El bypass gástrico Roux-en-Y (RYGB) se realiza para tratar la obesidad y la diabetes. Sin embargo, los mecanismos que subyacen a la eficacia de RYGB no se entienden completamente, y los estudios están limitados por la dificultad técnica que conduce a una alta mortalidad en modelos animales. Este artículo proporciona instrucciones sobre cómo realizar RYGB en ratas con altas tasas de éxito.
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Artículo de método
Un Protocolo Para Roux-en-Y Bypass Gástrico En Ratas Usando Grapadoras Lineales
En este artículo
Resumen
Resumen
El bypass gástrico Roux-en-Y (RYGB) se realiza comúnmente para el tratamiento de la obesidad severa y la diabetes tipo 2. Sin embargo, el mecanismo de pérdida de peso y los cambios metabólicos no se entienden bien. Se cree que múltiples factores desempeñan un papel, incluida la reducción de la ingesta calórica, la disminución de la absorción de nutrientes, el aumento de la saciedad, la liberación de hormonas promotoras de la saciedad, los cambios en el metabolismo de los ácidos biliares y las alteraciones en la microbiota intestinal.
El modelo RYGB de rata presenta un marco ideal para estudiar estos mecanismos. Los trabajos previos en modelos de ratón han tenido altas tasas de mortalidad, que oscilan entre el 17 y el 52%, lo que limita su adopción. Los modelos de ratas demuestran una reserva fisiológica al estímulo quirúrgico y son técnicamente más fáciles de adoptar, ya que permiten el uso de grapadoras quirúrgicas. Un desafío con las grapadoras quirúrgicas, sin embargo, es que dejan a menudo una bolsa gástrica grande que no sea representativa de RYGB en seres humanos.
En este protocolo, presentamos un protocolo de RYGB en las ratas que dan lugar a una pequeña bolsa gástrica usando grapadoras quirúrgicas. Utilizando dos fuegos de grapadora que quitan el forestomach de la rata, obtenemos una bolsa gástrica más pequeña similar a ésa que sigue un RYGB humano típico. El grapado quirúrgico también da lugar a una mejor hemostasia que la división aguda. Además, el forestomach de la rata no contiene ninguna glándula y su retiro no debe alterar la fisiología de RYGB.
La pérdida de peso y los cambios metabólicos en la cohorte de RYGB fueron significativos en comparación con la cohorte simulada, con una tolerancia a la glucosa significativamente menor a las 14 semanas. Además, este protocolo tiene una excelente supervivencia del 88,9% después de RYGB. Las habilidades descritas en este protocolo se pueden adquirir sin experiencia microquirúrgica previa. Una vez dominado, este procedimiento proporcionará una herramienta reproducible para el estudio de los mecanismos y efectos de RYGB.
Introducción
La obesidad y la diabetes tipo 2 se han convertido en epidemiasmundiales 1. Aunque la pérdida de peso médica puede mejorar la diabetes en los pacientes, aquellos con diabetes grave se benefician más de la cirugía bariátrica. La cirugía bariátrica ha demostrado ser segura y eficaz para bajar de peso y mejorar o curar la diabetes tipo2 2,3,incluso en aquellos con enfermedad de larga data4. Los procedimientos bariátricos metabólicos, como la actual cirugía de bypass gástrico estándar de Roux-en-Y (RYGB), inducen mejoras rápidas y sostenidas en la homeostasis de la g....
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Protocolo
Los protocolos de uso de animales fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Alberta (AUP00003000). Consulte la Figura 1 para obtener un diagrama que muestra la anatomía de RYGB.
1. Bypass gástrico Roux-en-Y
- Preparación de animales y configuración operativa
- Una semana antes de la cirugía, proporcione a las ratas terapia de rehidratación oral y dieta líquida, además de su dieta sólida y agua para aclimatarlas a esta nueva dieta.
- Ratas rápidas con sólo acceso al agua durante 12-18 h antes de la cirugía.
- Asegúrese de que las ratas estén en ....
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Resultados
Animales y alojamiento
36 ratas Wistar machos fueron alojadas en parejas y fueron alimentadas con un 60% de dietas estériles de roedores ricos en grasas a partir de las seis semanas de edad(Figura 2). En 16 semanas de la edad, experimentaron RYGB o cirugía del impostor. Después de la primera semana postoperatoria, las ratas fueron reasumídas en una dieta de alto contenido en grasas. La mitad de las ratas fueron euthanized en 2 semanas postoperatorias y la otra mitad eutha.......
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Discusión
RYGB implica la creación de una pequeña bolsa gástrica (menos de 30 mL), y la creación de una extremidad biliopancreática y una extremidad Roux (Figura 1). En los seres humanos, el miembro biliopancreático es típicamente de 30 a 50 cm y transporta secreciones del remanente gástrico, el hígado y el páncreas. La extremidad de Roux es típicamente de 75 a 150 cm de longitud y es el canal principal para los alimentos ingeridos. El canal común es el intestino delgado restante distal a donde se une.......
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Divulgaciones
Ethicon suministró dos grapadoras de corte lineal de 45 mm, múltiples recargas de grapadoras de 3,5 mm y suturas de polipropileno 6-0. Los autores no tienen otros conflictos de intereses que declarar.
Agradecimientos
Este estudio fue financiado por el Premio de Investigación de la Sociedad Americana de Cirugía Metabólica y Bariátrica. Ethicon amablemente suministró suturas, grapadoras y clips. La investigación doctoral del autor principal fue financiada por el Programa de Investigadores Clínicos de la Universidad de Alberta y la Beca de Clínicos De Alberta Innovates. También nos gustaría agradecer a Michelle Tran por su ilustración médica de la anatomía de RYGB.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 2-0 Suturas de seda | Ethicon | K533 | |
| 3-0 Suturas de Vicryl | Ethicon | J219H | |
| 4% Isoflurano | N/A | N/A | |
| 5% Dextrosa y solución de cloruro de sodio al 5% - 1000 mL | Baxter | 2B1064 | |
| 50 mL Tubos de centrífuga cónicos | Fisher Scientific | 14-432-22 | |
| 6-0 Suturas de Prolene | Ethicon | 8805H | |
| Máquina de anestesia | N/A | N/A | |
| Afeitadora de pelo animal | N/A | N/A | |
| Betadine Solution | N/A | N/A | |
| Castrojievo Portaagujas con cerradura 14 cm (curva lisa) | World Precision Instruments | 503258 | |
| ECHELON FLEX Cortador lineal endoscópico articulado | Ethicon | Pinzas económicas EC45A | |
| #4 | World Precision Instruments | 501978 | |
| ENDOPATH ETS Cortador lineal articulado de 45 mm Recargas | Ethicon | 6R45B | |
| Controlador de almohadilla calefactora de infrarrojo lejano con almohadilla calefactora (15,2 cm de ancho x 20,3 cm de largo), sonda de temperatura de la almohadilla y 10 protectores de manga desechables no estériles | Kent Scientific | RT-0515 | |
| Collar | isabelino de rata grandeTubo | EC404VL-10 | |
| Liquid Diet (150 mL) | Bio-Serv | 9007 | |
| Soporte para tubo de alimentación para dieta líquida (corto ajustable) | Bio-Serv | 9015 | |
| Micro Pinzas para mosquitos | World Precision Instruments | 500452 | |
| Micro Tijeras | World Precision Instruments | 503365 | |
| Dieta para ratones, alta en grasas Calorías (60%), pellets blandos | Bio-Serv | S3282 | |
| n.º 11 Mango de hoja y bisturí | N/A | N/A | |
| Microscopio quirúrgico OPMI Vario | ZEISS | S88 | |
| Rejilla para suelo elevado | Tecniplast | GM500150 Rejilla | |
| Dieta líquida para roedores, Lieber-DeCarli '82, Control, 4 litros/bolsa | Bio-Serv | F1259 | |
| Solución de irrigación con cloruro de sodio al 0,9% - 500 mL | Baxter | JF7633 | |
| Hisopos de algodón estéril | N/A | N/A | |
| Cortina estéril | N/A | N/A | |
| Toalla estéril | N/A | N/A | |
| Unidad de cauterio térmico | World Precision Instruments | 501293 |
Referencias
- World Health Organization. Obesity and Overweight. , Available from: http://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/obesity-and-overweight (2018).
- Courcoulas, A. P., et al. Three-year outcomes of bariatric surgery vs lifestyle intervention for type 2 diabetes mellitus treatment. JAMA Surgery. 15213 (10)....
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Reimpresiones y permisos
