Summary
इस अध्ययन में एक सरल शल्य प्रक्रिया और तंत्रिका-इलेक्ट्रोड जटिल सिलिकॉन गोंद और intracavernous दबाव माप का उपयोग कर के अलगाव के साथ गुफात्मक तंत्रिका उत्तेजना प्रदर्शन के लिए तकनीक का वर्णन है ।
Abstract
गुफात्मक तंत्रिका की उत्तेजना (CN) और intracavernous दबाव की माप (आईसीपी) बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया गया है के लिए परीक्षण और स्तंभन दोष के लिए चिकित्सा का मूल्यांकन । हालांकि, तरीकों का इस्तेमाल प्रयोगशालाओं के बीच बदलती हैं, और नुकसान अभी भी मौजूद है । इस अध्ययन के लक्ष्य के लिए एक शल्य चिकित्सा तकनीक है कि एक विश्वसनीय और reproducible मॉडल प्रदान करेगा वर्णन किया गया । ischial tuberosity पर प्रविष्टि के अपने बिंदु पर ischiocavernosus मांसपेशी को उजागर करके, शिश्न अधोजानु ंयूनतम विच्छेदन और स्तंभन समारोह में शामिल संरचनाओं को चोट के साथ cannulated जा सकता है । CN की दोहराया उत्तेजना, उठाने और सुखाने के लिए की आवश्यकता के बिना, एक १२५ µm द्विध्रुवी रजत इलेक्ट्रोड और संगत सिलिकॉन गोंद का उपयोग करने इलेक्ट्रोड-तंत्रिका परिसर को अलग करके हासिल की थी । इस विधि खींच और तंत्रिका सुखाने और तंत्रिका की पूरी अलगाव प्रदान करता है, बिजली के रिसाव को नकारने और वैकल्पिक रास्ते की उत्तेजना को रोकने के द्वारा neuropraxia रोकता है ।
Introduction
प्रयोगात्मक पशुओं में स्तंभन समारोह के vivo में अध्ययन Eckhard1के अग्रणी प्रयोगात्मक काम के साथ १८६३ में शुरू कर दिया । श्रोणि नसों के Electrostimulation कुत्तों में बढ़ी हुई आईसीपी को प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल किया गया था । 20वीं सदी के दौरान, इसी तरह के प्रायोगिक प्रोटोकॉल कुत्ते, बंदर, बिल्लियों और खरगोशों के रूप में बड़े जानवरों में इस्तेमाल किया गया । एक चूहे में स्तंभन समारोह का मूल्यांकन पहले Quinlan एट अल द्वारा १९८९2में विकसित किया गया था । विधि के बाद से संशोधित किया गया है और कई अंय समूहों द्वारा अद्यतन34। आज, चूहा सीधा होने के लायक़ रोग की विकृति का अध्ययन और उभरते उपचार के विकल्प का मूल्यांकन करने के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जानवर मॉडल है । प्रक्रिया के मुख्य चरणों में शामिल हैं, प्रणालीगत रक्तचाप मन्या धमनी में एक लाइन का उपयोग कर रिकॉर्डिंग, cannulation शिश्न अधोजानु के आईसीपी को मापने के लिए, और CN उत्तेजना आईसीपी में वृद्धि करने के लिए प्रेरित करने के लिए. हालांकि कई शोधकर्ताओं ने मॉडल परिष्कृत किया है, इसके reproducibility एक समस्या बनी हुई है, और चर परिणाम अलग प्रयोगशालाओं द्वारा सूचित किया गया है. कई नुकसान अभी भी जारी रहती है ।
पिछले लेख5,6,7,8,9,10 के साथ पूर्ण शिश्न जोखिम के उपयोग का वर्णन degloving के लिए लिंग की गुफा शरीर cannulation । इस हेरफेर और विघटनकारी विच्छेदन के रूप में एक इष्टतम दृष्टिकोण नहीं संरचनाओं, जो सीधा होने के लायक़ समारोह के लिए आवश्यक है पर चोट का कारण बनता है । CN के विच्छेदन अच्छी तरह से10,11वर्णित किया गया है, लेकिन तंत्रिका की उत्तेजना कई कारकों है कि प्रयोगात्मक परिणामों को प्रभावित कर सकता है के कारण इष्टतम नहीं है । CN उत्तेजना की तकनीक द्विध्रुवी हुक इलेक्ट्रोड, जो तंत्रिका के आसपास तैनात है पर खींच द्वारा आसपास के ऊतकों से तंत्रिका उठाने भी शामिल है, और प्रत्येक उत्तेजना से पहले तंत्रिका सुखाने । यह तंत्रिका क्षति और विद्युत वर्तमान रिसाव के विभिंन डिग्री के लिए नेतृत्व कर सकते हैं, एक कम प्रतिक्रिया या वैकल्पिक रास्ते की उत्तेजना के माध्यम से आईसीपी में गलत वृद्धि के परिणामस्वरूप जैसे, श्रोणि फर्श की मांसपेशियों, मूत्राशय और जठरांत्र पथ12. इन सभी कारकों की सीमा reproducibility ।
हमारे अध्ययन के दौरान, हम दोनों गहराई और संज्ञाहरण के प्रकार आईसीपी पर एक गहरा प्रभाव पड़ता है कि मनाया । सोडियम pentobarbital, ketamine/xylazine या ketamine/मिदाजोलम इंजेक्शन, या isoflurane/ऑक्सीजन साँस लेना निश्चेतक इस्तेमाल किया जाता है ।
यहां हम एक सरल शल्य चिकित्सा पद्धति का वर्णन और प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के मानकीकरण के समर्थन में डेटा प्रदान करते हैं ।
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Protocol
पशु संस्थागत दिशा निर्देशों के अनुसार दक्षिणी डेनमार्क के विश्वविद्यालय में पशु देखभाल सुविधा में रखे गए थे । सभी पशु प्रयोगों की देखभाल और प्रयोगशाला पशुओं के उपयोग के लिए स्वास्थ्य गाइड के राष्ट्रीय संस्थानों के अनुसार किया गया । यह एक तीव्र, गैर जीवन रक्षा सर्जरी प्रक्रिया है ।
1. टयूबिंग, इलेक्ट्रोड, और शल्य प्रक्रिया के लिए उपकरणों की तैयारी
- सर्जिकल कैंची, angled माइक्रो कैंची, एक ऊतक संदंश, Dumont #7 की एक जोड़ी और माइक्रो संदंश, एक माइक्रो सुई धारक घुमावदार #5, और remicrosurgical: निम्नलिखित उपकरणों का प्रयोग करें ।
नोट: के रूप में यह एक तीव्र प्रक्रिया है, उपकरणों के लिए निष्फल होने की जरूरत नहीं है । उपयोग के बाद, साफ और ७०% इथेनॉल के साथ सुझावों पोंछ । - ७०% इथेनॉल में टयूबिंग भिगोना और फिर यह बाँझ ०.९% NaCl के साथ १०० यू/एमएल हेपरिन के साथ उपयोग करने से पहले फ्लश । प्रणाली में हवा के बुलबुले शुरू से बचने के लिए भरा टयूबिंग छोड़ दें ।
- आईसीपी माप के लिए एक कैथेटर बनाने के लिए-५० टयूबिंग (पीई)-पॉलीथीन की एक 20-30 सेमी लंबाई टुकड़ा कट । यह सुनिश्चित करना है कि टयूबिंग दबाव को कम करने के लिए के रूप में संभव के रूप में कम है ।
- एक बाँझ 24G सुई पक्ष को साइड मोड़ जब तक सुई बीच में टूट जाता है. शिश्न अधोजानु में प्रविष्टि के लिए पीई टयूबिंग के बाहर का अंत करने के लिए बेवल के साथ टुकड़ा कनेक्ट । दबाव transducer के लिए कनेक्शन के लिए हब के लिए अन्य आधा सम्मिलित करें । heparinized खारा (१०० U/एमएल) के साथ प्रणाली भरें ।
- द्विध्रुवी Teflon लेपित इलेक्ट्रोड बनाने के लिए, २ १२५ µm चांदी के तारों को बराबर लंबाई में काट । टेप के एक टुकड़े का उपयोग करने के लिए मेज के किनारे पर तार संलग्न और उंहें एक साथ धागा । इसके बाद, इलेक्ट्रोड को एक काली प्लेट में अनुलग्न करें ।
- Teflon में एक छोटा सा चीरा बनाने के लिए और इलेक्ट्रोड के सुझावों से Teflon कोटिंग की एक 4-5 मिमी लंबाई पट्टी करने के लिए माइक्रो संदंश #5 का उपयोग करें. एक स्केलपेल के साथ बंद सुझावों को भी लंबाई को प्राप्त करने और एक स्केलपेल ब्लेड के कुंद धार के आसपास सिरों झुका द्वारा हुक बनाने कट ।
- टेप इलेक्ट्रोड ऊपर की ओर इशारा करते हुक के साथ काली प्लेट के किनारे पर थोड़ा विस्तार अंत के साथ. मिश्रण 10 एस के लिए एक प्लास्टिक की थाली पर सिलिकॉन गोंद और हुक से इलेक्ट्रोड 1-2 mm के आसपास एक गोंद बुलबुला लपेटो ।
- इसे उपयोग करने से पहले लगभग 5 मिनट के लिए शुष्क करने की अनुमति दें (चित्र 1) । दूसरे छोर पर एक लंबी धारा से Teflon पट्टी, को उत्तेजित करने के लिए कनेक्शन के लिए अनुमति देते हैं ।
नोट: फिर से बाहर के अंत पर हुक कर के साथ, इलेक्ट्रोड कई बार reused किया जा सकता है ।
2. पशु की तैयारी
- पशु anesthetizing के बाद, पेट, गर्दन, और मूलाधार के निचले आधे दाढ़ी । ७०% povidone-आयोडीन तीन बार द्वारा पीछा शराब के साथ पशु साफ़ । एक लापरवाह स्थिति में एक गर्म शल्य पैड पर चूहे प्लेस । पशु चिकित्सक आंख मरहम लागू करें और २.५% isoflurane और ०.८ एल के साथ एक नाक शंकु पर संज्ञाहरण स्विच और वाहक के रूप में/
नोट: संज्ञाहरण के एक स्वीकार्य स्तर को प्राप्त करने के लिए isoflurane और ऑक्सीजन के स्तर को समायोजित करें ।
3. शल्य चिकित्सा तैयारी
- एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप के तहत पूरे शल्य प्रक्रिया प्रदर्शन: 3.15 एक्स से 20X को लेकर एक आवर्धन पर्याप्त है । दस्ताने का प्रयोग करें और सर्जरी के दौरान एक स्वच्छ वातावरण बनाए रखने । एक कपड़े पर चूहा प्लेस ।
4. आईसीपी मापन के लिए Ischiocavernosus मांसपेशी विच्छेदन
- एक स्केलपेल का प्रयोग करें, सीधे कैंची, और Dumont #7 घुमावदार माइक्रो संदंश एक 1 सेमी ऊर्ध्वाधर त्वचा चीरा 5 मिमी लिंग के आधार के स्तर पर शुरू करने और नीचे विस्तार (चित्रा 2a) करने के लिए पार्श्व बनाने के लिए । एक क्ष टिप का प्रयोग करें और ध्यान से अंडकोश की थैली को प्रावरणी पार्श्व अलग (चित्रा बी) । प्रावरणी को विच्छेदन करने के बाद, ischial tuberosity (चित्र 2c) को खोजने के लिए कपास को ढोने वाली अदला-बदली के साथ रिट्रेक्टर और टटोलना संलग्न करें ।
- इस बिंदु के वसा ऊतक औसत दर्जे के माध्यम से काटना जब तक ischiocavernosus मांसपेशी visualized है (चित्र 3ए) । Dumont की एक जोड़ी का प्रयोग करें #7 घुमावदार माइक्रो संदंश और longitudinally अलग मांसपेशी । tunica albuginea एक चमकदार सफेद संरचना (चित्र बी) के रूप में दिखाई देगा । माइक्रो संदंश और एक माइक्रो कैंची का प्रयोग, tunica albuginea पर्याप्त रूप से अपने पाठ्यक्रम को देखने के लिए बेनकाब (चित्रा 3सी).
- सिस्टम सेटिंग्स के अंशांकन के बाद, मूलाधार पर त्वचा के माध्यम से डालने टयूबिंग, सुनिश्चित करें कि यह शिश्न अधोजानु (चित्रा 4) के समानांतर चलाता है बनाने. जगह में लाइन छोड़ दो और नमक के साथ नम चीरा रखना ।
5. उत्तेजना के लिए CN विच्छेदन
- एक 2 सेमी कम, का उपयोग कर त्वचा के माध्यम से midline पेट चीरा, पहले, एक स्केलपेल, और फिर सीधे कैंची और माइक्रो संदंश की एक जोड़ी बनाओ । लीनिया अल्बा और अंतर्निहित मांसपेशियों के ऊतकों के साथ प्रावरणी के माध्यम से एक मिलान चीरा मूत्राशय और प्रोस्टेट को बेनकाब करने के लिए बनाएँ ।
- अच्छा एक्सपोज़र प्राप्त करने के लिए पुनर्ट्रैक्टर्स का उपयोग करें । उपयोग कपास-टिप झाड़ू वसा ऊतक से प्रोस्टेट अलग करने के लिए प्रमुख श्रोणि नाड़ीग्रंथि (MPG) और CN के स्पष्ट दृश्य प्राप्त करने के लिए, प्रोस्टेट के dorsolateral पहलू पर चल रहा है (चित्रा 5) ।
- mpg और CN के दृश्य के बाद, ध्यान से incise प्रावरणी तंत्रिका 2-5 mm angled माइक्रो कैंची (चित्रा 6a) के साथ MPG के लिए बाहर का है । #5 माइक्रो संदंश के उपयोग के साथ, तंत्रिका के प्रत्येक पक्ष पर ऊतक फैल गया और यह नीचे एक 4 मिमी लंबे समय तक भाग (चित्रा घमण्ड) मुक्त करने के लिए, और तंत्रिका (चित्रा 6c) के तहत एक 9-0 सीवन स्लाइड.
- सीवन की मदद से थोड़ा तंत्रिका तरक्की (चित्रा 7a) के लिए तंत्रिका (चित्रा 7b) के आसपास द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड के हुक की नियुक्ति की सुविधा । चलो एक सहायक 5 एस के लिए एक इंसुलिन सुई की नोक के साथ दो घटक सिलिकॉन गोंद मिश्रण है तंत्रिका सूखी और हुक और तंत्रिका (चित्रा 7c, डी) के आसपास के क्षेत्र में गोंद लागू होते हैं । लगभग 1 मिनट के लिए इलेक्ट्रोड पर थोड़ा खींच करके तंत्रिका ऊंचा रखो गोंद शुष्क करने के लिए अनुमति देते हैं ।
- किसी भी खींच या इलेक्ट्रोड के घुमा से बचने के लिए दाईं ओर रिट्रेक्टरों के लिए छोड़कर, reट्रेक्टरों निकालें. खारा के साथ उजागर अंगों गीले और चीरा पर खारा में लथपथ धुंध रखना ।
6. आईसीपी माप के लिए गुफा वाला शरीर Cannulation
- realbuginea का उपयोग कर tunica के दृश्य पुनर्स्थापित करें । यह अधोजानु को विकृत करेगा के रूप में ischiocavernosus पेशी के लिए रिट्रेक्टरों संलग्न करने के लिए नहीं सुनिश्चित करें.
- सुई देते हैं और यह tunica albuginea में शुरू करने से पहले heparinized खारा के साथ टयूबिंग फ्लश । tunica albuginea फैला रखो, Dumont एक हाथ में माइक्रो संदंश घुमावदार #7 का उपयोग (गैर प्रमुख), tunica albuginea और झूठ बोल प्रविष्टि की बात करने के लिए बाहर की मांसपेशी के बाकी पकड़े । अंय प्रमुख हाथ में सीधे माइक्रो संदंश के साथ सुई पकड़ो और यह गुफात्मक शरीर के पाठ्यक्रम के साथ समानांतर परिचय सुनिश्चित करें (चित्र 8) ।
- सुई 5-8 mm गुफा शरीर में पुश । टयूबिंग फ्लश और अधोजानु पर प्रेस लाइन (चित्रा 9) का परीक्षण करने के लिए । सुनिश्चित करें कि कोई लीक कर रहे हैं । टेप के साथ तालिका के लिए टयूबिंग जकड़ना लाइन पर आकस्मिक खींच रोकने के लिए । रिट्रेक्टरों को हटा दें ।
7. CN की उत्तेजना
- रिकॉर्डिंग कार्यक्रम के साथ (जैसे, 2 कील) चल रहा है, लगातार दोनों intracavernous और मतलब धमनी दबाव रिकॉर्ड ।
- एक उत्तेजक पर निम्नलिखित मापदंडों सेट (उदा., SD9 घास उपकरणों, CN उत्तेजना के लिए सामग्री की तालिकादेखें): १.५ mA पर वर्तमान, आवृत्ति पर 16 हर्ट्ज, वोल्टेज पर 3 V, और पल्स चौड़ाई पर 5 ms. 1 की न्यूनतम के साथ उत्तेजना के ५० s लागू करें उत्तेजना के बीच आराम करो ।
नोट: पहली उत्तेजना आमतौर पर कम प्रतिक्रिया में परिणाम (चित्र 10) ।
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Representative Results
अनुशंसित उत्तेजना सेटिंग्स के साथ इस प्रोटोकॉल का उपयोग, isoflurane २.०% ऑक्सीजन ०.८ L/मिनट के साथ साँस लेना संज्ञाहरण के तहत, के रूप में चित्रा 11 और आंकड़ा12में दिखाया गया है, जहां कई वापस करने के लिए वापस करने के लिए परिणामों का उत्पादन करना चाहिए 75-80 मिमी पारा के बीच उत्तेजना. चित्रा 13 73-77 मिमी पारा पर स्थिर प्रतिक्रिया के साथ एक 20 मिनट की उत्तेजना पर एक ही स्थिर प्रतिक्रिया से पता चलता है. ट्यूब फ्लश और अधोजानु (चित्रा 9) पर दोहन द्वारा आईसीपी माप के लिए लाइन का परीक्षण करें । तेजी से प्रतिक्रिया आधारभूत वापस एक अच्छी तरह से रखा लाइन की पहचान है । यदि tunica albuginea की अखंडता क्षतिग्रस्त है, परीक्षण कम पीक दबाव में परिणाम और धीमी गति से प्रतिक्रिया निस्तब्धता और दोहन के बाद आधार रेखा को वापस, और एक कम प्रतिक्रिया जब उत्तेजक (चित्रा 14) । वहां भी heparinized NaCl के रिसाव जब निस्तब्धता और उत्तेजना के दौरान खून बह रहा होगा ।
प्रकार और संज्ञाहरण के स्तर के रूप में के रूप में अच्छी तरह से ऑक्सीजन का उपयोग आईसीपी पर एक प्रमुख प्रभाव पड़ा । चित्रा 15 आईसीपी पर isoflurane के विभिंन स्तरों के प्रभाव को दर्शाता है, दोनों के साथ एक कम प्रतिक्रिया हुई है और थोड़ा स्थिर पठार । 2% से कम पर isoflurane के साथ, वहां ७८ mm पारा पर कई उत्तेजना के साथ आईसीपी माप में एक स्थिर प्रतिक्रिया थी । ३.५% करने के लिए isoflurane की एकाग्रता में वृद्धि, तथापि, एक तेजी से ५०% कमी में ३४ मिमी पारा करने के लिए कई, बाद उत्तेजना के परिणामस्वरूप । एक ही प्रभाव जब २.०% से ३.०% है, जहां एक 19% प्रतिक्रिया में कमी को देखा था isoflurane स्विचन मनाया गया था, और २.५% से 5% है, जहां ७०% की प्रतिक्रिया में एक और भी तेजी से कमी देखा गया था । रक्तचाप सभी उत्तेजनाओं में स्थिर रहे । चूहों में शल्य चिकित्सा और प्रारंभिक उत्तेजना के दौरान isoflurane/ऑक्सीजन संज्ञाहरण का उपयोग कर anesthetized, जो तो fentanyl/मिदाजोलम की सिफारिश की खुराक के 25% प्राप्त (जबकि isoflurane बंद कर दिया गया था), वहां एक इसी तरह स्थिर प्रतिक्रिया थी, लेकिन यह isoflurane की तुलना में fentanyl/मिदाजोलम संज्ञाहरण के दौरान 25% की वृद्धि हुई (चित्र 16) ।
एक नाक शंकु के माध्यम से ऑक्सीजन के प्रशासन रक्त में ऑक्सीजन संतृप्ति 61-75% से 99-100% के बारे में 20 एस में वृद्धि हुई । जब ऑक्सीजन रोका गया था, एक ही कमी लगभग 1 मिनट से अधिक देखा गया था । रक्त दबाव उत्तेजना भर में स्थिर था, लेकिन एक नाक शंकु के माध्यम से ऑक्सीजन प्रशासन (०.८ L/अधिकतम आईसीपी माप पर एक बड़ा प्रभाव था, यह द्वारा कम करने बैक-टू-बैक उत्तेजना में 35-45% (चित्र 17) ।
चित्र 1 . द्विध्रुवी Teflon लेपित चांदी इलेक्ट्रोड । (क) लेपित और unकोट इलेक्ट्रोड के बीच संक्रमण क्षेत्र में गोंद बुलबुला । (ख) इलेक्ट्रोड के बाहर 2 सेमी कसकर ब्रैड । (ग) समानांतर unकोट हुक 1 मिमी के अलावा । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 2 . गुफा वाले शरीर के विच्छेद न - स्थलों । (A) 1 सेमी ऊर्ध्वाधर त्वचा चीरा, नीचे शुरू 2 मिमी लिंग के आधार से पार्श्व । (ख) कपास इत्तला दे दी झाड़ू का उपयोग कर अलग अंडकोश की थैली के लिए पार्श्व प्रावरणी । (ग) रिट्रेक्टरों (पीएम: pyramidalis मांसपेशी, आईटी: अधोजानु के ischial tuberosity) के प्लेसमेंट के बाद ऑपरेटिंग क्षेत्र का दृश्य । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 3 . tunica albuginea को उजागर करना. (क) ischiocavernosus बलवान (तीर). (B) Tunica albuginea (तीर) । (C) गुफा वाले शरीर के पाठ्यक्रम को दिखाते हुए कम शक्ति आवर्धन । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 4 . गुफात्मक दबाव रिकॉर्डिंग के लिए लाइन । सुई मूलाधार पर त्वचा के माध्यम से शुरू की गुफा वाला शरीर (तीर) के साथ समानांतर चल रहा है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 5 . MPG के द्वारा चिह्नित तीर और CN प्रोस्टेट के dorsolateral पहलू पर ऊर्ध्वाधर चल रहा है । प्रमुख श्रोणि नाड़ीग्रंथि (MPG) तीर, गुफात्मक तंत्रिका (CN) द्वारा चिह्नित । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 6 . गुफात्मक तंत्रिका की विच्छेदन । (क) प्रावरणी काटने माइक्रो कैंची के साथ गुफात्मक तंत्रिका पर बल । (ख) माइक्रो संदंश का उपयोग करके अंतर्निहित ऊतकों से तंत्रिका को अलग करना । (ग) तंत्रिका के नीचे एक 9-0 संयुक्ताक्षर कयो । प्रमुख श्रोणि नाड़ीग्रंथि (MPG) तीर, गुफात्मक तंत्रिका (CN) द्वारा चिह्नित । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 7 . तंत्रिका के हुक । (एक) धीरे सीवन पर खींच द्वारा तंत्रिका तरक्की । (ख) इलेक्ट्रोड के हुक में आराम तंत्रिका । (ग) तंत्रिका और इलेक्ट्रोड जटिल-संगत सिलिकॉन गोंद के साथ पृथक । (D) अतिरिक्त गोंद बुलबुला को पूरी तरह से अलग करने के लिए तंत्रिका-इलेक्ट्रोड जटिल जोड़ा । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 8 . Cannulation के tunica albuginea । पीई-५० ट्यूबिंग से जुड़े एक 23 जी सुई tunica albuginea में डाला । तीर से चिह्नित प्रविष्टि के बिंदु । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 9 . intracavernous रेखा का परीक्षण कर रहा है । एक सही लाइन प्लेसमेंट के साथ देखा प्रतिक्रियाओं । लाइन और अधोजानु पर दोहन करने के लिए प्रतिक्रिया की निस्तब्धता नोट करें । साथ ही, त्वरित दबाव ड्रॉप वापस आधारभूत करने के लिए ध्यान दें । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 10 . गुफात्मक तंत्रिका उत्तेजना के लिए प्रारंभिक प्रतिक्रियाएं । पहले प्रतिक्रिया कम । ५० मिमी पारा और एक अस्थिर पठार की पहली उत्तेजना । ६६ मिमी पारा की दूसरी और तीसरी उत्तेजना । निंनलिखित माप सामांय स्तर पर ७३ mm पारा में दर्ज किया गया । इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्र 11 . दोहराया गुफात्मक तंत्रिका उत्तेजना और intracavernous दबाव रिकॉर्डिंग । इस प्रोटोकॉल का उपयोग करके परिणामों की स्थिरता दिखा रहा है । दस वापस 75-78 मिमी पारा के बीच वापस उत्तेजना । इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्र 12 . गुफात्मक तंत्रिका उत्तेजना और दबाव रिकॉर्डिंग । लगभग 30 वापस करने वाली पीठ उत्तेजना दबाव में < 6 mm पारा परिवर्तनशीलता के साथ । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 13 . सतत उत्तेजना स्थाई 20 मिनट । अंत में उतार-चढ़ाव में वृद्धि हुई है, लेकिन बाद उत्तेजना, एक 1 मिनट के आराम के बाद, एक स्थिर प्रतिक्रिया का उत्पादन किया । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 14 . टपक tunica albuginea. लंबे समय तक प्रतिक्रिया निस्तब्धता और दोहन के बाद आधार रेखा को वापस । उत्तेजना के बाद कम प्रतिक्रिया । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 15 . intracavernous दबाव पर संज्ञाहरण खुराक के प्रभाव । कम और isoflurane बढ़ाने पर अधिक अस्थिरता प्रतिक्रिया पहले दो में 2% पर स्थिर प्रतिक्रिया की तुलना में, और पिछले तीन उत्तेजना । लगातार मतलब धमनी दबाव दिखा शीर्ष पर नीले निशान । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 16 . intracavernous दबाव पर संज्ञाहरण प्रकार के प्रभाव । प्रारंभिक उत्तेजना isoflurane संज्ञाहरण के तहत प्रदर्शन किया ८० mm पारा के एक दबाव में वृद्धि दिखाने के लिए, एक बार fentanyl/मिदाजोलम था प्रशासित वहां ११० mm पारा के जवाब में वृद्धि हुई थी । इस आंकड़े का बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें.
चित्र 17 . नाक शंकु के माध्यम से ऑक्सीजन प्रशासन का प्रभाव । नाक शंकु के माध्यम से ऑक्सीजन प्रशासन को जारी रखने के लिए गुफात्मक तंत्रिका उत्तेजना के साथ गुफात्मक दबाव में वृद्धि में एक महत्वपूर्ण कमी हुई । मतलब धमनी दबाव पर कोई प्रभाव नहीं (नीले ऊपर ट्रेस) नोट किया गया था । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 18 . वोल्टेज का प्रभाव उत्तेजना पर दबाव प्रतिक्रिया. 1.5-6 वी के बीच वोल्टेज एक समान दबाव प्रतिक्रिया का उत्पादन किया । प्रतिक्रिया नीचे १.५ V. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
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Discussion
इस अध्ययन के प्रमुख लक्ष्य आईसीपी रिकॉर्डिंग और electrostimulation के लिए CN के अलगाव के लिए शिश्न अधोजानु cannulation की एक सरलीकृत शल्य चिकित्सा तकनीक का वर्णन था । हम सर्जरी को सरल और CN उत्तेजना के साथ आईसीपी की वृद्धि की reproducible रिकॉर्डिंग प्रदान करने के लिए गुफात्मक शरीर के विच्छेदन के लिए संशोधनों की शुरुआत की । एक 1 सेमी ऊर्ध्वाधर त्वचा चीरा के साथ, लिंग के आधार को पार्श्व, मार्गदर्शन के रूप में स्पष्ट ischial tuberosity का उपयोग कर, हम ischiocavernosus मांसपेशी और tunica albuginea के अच्छे प्रदर्शन हासिल की । यह प्रक्रिया (15 मिनट के तहत) साहित्य में वर्णित की तुलना में जल्दी है और ंयूनतम ऊतक विघटन2,3,4का कारण बनता है ।
वर्तमान में उपयोग की गई तकनीक cn उत्तेजना की hooking, उठाने, और प्रत्येक electrostimulation से पहले के सूखने से सूख शामिल है10लागू किया गया है । इस तकनीक की गारंटी नहीं है कि शर्तों प्रत्येक उत्तेजना के लिए एक ही रहते हैं । इसके अलावा, तंत्रिका के उठाने एक micromanipulator के उपयोग की आवश्यकता है और खींच दोहराया और तंत्रिका, जो neuropraxia के लिए नेतृत्व कर सकता है की रिहा । वर्तमान CN उत्तेजना तकनीक की तुलना में, तंत्रिका-इलेक्ट्रोड परिसर को अलग करने के लिए एक संगत सिलिकॉन गोंद का उपयोग दो उदाहरणों को खींच तंत्रिका की आवृत्ति कम कर देता है; एक बार तंत्रिका के चारों ओर द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड जगह करने के लिए, और एक बार तंत्रिका और इलेक्ट्रोड गोंद का उपयोग अलग करने के लिए. बाद में, एकाधिक neurostimulations तंत्रिका जोड़तोड़ के लिए की आवश्यकता के बिना किया जा सकता है ।
सुई के दबाव रिकॉर्डिंग के लिए गुफात्मक शरीर में प्रविष्टि एक महत्वपूर्ण कदम का गठन किया । इस तकनीक के नए उपयोगकर्ताओं को प्रयोग शुरू करने से पहले इस भाग का अभ्यास करना चाहिए । जब अधोजानु में सुई की तैनाती, यह महत्वपूर्ण है कि अधोजानु फैला है और सुई अपने पाठ्यक्रम के समानांतर तैनात है । अंय महत्वपूर्ण कदम आसपास के ऊतकों और इलेक्ट्रोड के नीचे के स्थान से अपने विच्छेदन के दौरान तंत्रिका हैंडलिंग है । जबकि विच्छेदन ही एक मुश्किल काम नहीं है, किसी भी खिंचाव या तंत्रिका के क्रश नुकसान में परिणाम सकता है । इस कदम के हमारे संशोधन एक micromanipulator अनावश्यक के लिए की जरूरत है और तंत्रिका हैंडलिंग सरल बनाता है । तंत्रिका को अलग करने और इलेक्ट्रोड और तंत्रिका के बीच स्थिर और विश्वसनीय संपर्क प्रदान करने के लिए, संगत सिलिकॉन गोंद का उपयोग आवश्यक हेरफेर कम कर देता है । सिलिकॉन गोंद भी अंय पशु मॉडल में जहां vivo neurostimulation लागू किया जाता है में इस्तेमाल किया जा सकता है ।
उत्तेजना कई अध्ययनों में सूचीबद्ध पैरामीटर 14-20 हर्ट्ज और 1.5-12 वी11,13,14से भिंन है । इस तकनीक से पता चला कि उत्तेजना का उपयोग कर एक १.५ मा, 16 हर्ट्ज, 3 वी, और 5 एमएस पल्स एक पूर्ण प्रतिक्रिया का उत्पादन किया. उत्तेजना मानकों को बढ़ाने के साथ, आईसीपी (चित्र 18) में वृद्धि नहीं करता है । यह पता चलता है कि किसी भी पैरामीटर, जो धमनी (गुफात्मक धमनी), arteriolar, और sinusoidal चिकनी मांसपेशी छूट को ट्रिगर करने के लिए सीमा से ऊपर हैं का उपयोग उत्तेजना, पलटा ट्रिगर करने के लिए पर्याप्त हैं और एक पूर्ण शारीरिक में परिणाम होगा प्रतिक्रिया. आवृत्ति, आयाम, या पल्स चौड़ाई में बाद में वृद्धि एक मजबूत शारीरिक प्रतिक्रिया करने के लिए नेतृत्व नहीं करता है और यह न्यूरोट्रांसमीटर चूस सकता है या यहां तक कि तंत्रिका चोट का कारण. उपर्युक्त मापदंडों के साथ, हम एक बाकी अवधि के साथ एक reproducible प्रतिक्रिया प्राप्त करने में सक्षम थे के रूप में कम 30 एस एक पंक्ति में ४० से अधिक बार ।
संज्ञाहरण की गहराई स्पष्ट रूप से शारीरिक प्रतिक्रिया को प्रभावित करता है । साँस लेना संज्ञाहरण के साथ, यह अच्छी तरह से नियंत्रित किया जा सकता है, लेकिन पीक प्रतिक्रिया लगभग 25% कम है, जब fentanyl/मिदाजोलम संज्ञाहरण की तुलना में इंजेक्शन द्वारा प्रशासित । हमने देखा है कि isoflurane की खुराक न्यूनतम isoflurane पैर की अंगुली चुटकी प्रतिक्रिया को खत्म करने के लिए आवश्यक एकाग्रता द्वारा निर्धारित स्तर पर बनाए रखा जा सकता है. अधिकांश जांचकर्ताओं, सोडियम pentobarbital के साथ इंजेक्शन संज्ञाहरण का उपयोग करें, fentanyl/मिदाजोलम, ketamine/xylazine, या ketamine/मिदाजोलम15।
प्रकाशित लेखों में से कोई भी नियंत्रित ऑक्सीजन के उपयोग का उल्लेख किया । इस अध्ययन से परिणाम बताते है कि यह आईसीपी पर एक बड़ा प्रभाव पड़ा । इसलिए, यह महत्वपूर्ण है कि, संज्ञाहरण के प्रकार की परवाह किए बिना, पशु नाक शंकु के माध्यम से ऑक्सीजन प्राप्त करता है ।
चूहों का उपयोग उनके आकार और लचीलापन के कारण लाभप्रद है. पहले प्रकाशित अध्ययन में दोनों और इस अनुसंधान में पुष्टि की, Sprague Dawley चूहों को 6-12 सप्ताह की सीमा में CN उत्तेजना के लिए एक अक्षुण्ण प्रतिक्रिया है दिखाया गया है और 200-550 जी वजन चूहों का प्रयोग अधिक चुनौतीपूर्ण है, लेकिन लाभप्रद कारण ट्रांसजेनिक तकनीक की उपलब्धता12.
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Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
लेखकों को कोई पावती नहीं है ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Adson forceps | Fine Science Tool | 11006-12 | |
| Dumont #7 forceps | Fine Science Tool | 11271-30 | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tool | 11273-20 | |
| ToughCut Mayo scissor | Fine Science Tool | 14110-15 | |
| Miniature Vannas Spring scissor | Fine Science Tool | 15006-09 | |
| Ultra Fine Hemostat | Fine Science Tool | 13020-12 | |
| Crile Hemostat | Fine Science Tool | 13004-14 | |
| Kwik-Sil Adhesive | World Precision Instruments | KWIK-SIL | |
| Teflon coated silver wire 0.125 mm | World Precision Instruments | AGT0510 | |
| Elastic wire retractors | Custom made | ||
| Scalpel blade | Fine Science Tool | 10023-00 | |
| PE-50 tubing | Warner Instruments | 64-0753 | |
| 23 G Needle | Kruuse | 121272 | |
| SD-9 Square Pulse Stimulator | Somatco | 1077/183 | |
| Blood pressure transducer and cable | World Precision Instruments | BLPR2 | |
| Raucotupf Cotton-tipped Applicators | Lohmann-Raucher | 11966 | |
| Pro-ophta Ocular Sticks | Lohmann-Raucher | 16515 | |
| NaCl 0,9 % 100 mL | Local pharmacy | ||
| Heparin | Local pharmacy | ||
| 25 mL Syringe | Odense University Hospital | ||
| Vet eye ointment - Viscotears | Local pharmacy | ||
| silver wires | Science Products GmbH, Heidelberg, Germany | ||
| Silicon Glue | Kwik-Sil, World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA |
References
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