Menschliche Blastozysten Biopsie und Vitrifikation

Roberta Maggiulli; Adriano Giancani; Danilo Cimadomo; Filippo  M. Ubaldi; Laura Rienzi

doi:10.3791/59625

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Methodenartikel

Menschliche Blastozysten Biopsie und Vitrifikation

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DOI:

10.3791/59625

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26. Juli 2019

Roberta Maggiulli¹ , Adriano Giancani¹^,² , Danilo Cimadomo¹ , Filippo M. Ubaldi¹ , Laura Rienzi¹

¹G.EN.E.R.A. Centers for Reproductive Medicine, ²DAHFMO, Unit of Histology and Medical Embryology, Sapienza University of Rome

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Blastozystenbiopsie und Vitrifikation sind erforderlich, um Präimplantations-Gentests effizient durchzuführen. Ein Ansatz, der die sequenzielle Öffnung der Zona pellucida und die Rückgewinnung von 7-8 Trophektodermzellen in Tag 5-7 nach der Besamung einschließt, begrenzt sowohl die Anzahl der erforderlichen Manipulationen als auch die Exposition des Embryos gegenüber suboptimalen Umweltbedingungen.

Zusammenfassung

Blastozysten-Biopsie wird durchgeführt, um eine zuverlässige genetische Diagnose während IVF-Zyklen mit Präimplantations-Gentests zu erhalten. Dann beinhaltet der ideale Arbeitsablauf ein sicheres und effizientes Verglasungsprotokoll, aufgrund der Durchlaufzeit der Diagnostischen Techniken und die Übertragung der ausgewählten Embryonen auf ein physiologisches Endometrium in einem folgenden natürlichen Zyklus. Ein Biopsieansatz, der die sequenzielle Öffnung der Zona pellucida und die Rückgewinnung von 5-10 Trophektodermzellen (idealerweise 7-8) umfasst, begrenzt sowohl die Anzahl der erforderlichen Manipulationen als auch die Exposition des Embryos gegenüber suboptimalen Umgebungsbedingungen. Nach der richtigen Schulung war die Technik bei verschiedenen Bedienern reproduzierbar in Bezug auf den Zeitpunkt der Biopsie (8 min, 3-22 min basierend auf der Anzahl der Embryonen bis zur Biopsie pro Schale), schlüssige Diagnosen erhalten (97,5%) und Lebendgeburten nach verglast-gewärmerwärmener euploiden Blastozystenübertragung (>40%). Die Überlebensrate nach Biopsie, Verglasung und Erwärmung lag bei 99,8%. Die Re-Expansionsrate bei 1,5 h aus der Erwärmung betrug bis zu 97%, weitgehend abhängig vom Zeitpunkt zwischen Biopsie und Vitrifikation (idealerweise 30 min), blastozystmorphologischeR Qualität und Tag der Biopsie. Im Allgemeinen ist es besser, eine zusammengebrochene Blastozyste zu vitrify; Daher kann in Nicht-PGT-Zyklen laserunterstützte künstliche Schrumpfung durchgeführt werden, um den Embryokollaps vor der Kryokonservierung zu induzieren. Die vielversprechendste Zukunftsperspektive ist die nicht-invasive Analyse der IVF-Kulturmedien nach Blastozystenkultur als vermeintliche Quelle embryonaler DNA. Diese potenzielle Avantgarde wird jedoch noch untersucht, und ein zuverlässiges Protokoll muss noch definiert und validiert werden.

Einleitung

Das Hauptziel der modernen menschlichen Embryologie ist es, die Anzahl der Lebendgeburten pro stimulierten Zyklus zu maximieren und Kosten, Zeit und Anstrengungen zu reduzieren, um eine Schwangerschaft zu erreichen. Um dieses Ziel zu erreichen, sollten validierte Ansätze für die Embryonenauswahl verwendet werden, um reproduktiv kompetente Embryonen innerhalb einer Kohorte zu identifizieren, die während eines IVF-Zyklus erhalten wurde. Nach den neuesten Erkenntnissen ist Blastozystenkultur¹ in Kombination mit umfassenden Chromosomentests und verglast-gewärmtem euploiden Embryotransfer (ET) der effizienteste Rahmen zur Steigerung der IVF-Effizien....