और पशु मॉडल की पुनरावृत्ति के साथ । अंत में, SSAI के साथ काटने के लिए लागू उपकरणों की सीमा भी व्यापक है । अंत में, SSAI, जो मात्रात्मक और तंत्रिका की वर्दी चीरा बनाता है, ऑप्टिक तंत्रिका transection का आकलन करने के लिए चूहे मॉडल की स्थापना के लिए एक प्रभावी साधन के रूप में सेवा कर सकते हैं ।
चूहे आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका Transection मॉडल के लक्षण
आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection मॉडल RGCs में माध्यमिक अध-पतन का आकलन करने के लिए उपयोगी है । इस मॉडल की संभावित योग्यता, ऑप्टिक तंत्रिका और रेटिना दोनों में, सीटू मेंमाध्यमिक अध कि सही से प्राथमिक अलग करने की क्षमता है । केंद्रीय और ventral ऑप्टिक नसों आंशिक transection के बाद माध्यमिक चोट के लिए अतिसंवेदनशील थे (के बारे में 1/3 से 1/2) पृष्ठीय ऑप्टिक तंत्रिका (चित्रा 6)। रेटिना में, प्राथमिक और माध्यमिक चोटों के क्षेत्रीय स्थान RGCs के आंशिक transection के बाद रेटिना RGCs करने के लिए इसी ऑप्टिक तंत्रिका की स्थलाकृति पर आधारित होना चाहिए । यदि चूहे के पूरे रेटिना को पृष्ठीय (श्रेष्ठ) और ventral (अवर) भागों में बाँट दिया जाए तो द्वितीयक और प्राथमिक चोटें दोनों ही भागों में विद्यमान हैं. हालांकि, रेटिना और ऑप्टिक तंत्रिका axon पर RGCs के बीच संबंधों के आधार पर, ventral रेटिना में RGC मौत मुख्य रूप से माध्यमिक चोट के लिए जिंमेदार ठहराया जाना चाहिए (चित्रा 3)। 12 , 22 , 23 इस मॉडल के लाभ में शामिल हैं: मानक प्रक्रियाओं के साथ सरल और आसान करने के लिए संचालित साधन; नेत्र जहाजों पर कोई प्रभाव नहीं; अच्छा reproducibility और स्थिरता । इस तकनीक को आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका स्टंप करने के लिए कम हस्तक्षेप RNAs (siRNAs), plasmids, और वायरल वैक्टर लागू करने से इस अंतरिक्ष की बचत ऑपरेटिव दृष्टिकोण से RGCs transfect करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है; इसके अलावा, रिएजेंट चयनात्मक उपचार या RGCs के लेबलिंग के लिए आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका स्टंप पर रखा जा सकता है ।
कुल मिलाकर, प्राथमिक और माध्यमिक RGCs की चोटों इस पशु मॉडल में आंशिक ऑप्टिक तंत्रिका transection के बाद सहअस्तित्व, दो चोट प्रकार के बीच रेटिना में एक स्पष्ट सीमा के साथ । हालांकि ऑप्टिक तंत्रिका axons और रेटिना पर RGC स्थान के संघ एक और अधिक सटीक अंतर के लिए आगे की जांच की जरूरत है, इस अंतरिक्ष की बचत ऑपरेटिव दृष्टिकोण मॉडल के आवेदन रेंज फैली हुई है और शोधकर्ताओं का पता लगाने के लिए अनुमति देता है एक नए तरीके से RGCs में माध्यमिक चोट के तंत्र ।
Disclosures
सभी लेखक घोषणा करते हैं कि उनके पास हितों का कोई टकराव नहीं है.
Acknowledgments
यह काम बीजिंग नेचुरल साइंस फाउंडेशन (७१५२०३८) द्वारा समर्थित किया गया था, सेंट्रल साउथ यूनिवर्सिटी (2016zzts162) के केंद्रीय विश्वविद्यालयों के लिए मौलिक अनुसंधान कोष और Aier नेत्र अस्पताल समूह के विज्ञान अनुसंधान फाउंडेशन (ग्रांट नं. AF156D11) । अंत में, Fancheng यान धंयवाद वर्षों में अमूल्य समर्थन के लिए Yiping Xu ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal Aneathesia Ventilator System | MIDMARK | Matrx VMR | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co. | R510-22 | |
| Surgical Microscope | Leica AG, Heerbrugg, Switzerland | M620 F20 | |
| Tobramycin Eye ointment | Alcon | H20110312 | |
| Fluorogold | Biotium | 80014 | |
| Iris scissors | 66vision Co. | 54026 | |
| Vannas spring scissor | 66vision Co. | 54137B | |
| Sharp-serrated forceps/0.12mm toothed forceps | 66vision Co. | 53329A | |
| Sharp-curved forceps | 66vision Co. | 53324A | |
| Sapphire surgical probe | 66vision Co. | 50205TA | |
| 26G needle tip | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co. | 3151474 | |
| 10 μl Hamilton Syringe | Hamilton Co. | 80030 | |
| 5-0 non-absorbable suture | Johnson & Johnson International Co. | W580 | |
| Chlorhexidine | Sigma-Aldrich | 282227 | |
| Stereotaxie apparatus | RWD Life Science Co. | 68026 | |
| Retinal Imaging System | OptoProbe Ltd. | OPTO-RIS | |
| RetCamII wide field imaging system | Clarity Medical Systems,Inc. | RetCamII | |
| Fluorescence microscope | Leica Microsystems Inc. | DM6000 |
References
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