Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Herstellung von Ernte Nadeln, die verwendet werden, um voll-dicke Hautgewebe zu sammeln, ohne dass Spender Website Narbenbildung. Die Nadeln kombinierbar mit einer einfachen Sammelsystem Großserien-Ernte zu erreichen.
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Methodenartikel
Vorrichtung zur Ernte Gewebe Microcolumns
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Dieses Manuskript beschreibt den Produktionsprozess für ein Laborgeräte, hergestellt aus Standardkomponenten, die verwendet werden, um Microcolumns von voll-dicke Hautgewebe zu sammeln. Die geringe Größe der Microcolumns kann die Spender Standorte schnell heilen ohne Entnahmestelle Narbenbildung, bei der Ernte voll dicke Gewebe ermöglicht die Einbeziehung aller zellulären und extrazellulären Komponenten von Hautgewebe, einschließlich verbunden mit tiefer dermalen Regionen und die Adnexe Hautstrukturen müssen die noch mit konventionellen Tissue engineering-Techniken erfolgreich wiedergegeben werden. Die Microcolumns kann direkt in Hautwunden erweitern Heilung angewendet werden, oder sie können als autologe Zellen/Gewebe-Quelle für andere Gewebe-engineering-Ansätze verwendet werden. Die Ernten Nadeln erfolgt durch Ändern der standard Kanülen, und sie allein für die Ernte von kleinen Mengen von Gewebe verwendet werden können oder gepaart mit einem einfachen Saug-basierte Auflistung System (auch aus handelsüblichen Laborbedarf hergestellt) für Großserien-Ernte um Studien in großen Tiermodellen zu erleichtern.
Einleitung
Autologe Hauttransplantationen ist die Hauptstütze der Wunde Reparatur, aber es ist begrenzt durch Spender Website Knappheit und Morbidität, führt zu gemeinsamen Anstrengungen in den letzten Jahrzehnten entwickeln neue Therapieoptionen zu ersetzen konventionelle Hauttransplantationen1,2 . Wir vor kurzem entwickelt eine alternative Methode zur Ernte Haut um die Vorteile der voll-dicke Hauttransplantationen zu nutzen, bei gleichzeitiger Minimierung der Spender Website Morbidität. Durch das Sammeln von voll-dicke Haut in Form von kleinen (~0.5 mm Durchmesser) "Microcolumns", Spender Websites sind in der Lage, sch....
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Protokoll
Alle Arbeiten mit lebenden Tieren und tierischen Gewebeproben vom Massachusetts General Hospital institutionelle Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) genehmigt worden.
(1) Produktion der Ernte Nadeln
- Setup der Produktionsphase
- Sichern Sie einen weiblichen Luer Lock Anschluss auf einen Beitrag zu, und montieren Sie die Post auf einem Drehtisch, so dass die Luer-Lock in der Mitte der Bühne (Abb. 1A) ist.
- Diese erste Rotationstisch senkrecht, und montieren Sie ihn senkrecht auf eine zweite, horizontale Drehung Bühne (Abbildung 1
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Ergebnisse
Die Ernten Nadeln sollen Microcolumns von voll-dicke Hautgewebe mit ca. 80-90 % Erfolgsrate zu sammeln, und jedes Microcolumn sollte enthalten, Epidermis, Dermis und einige Fettpölsterchen (Abbildung 4). Wenn die Erfolgsquote bei der Ernte niedrig ist, oder wenn es schwierig wird, legen eine Nadel in das Gewebe, wird eine neue Nadel wahrscheinlich benötigt. Wenn die Erfolgsrate für die Ernte konstant niedrig, sogar mit neuen Nadeln ist, sind die Nadeln wahrsc.......
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Diskussion
Die hier beschriebenen Methoden sollen die Sammlung von Gewebe Microcolumns in ausreichenden Mengen für in Vivo große tierexperimentellen Studien mit Werkzeugen aus handelsüblichen Laborbedarf zu ermöglichen. Dieses Gerät hat früher bei der Ernte Gewebe aus ausgeschnittenen Menschenhaut4,9 , sowie live Schweine Haut3. Die einzelnen Parameter beschrieben sind diejenigen, die am besten geeignet für den Einsatz bei Schweinen zu finde.......
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Offenlegungen
Die Autoren sind Co-Erfinder auf Patente im Zusammenhang mit der Technologie beschrieben in diesem Artikel, aus denen sie Lizenzen erhalten haben und Lizenzeinnahmen durch ihre Institution, Massachusetts General Hospital. J. Tam berät auch bei Medline Industries, Inc., die eine kommerzielle Lizenz für diese Technologie hält.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde von der Armee, Marine, NIH, Luftwaffe, VA und Health Affairs der versichere II unterstützen, unter Award Nr. teilweise unterstützt. W81XWH-13-2-0054. Die US-Armee medizinische Forschung Übernahmen, ist 820 Chandler Street, Fort Detrick, MD 21702-5014 die Vergabe und Verwaltung Erwerb Büro. Meinungen, Interpretationen, Schlussfolgerungen und Empfehlungen sind die des Autors und nicht unbedingt unterstützt werden durch das Department of Defense.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Diamantscheibe | Dremel | 545 | |
| Injektionsnadel (19G) | Fisher Scientific | 14-840-98 | Andere Nadelgrößen können verwendet werden, je nach experimentellem Bedarf |
| Steinrad | Dremel | 540 | |
| Spritze (20mL mit Luer-Lock) | Fisher Scientific | 22-124-967 | |
| Absaugadapter | Tulip Medical | PA20BD | Optional, für die Ernte großer Mengen |
| Saugkanister | Fisher Scientific | 19-898-212 | Optional, für die Ernte in großen Mengen. Vor Gebrauch sterilisieren. |
| Saugschlauch | Medline | DYND50216H | Optional, für die Ernte großer Mengen |
Referenzen
- Sun, B. K., Siprashvili, Z., Khavari, P. A. Advances in skin grafting and treatment of cutaneous wounds. Science. 346 (6212), 941-945 (2014).
- Singh, M., et al. Challenging the Conventional Therapy: Emerging Skin Graft Techniques for Wound Heali....
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Nachdrucke und Genehmigungen
