यह लेख पिलोकार्पाइन-प्रेरित मिर्गी चूहों में स्मृति हानि का आकलन करने के लिए प्रायोगिक प्रक्रियाएं प्रस्तुत करता है। इस प्रोटोकॉल का उपयोग मिर्गी से जुड़े संज्ञानात्मक गिरावट के रोगोपैथी तंत्र का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है, जो मिर्गी में सबसे आम comorbidities में से एक है।
संज्ञानात्मक हानि लौकिक पालि मिर्गी में सबसे आम comorbidities में से एक है। मिर्गी के एक पशु मॉडल में मिर्गी से जुड़े संज्ञानात्मक गिरावट को फिर से तैयार करने के लिए, हमने पिलोकार्पाइन-इलाज क्रोनिक मिर्गी चूहों को उत्पन्न किया। हम इन मिर्गी चूहों का उपयोग करके तीन अलग-अलग व्यवहार परीक्षणों के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं: उपन्यास ऑब्जेक्ट स्थान (एनएल), उपन्यास ऑब्जेक्ट रिकग्निशन (नहीं), और पैटर्न पृथक्करण (पीएस) परीक्षण क्रमशः स्थानों, वस्तुओं और संदर्भों के लिए सीखने और स्मृति का मूल्यांकन करने के लिए। हम बताते हैं कि कैसे व्यवहार तंत्र सेट करने के लिए और एनएल, नहीं, और पीएस परीक्षण के लिए प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं को एक खुले क्षेत्र परीक्षण के बाद प्रदान करते हैं जो जानवरों की बेसल लोकोमोटर गतिविधियों को मापता है। हम मिर्गी चूहों में स्मृति समारोह का आकलन करने के लिए अन्य व्यवहार परीक्षणों के संबंध में एनएल, नो और पीएस परीक्षणों के तकनीकी फायदों का भी वर्णन करते हैं। अंत में, हम मिर्गी चूहों के लिए संभावित कारणों और समाधानों पर चर्चा करते हैं जो परिचित सत्रों के दौरान वस्तुओं के साथ 30 एस अच्छा संपर्क बनाने में विफल रहे हैं, जो सफल स्मृति परीक्षणों के लिए एक महत्वपूर्ण कदम है। इस प्रकार, यह प्रोटोकॉल चूहों का उपयोग करके मिर्गी से जुड़ी स्मृति हानि का आकलन करने के बारे में विस्तृत जानकारी प्रदान करता है। एनएल, नहीं, और पीएस परीक्षण सरल, कुशल परख है कि मिर्गी चूहों में स्मृति के विभिन्न प्रकार के मूल्यांकन के लिए उपयुक्त हैं।
मिर्गी एक पुरानी विकार है जो सहज आवर्ती दौरे1,2,3की विशेषता है । क्योंकि दोहराव बरामदगी मस्तिष्क में संरचनात्मक और कार्यात्मक असामान्यताओं का कारण बन सकता है1,,2,,3,असामान्य जब्ती गतिविधि संज्ञानात्मक रोग में योगदान कर सकती है, जो सबसे आम मिर्गी से जुड़े कोऑर्बिडिटीज4,,5,,6में से एक है। पुरानी जब्ती की घटनाओं के विपरीत, जो क्षणिक और क्षणिक हैं, संज्ञानात्मक हानि मिर्गी के रोगियों के जीवन भर में बनी रह सकती है, जिससे उनके जीवन की गुणवत्ता बिगड़ती जा रही है । इसलिए, मिर्गी से जुड़े संज्ञानात्मक गिरावट के पैथोफिजियोलॉजिकल तंत्र को समझना महत्वपूर्ण है।
मिर्गी के विभिन्न प्रायोगिक पशु मॉडलों का उपयोग क्रोनिक मिर्गी7,8,,9,,10,,11,12से जुड़े सीखने और स्मृति घाटे को प्रदर्शित करने के लिए किया गया है । उदाहरण के लिए, मॉरिस पानी भूलभुलैया, प्रासंगिक भय कंडीशनिंग, छेद बोर्ड, उपन्यास वस्तु स्थान (एनएल), और उपन्यास वस्तु मांयता (नहीं) परीक्षण अक्सर लौकिक पालि मिर्गी (TLE) में स्मृति रोग का आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है । क्योंकि हिप्पोकैम्पस प्राथमिक क्षेत्रों में से एक है जिसमें TLE पैथोलॉजी दिखाता है, व्यवहार परीक्षण जो हिप्पोकैम्पस-निर्भर स्मृति समारोह का मूल्यांकन कर सकते हैं, अक्सर अधिमानतः चयनित होते हैं। हालांकि, यह देखते हुए कि दौरे एग्क्रांत हिप्पोकैम्पस न्यूरोजेनेसिस को प्रेरित कर सकते हैं और मिर्गी से जुड़े संज्ञानात्मक गिरावट10में योगदान कर सकते हैं, नवजात न्यूरोनल फ़ंक्शन (यानी, स्थानिक पैटर्न जुदाई, पीएस)8,,13 के परीक्षण के लिए व्यवहार के प्रतिमान मिर्गी में स्मृति हानि के सेलुलर तंत्र के बारे में मूल्यवान जानकारी भी प्रदान कर सकते हैं।
इस लेख में, हम मिर्गी चूहों के लिए स्मृति परीक्षण, एनएल, नो और पीएस की बैटरी प्रदर्शित करते हैं। परीक्षण सरल और आसानी से सुलभ हैं और एक परिष्कृत प्रणाली की आवश्यकता नहीं है।
यह काम पुरानी मिर्गी के साथ चूहों में संज्ञानात्मक कार्य के मूल्यांकन के लिए प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं का वर्णन करता है। चूहों 18में सीखने और स्मृति कार्यों का आकलन करने के लिए कई अलग – अलग व्यव?…
The authors have nothing to disclose.
हम डॉ जए-मिन ली को उनके तकनीकी सहयोग के लिए धन्यवाद देते हैं । इस काम को कोरियाई सरकार (एनआरएफ-2019R1A2C1003958, एनआरएफ-2019K2A9A2A080000167) द्वारा वित्त पोषित नेशनल रिसर्च फाउंडेशन ऑफ कोरिया (एनआरएफ) अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था।
1 ml syringe | Sung-shim | Use with the 26 or 30 gauge needle | |
70% Ethanol | Duksan | UN1170 | Spray to clean the box and objects |
black curtain | For avoiding unnecessary visual cues | ||
Cresyl violet | Sigma | C5042 | For Cresyl violet staining |
cryotome | Leica | E21040041 | For tissue sectioning |
double-sided sticky tape | For the firm placement of the objects | ||
DPX mounting medium | Sigma | 06522 | |
ethanol series | Duksan | UN1170 | Make 100%, 95%, 90%, 80%, 70% ethanol solutions |
floor plate with narrow grid patterns | Leehyo-bio | Behavioral experiment equipment, plate size: 42.5 x 42.5 x 0.5 cm, grid size: 2.75 x 2.75 cm | |
floor plate with wide grid patterns | Leehyo-bio | Behavioral experiment equipment, plate size: 42.5 x 42.5 x 0.5 cm, grid size: 5.5 x 5.5 cm | |
illuminometer | TES Electrical Electronic Corp. | 1334A | For the measurement of the room lighting (60 Lux) |
Intensive care unit | Thermocare | #W-1 | |
ketamine hydrochloride | Yuhan | 7003 | Use to anesthetize the mouse for transcardial perfusion |
LED lamp | Lungo | P13A-0422-WW-04 | Lighting for the behavioral test room |
objects | Rubber doll, 50 ml plastic tube, glass Coplin jar, plastic T-flask, glass bottle | ||
open field box | Leehyo-bio | Behavioral experiment equipment, size: 44 x 44 x 31 cm | |
paper towel | Yuhan-Kimberly | 47201 | Use to dry open field box and objects |
paraformaldehyde | Merck Millipore | 104005 | Make 4% solution |
pilocarpine hydrochloride | Sigma | P6503 | |
ruler | Use to locate the objects in the open field box | ||
scopolamine methyl nitrate | Sigma | S2250 | Make 10X stock |
Smart system 3.0 | Panlab | Video tracking system | |
stopwatch | Junso | JS-307 | For the measurement of explorative activities of mice |
sucrose | Sigma | S9378 | For cryoprotection of tissue sections |
terbutaline hemisulfate salt | Sigma | T2528 | Make 10X stock |
video camera (CCD camera) | Vision | VCE56HQ-12 | Place the camera directly overhead of the open field box |
xylazine (Rompun) | Bayer korea | KR10381 | Use to anesthetize the mouse for transcardial perfusion |
xylene | Duksan | UN1307 | For Cresyl violet staining |