Qui, presentiamo un protocollo per la denervazione simpatica renale (RDN) nei topi con ipertensione indotta dall'infusione di angiotensina II. La procedura è ripetibile, conveniente e consente di studiare i meccanismi regolatori della RDN sull'ipertensione e l'ipertrofia cardiaca.
È richiesta un abbonamento a JoVE per visualizzare questo contenuto. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Articolo metodologico
Miglioramento della denervazione renale ha attenuato l'ipertensione indotta dall'infusione di angiotensina II
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
I benefici della denervazione simpatica renale (RDN) sulla pressione sanguigna sono stati dimostrati in un gran numero di studi clinici negli ultimi anni. Tuttavia, il meccanismo regolatore di RDN sull'ipertensione rimane elusivo. Pertanto, è essenziale stabilire un modello RDN più semplice nei topi. In questo studio, mini pompe osmotiche riempite con angiotensina II sono state impiantate in topi C57BL / 6 di 14 settimane. Una settimana dopo l'impianto della pompa mini-osmotica, è stata eseguita una procedura RDN modificata sulle arterie renali bilaterali dei topi usando fenolo. Ai topi di sesso di età corrispondente è stata somministrata soluzione salina e serviti come gruppo fittizio. La pressione sanguigna è stata misurata al basale e successivamente ogni settimana per 21 giorni. Quindi, l'arteria renale, l'aorta addominale e il cuore sono stati raccolti per l'esame istologico utilizzando H & E e la colorazione Masson. In questo studio, presentiamo un modello RDN semplice, pratico, ripetibile e standardizzato, che può controllare l'ipertensione e alleviare l'ipertrofia cardiaca. La tecnica può denervare i nervi simpatici renali periferici senza danni alle arterie renali. Rispetto ai modelli precedenti, l'RDN modificato facilita lo studio della patobiologia e della fisiopatologia dell'ipertensione.
Introduzione
L'ipertensione è una delle principali malattie cardiovascolari croniche in tutto il mondo. L'ipertensione incontrollata potrebbe danneggiare gli organi bersaglio e contribuire a insufficienza cardiaca, ictus e malattie renali croniche 1,2,3. La prevalenza dell'ipertensione è aumentata dal 20% al 31% tra il 1991 e il 2007 in Cina. Il numero di adulti con ipertensione in Cina potrebbe raddoppiare a seguito di una recente revisione dei criteri diagnostici per l'ipertensione (130/80 mmHg)4. L'ipertensione può essere controllata dalla medicina, tuttavia, ci....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Protocollo
Tutte le procedure sperimentali sugli animali sono conformi alla guida etica pertinente per la cura e l'uso degli animali da laboratorio (pubblicazione NIH n. 85-23, rivista nel 2011) e sono state approvate dai comitati per la ricerca sugli animali dell'ospedale Huadong affiliato all'Università Fudan. Topi maschi C57BL / 6 di quattordici settimane (28-30g) sono stati divisi casualmente in quattro gruppi: gruppo Sham, gruppo Sham + Ang II, gruppo RDN, gruppo RDN + Ang II, n = 6 in ciascun gruppo. Tutti gli animali sono stati mantenuti in specifiche condizioni chiuse prive di agenti patogeni in una stanza a temperatura controllata a 24 ± 1 °C con un ciclo luce/buio di 1....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Risultati
Statistica
Tutti i dati sono espressi come media ± deviazione standard. ANOVA unidirezionale è stato utilizzato per esperimenti con tre o più condizioni seguiti da test posthoc Bonferroni per confronti tra singoli gruppi. Si consideri un valore p uguale o minore di 0,05 come significativo. Un software commerciale è stato utilizzato per eseguire tutte le analisi statistiche.
L'aumento della pressione arteriosa indotto da Ang II è stato attenuato dopo RDN
.......
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Discussione
Se RDN potrebbe abbassare la pressione sanguigna è diventato controverso dopo la pubblicazione del risultato negativo dello studio di symplicity HTN-3 7,25. Tuttavia, i numerosi studi clinici e gli esperimenti sugli animali hanno dimostrato risultati positivi ed efficaci di RDN su esseri umani e animali ipertesi 9,10,11,12,13,14,15,16,17.
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Dichiarazioni
Non ci sono conflitti di interesse, finanziari o di altro tipo, come dichiarato dagli autori.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato supportato dalla National Natural Science Foundation of China (81770420), dalla Science and Technology Commission della municipalità di Shanghai (20140900600), dallo Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), dalla Shanghai Municipal Key Clinical Specialty (shslczdzk02801) e dal Centro di malattia coronarica geriatrica, Huadong Hospital affiliato alla Fudan University.
....Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Angiotensina II | Sangon Biotech | CAS:4474-91-3 | Per realizzare un modello animol ipertensivo |
| Anticorpo anti-tirosina idrossilasi | Abcam | ab137869 | Per valutare l'espressione di TH dei nervi renali Analisi della |
| pressione sanguigna | Visitech Systems | BP-2000 | Misurare la pressione sanguigna dei topi |
| Mini-pompa osmotica | DURECT Corporation | CA 95014 | Per riempire con Angiotensina II |
| Noradrenalina ELISA Kit | Abcam | ab287789 | per misurare i livelli renali di noradrenalina |
| Fenolo | Sangon Biotech | CAS:108-95-2 | Danneggiare il nervo simpatico renale |
| Carta per pesare | Sangon Biotech | F512112 | Per distruggere il nervo renale con carta per pesare imbevuta di fenolo; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
Riferimenti
- Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update. JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).
- Lackland, D. T., et al. Implications of recent clinical trials....
Accesso limitato. Accedi o avvia una prova gratuita per visualizzare questo contenuto.
Ristampe e permessi
