Summary

왼쪽된 심 방 협 유발 쥐에서 그룹 2 폐 동맥 고혈압과 폐 정 맥 Arterialization

Published: November 18, 2018
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Summary

왼쪽된 심 방 협 (라스)은 그룹 2 폐 고혈압 (PH) 및 폐 정 맥 arterialization 기본 메커니즘 연구는 소설 외과 기술입니다. 여기, 선물이 폐 정 맥 arterialization를 일으키는 원인이 되 고 쥐에서 PH를 알 맞도록 하는 티타늄 클립을 사용 하 여 좌 심 수축 하는 프로토콜.

Abstract

승 모 판 협 착 증 유발 폐 정 맥 arterialization 및 그룹 2 폐 고혈압 (PH)의 기계 장치는 명확 하지 않습니다. 그룹 2의 설치류 모델이 없을 PH, 승 모 판 협 착 증 (MS), 질병 메커니즘 및 잠재적인 치료 전략의 조사를 촉진 하기 때문. 우리는 폐 정 맥 혼잡 유발 폐 정 맥 arterialization 및 그룹 2의 새로운 쥐 모델 제시 왼쪽된 심 방 협 (라스)에 의해 발생 하는 PH. 라스는 반 폐쇄 티타늄 클립을 사용 하 여 왼쪽된 아 트리 움 constricting에 의해 이루어집니다. 라스 수술 후 심장 초음파에 2.0 m/s 모델 보다 큰 transmitral 유입 속도와 같거나 쥐 점차적으로 폐 정 맥 arterialization 및 개발 그룹 2는 8-10 주 동안 PH. 이 프로토콜에서 우리 라스 수술을 수행 하는 방법의 단계별 절차를 제공 합니다. 제시 라스 쥐 모델 인간에서 MS를 모방 하 고 폐 정 맥 arterialization의 기본 분자 메커니즘 연구 및 그룹 2에 대 한 치료의 전 임상 평가 대 한 유용 PH.

Introduction

이 문서의 목적은 쥐에 라스 수술을 수행 하는 방법의 단계별 절차를 설명 하는 것입니다. 수술로 유도 라스 밀접 하 게 싫어 하지 MS와 오호 왼쪽된 아 트리 움1기계적인 방해의 창조를 포함 하는 인 간에 있는 triatriatum. 종종 왼쪽된 심 실 (LV) 유입의 방해 폐 정 맥 순환의 정체 원인과 환자는 점차적으로 PH를 개발 합니다. 세계 보건 기구 분류 PH 왼쪽된 심장 질환으로 인해 그룹 2, PH2,,34의 가장 널리 퍼진 그룹입니다. 왼쪽된 심장 질환을 가진 환자에서 PH의 진단이 관련 된 1 년 표준화 사망률4칠 배로 증가 보다는. 현재는 그룹 2에 대 한 승인된 없이 치료 내부 치료 외에도 PH 왼쪽 심장 질환 (예를 들어, 수술 stenotic 승 모 판 대체). 그러나, 심지어 효과적인 승 모 판 대체 완전히 MS5환자의 절반 최대에 PH를 해결 되지 않습니다. 이 영구 PH 제대로 이해 불리 한 폐 혈관, 개장 예정 이다. 따라서, 동물 모델은 불리 한 폐 혈관 개장의 그룹 2에에서 근본적인 분자 메커니즘에 대 한 우리의 이해를 강화 하는 중요 한 산도.

그룹 2 박사 관상 동맥 결 찰6,7 의 몇 가지 동물 모델 이며 가로 대동맥 구간8,,910 설치류에는 가장 일반적으로 사용 되는 그룹 2 PH 동물 모델. 이러한 모델의 주요 단점은 라스베가스, 그룹 2 PH 연구의 결과 해석 하기 어려운 게의 참여. 대조적으로, LV 라스 모델에 그대로 남아 있습니다. 또한, 라스 모델은 10 주 기간11이상 PH 느리고 점진적 개발에 결과 때문에 임상 관련. 인간에서는, MS는 transmitral 도플러 흐름 속도 2.0 m/s11, 보다 큰 고 우리 또한를 사용 하 여이 번호는 컷오프로 라스 수술 상당한 협 생산 여부 결정 중요 한 것으로 간주 됩니다. 또한, 라스 모델 생성 가벼운 또는 적당 한 산도, 비록 인간의 환자, 즉 intrapulmonary 정 맥 arterialization11의 개발에에서 비슷한 특성 더 변경 보여 줍니다. 라스 쥐 모델은 소설과 보존 LV 기능 임상 관련 그룹 2 PH 모델. 그것은 영구적인 폐 혈관 개장, 분자 표적 식별 및 테스트 그룹 2에 대 한 새로운 치료의 이상 공부 적합 PH.

Protocol

라스 실험 프로토콜 지케이 대학 학교의 의학 동물 관리 위원회 및 대학 연구 윤리 위원회 (프로토콜 #2015-118)에 의해 승인 되었습니다. 1. 수술 준비 동물 시설에 도착 한 후 5 주 된 남성 Sprague Dawley 쥐 작업 전에 그들의 새로운 가정에 적응 1 주 150 ~ 200 g 사이 제공 합니다. 압력가 마로 소독 하 여 수술을 하기 전에 다음과 같은 장비를 준비: 1)는 작은 동물 인공 ?…

Representative Results

고 라스의 효과 사용 하 여 심장 초음파, 수술 후 2 주 동안 확인 된다. 2.0 m/s, 4 상공 회의소 보기 측정 보다 큰 LV 유입 속도와 쥐 상당한 협 (그림 1)를 개발 하 고 안정적으로 적당 한 PH 및 폐 정 맥 arterialization 8-10 주 후 라스 수술 개발 간주 됩니다. 10 주 후 라스 수술, 라스 그룹에 쥐 표시 왼쪽된 심 방 확…

Discussion

라스 쥐가 이미 필드12,13연구에서 상당한 관심을 받은 소설 그룹 2 PH 모델 이다. 두 개의 기존 그룹 2 모델, 즉 폐 정 맥 협 착 증 (PVS) 모델14, piglets, 그리고 supracoronary 대동맥 구간 (SAB) 쥐 모델8,를 사용 하 여 비교9,10, 라스 쥐 모델은 몇 가지 장점입니다. PVS 돼지 모?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

저자는 과학 진흥 (JSP) 여름 프로그램에 대 한 Mitacs-일본 사회를 인정합니다. 핑 유 Xiong 지케이 대학 학부를 방문 하 여 Mitacs-JSP 여름 프로그램에서 자금을 지원 했다. 박사 Minamisawa는 교육, 문화, 스포츠, 과학 및 기술 일본의 (S.M.), 전략 연구 재단에 개인 대학 (S.M.), 자동차 경주 기념 MEXT-Supported 프로그램에 의해 부분적으로 지원 재단 (S.M.), 그리고는 지케이 대학 대학원 연구 기금 (S.M.)이이 프로젝트에 대 한 재정 지원. 아처 박사는 미국 국립 보건원 (NIH) 보조금 NIH 1R01HL113003-01A1 (S.L.A.) 및 NIH 2R01HL071115-08 (S.L.A.), 캐나다 혁신 재단, 미토 콘 드 리아 역학에 들어가게 계층 1 캐나다 연구의 자에 의해 부분적으로 지원 의학 (S.L.A.), 윌리엄 제이 헨 더 슨 재단, 캐나다 관 네트워크 그리고 여왕의 심장과 단위 (QCPU).

저자 씨 정전 Kokubo, 수석의 사진 서비스는 지케이 대학의과 대학에, 비디오 촬영에 대 한 학술 정보 센터의 인정 합니다.

Materials

5-0 Prolene Suture Johnson & Johnson – Ethicon 8725H Polypropylene suture with HEMO-SEAL Technology
Anaesthesia Machine Wakenyaku Co., Ltd. BRTK-100A Air pump and anaethesia machine
Angiocatheter guidewire Self-made 10 cm guidewire glued to a 1 cc syringe 
Chest retractor Natsume Seisakusho Co., Ltd. F-2
Chest tube 23G Self-made 10 cc syringe attached to a 23G needle plus plastic tube
Curved forceps Natsume Seisakusho Co., Ltd. A-14
Heating pad Vivaria MP-916-NV Keep body temperature at 37 degree celsius
Horizon Ligating Clips Teleflex REF 003200 Size Medium-Large
Horizon Manual-Load Ligating Clip Applier For Medium-Large Size Horizon Teleflex REF 337085 Ligation Clips Angled Jaw, (20cm)
Needle holder Natsume Seisakusho Co., Ltd. MC-40
Rodent Respirator CWE Inc SAR-830/P Small animal ventilator
Scissors Natsume Seisakusho Co., Ltd. B-12 Straight scissors ideally with round tips
Straight forceps Natsume Seisakusho Co., Ltd. A-7
Tongue depressor Uchida Yoko Co., Ltd. 8-615-2417 Use the wide end

References

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Cite This Article
Xiong, P. Y., Baba, S., Nishioka, N., Fujimoto, Y., Archer, S. L., Minamisawa, S. Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat. J. Vis. Exp. (141), e58787, doi:10.3791/58787 (2018).

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