본 프로토콜은 쥐의 성공적인 자궁 이식(UTx)을 위한 모든 필수 단계를 설명합니다. 래트 모델은 UTx의 임상적 구현을 촉진하는 데 적합한 것으로 입증되었습니다. 그러나 쥐 UTx는 신중한 지침이 필요한 매우 복잡한 절차입니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
자궁 이식(UTx)은 절대 자궁 인자 불임(AUFI)이 있는 여성을 치료하기 위한 새로운 접근 방식입니다. 여성의 약 3%-5%가 AUFI를 앓고 있습니다. 이 여성들은 UTx가 출현 할 때까지 아이를 가질 수있는 선택권을 박탈 당했습니다. UTx의 임상적 적용은 동물에 대한 실험적 연구에 의해 주도되었으며, 최초의 성공적인 UTx는 쥐에서 달성되었습니다. 생리학적, 면역학적, 유전적, 생식적 특성을 감안할 때 쥐는 이러한 이식에 적합한 모델 시스템입니다. 특히, 실험적 UTx의 일반적인 종점은 출산을 통한 성공적인 임신이기 때문에 짧은 임신 기간은 분명한 이점입니다. 쥐 모델의 가장 큰 과제는 고급 미세 수술 기술과 경험이 필요한 작은 해부학으로 남아 있습니다. UTx가 클리닉에서 임신으로 이어졌지만 절차가 확립되지 않았으며 지속적인 실험 최적화가 필요합니다. 여기에서는 쥐 UTx에 대한 필수 문제 해결을 포함하여 자세한 프로토콜이 제시되며, 이는 이러한 유형의 미세 수술에 대한 경험이 없는 사람들이 전체 절차를 더 쉽게 이해할 수 있도록 할 것으로 기대됩니다.
서론
자궁 이식(UTx)은 절대 자궁 인자 불임(AUFI)에 대한 새로운 치료법입니다. AUFI는 자궁의 부재(선천적 또는 후천적) 또는 기형으로 인해 발생하며 전 세계 여성의 3%-5%에 영향을 미칩니다1. 윤리적, 법적 또는 종교적 이유로 모성에 대한 욕구가 있지만 AUFI2로 고통받는 많은 여성의 입양이나 대리모를 배제합니다. 이 여성들에게 UTx는 자신의 가족을 시작할 수 있는 유일한 옵션으로 남아 있습니다. UTx는 엇갈린 성공을 거두었지만 클리닉에 적용되었습니다. 이 절차는 기술적으로 까다롭고 임상 확립을 위해 꾸준한 개선이 필요합니다.
2014년, 살아있는 기증자(LD)로부터 자궁을 이식하여 성공적인 임신을 이룩한 것은 스웨덴의 선구적인 그룹인 Brännström3에 의해 수행되었습니다. 사망한 기증자(DD)의 UTx 이후 첫 번째 출생은 2016년 브라질에서 보고되었습니다4. 2021년까지 전 세계적으로 80개 이상의 UTx가 수행되었지만 성공률은 약 50%이고 대다수는 LD에서 이식편이 나왔습니다1.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
프로토콜
모든 동물 실험은 스위스 연방 동물 규정에 따라 수행되었으며 취리히 수의과(n° 225/2019)의 승인을 받아 인간의 보살핌을 보장합니다. 암컷 처녀 루이스 쥐(체중 170-200g)와 암컷 처녀 브라운 노르웨이 쥐(170-200g)를 자궁 기증자/수혜자로 사용했으며 수컷 루이스 쥐(300-320g)를 짝짓기에 사용했습니다. 쥐는 12-15 개월에서 숙성되었습니다. 동물들은 상업적 출처 ( 재료 표 참조)에서 얻었으며 물과 표준 식품에 자유롭게 접근 할 수있는 통제 된 조건과 풍부한 환경에서 사육되었습니다.
1. 자궁 회수
참고: 절차에 대한 자세한 내용은 이전에 게시된 보고서12,13,15를 참조하십시오.
- 동봉된 플렉시글라스 용기(14cm x 25cm x 13cm) 내에서 이소플루란과 산소로 1-2분 동안 마취를 유도합니다(O2 중 5부피% 이소플루란).
- 수술 30분 전에 계획된 복부 절개 부위에 부프레노르핀(0.0....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
두 그룹의 쥐의 결과가 제시됩니다. UTx는 수정 전(그룹 1, n = 8) 및 후(그룹 2, n = 8) 프로토콜 조정(표 1)을 수행하여 수정의 효과를 입증했습니다(수정에 대한 설명은 토론 참조)12,15,21.
쥐 UTx의 결과는 세 가지 주요 단계와 관련이 있습니다. 첫 번째 단계는 UTx에서 성공적으로 복구하는 것입니다. 일반적으로 수혜자는 수술 후 처음 2일 이내에 회복되어야 합니다. 두 번째 단계는 수술 후 2 주 후 이식편의 건강 상태와 관련이 있으며, 이는 짝짓기 과정에 포함시키는 것을 결정합니다 (표 2). 세 번째 단계는 자발적인 짝짓기 후 생식력의 증거로 성공적인 출산을 포함합니다.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
여기에 제시된 프로토콜은 쥐의 자궁 이식 이면에 있는 외과적 접근에 대한 자세한 지침을 제공합니다. 이 프로토콜은 UTx 및 후속 짝짓기 후 출생 확률을 높이도록 최적화되었습니다. 원래 프로토콜은 Akouri et al.10의 마우스 작업에서 영감을 받아 Brännström 그룹12,13에서 인수되었으며 지난 몇 년 동안 저자의 경험을 기반으로 수정되었습니다. 따라서 수정은 실패한 이식에서 재현 가능한 결과로의 발전을 반영하는 진정한 학습 곡선에 의해 주도되었습니다.
결정적인 주요 수정은 다음과 같습니다: (1) 장기 회수 및 문합 중에 세척 용액에 자일라진을 첨가하여 혈전 위험을 감소시키는 혈관 확장을 자극했습니다. (2) 동맥 종단 간 문합을 위한 중단 봉합사의 사용. 중단 된 봉합사는 개통에 대한 외과 적 통제를 증가시킬뿐만 아.......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
저자는 경쟁 이익이 없다고 선언합니다.
감사의 글
이 연구는 스위스 국립 과학 재단 (프로젝트 보조금 번호 310030_192736)의 지원을 받았습니다. 조직병리학적 지원을 해주신 취리히 대학교 수의병리학 연구소의 Frauke Seehusen 박사에게 감사드립니다.
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 측면 가위 5mm | F.S.T | 15008-08 | |
| 큰 종이 클립 | 지 않음 | 견인 | |
| 사용 무딘 굽힘 바늘 G30 | Unimed S.A. | ||
| 부피바카인 0.5% | 신테카 | ||
| 부프레노르핀 0.3 mg/mL | 템게식 | ||
| 도시에나델 G25 | H.SIGRIST & PARTNER AG | ||
| Dumont #5SF 집게 | F.S.T | 11252-00 | |
| Ethilon 10/0 | Ethicon | 2810G | |
| Ethilon 6/0 | Ethicon | 667H | |
| Ethilon 7/0 | Ethicon | EH7446H | |
| Ethilon 8/0 | Ethicon | 2808G | |
| Femal Brown 노르웨이 쥐 (150-170 g) | Janvier | ||
| Femal Lewis Rats (150-170 g) | Charles River Deutschland | ||
| Fine Scissors - Sharp | F.S.T | 14060-09 | 다른 작은 가위도 작동합니다 |
| Halsey Micro Needle Holder | F.S.T | 12500-12 | 다른 작은 needholder도 작동합니다 |
| Heparin Natrium 25000 I.E./ 5 mL | B. Braun | ||
| Institute Georges Lopez 관류 용액 ( IGL) | Institute Georges Lopez | 장기 보존 솔루션 | |
| 수컷 루이스 쥐 (300-320 g) | Charles River Deutschland | ||
| Micro Serrefines 13 mm | F.S.T | 18055-04 | |
| Micro Serrefines 16 mm gebogen | F.S.T | 18055-06 | |
| Micro-Serrefine 클램프 애플리케이터와 잠금장치 | F.S.T | 18056-14 | |
| 엠&옴; lnlyncke Op 타월 | Mö lnlyncke | 800300 | 멸균 드레이프 |
| NaCl 0.9% | B.Braun | ||
| Octenisept | Schü lke | ||
| 종이 테이프 | Tesa | 동물 고정용 | |
| Philips Avent Schneller Flaschenwä rmer SCF358/02 | Philips | 12824216 | |
| Ringerfundin | B.Braun | ||
| Rompun 2% | Bayer | Xylazine | |
| 둥근 손잡이 바늘 홀더 | F.S.T | 12075-12 | |
| 둥근 손잡이 바늘 홀더 | F.S.T | 12075-12 | |
| S& T 혈관 확장 집게 - 각도 45° | F.S.T | 00276-13 | |
| Sacryl Naht | KRUUSE | 152575 | |
| Scapel No 10 | Swann Morton | 201 | |
| Small Histo-Container | 모든 작은 히스토 컨테이너는 이식편의 냉장 보관에 적합합니다 | ||
| Small Plastik Bags | 모든 투명 비닐 백은 괜찮습니다 | ||
| 멸균 면봉 | Lohmann-Rauscher | 모든 멸균 면봉은 미세 | |
| 멸균 거즈 | Lohmann-Rauscher | 모든 멸균 거즈는 미세 | |
| 스트레이트 가위 8mm | F.S.T | 15024-10 | |
| 수술 현미경 – SZX9 | Olympus | OLY-SZX9-B | |
| Sutter Non Stick GLISS 0.4 mm | Sutter | 78 01 69 SLS | |
| 봉합 묶는 펑크 | F.S.T | 00272-13 | |
| ThermoLux 온난화 매트 | ThermoLux | ||
| 피부용 | 펜치 모든 티슈 펜치는 세밀한 | ||
| Vesseldilatator 펜치 | F.S.T | 00125-11 | |
| Vicryl 플러스 4/0 | Ethicon | VCP292H |
참고문헌
- Richards, E. G., et al. Uterus transplantation: state of the art in 2021. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 38 (9), 2251-2259 (2021).
- Jones, B. P., et al. Op....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
