Retrograde Markierung von retinalen Ganglienzellen durch Anwendung von Fluoro-Gold auf der Oberfläche des Colliculus superior

Zusammenfassung

Dieses Video beschreibt die Methode der retrograden Markierung von RGC indem Fluor-Gold (FG) auf der Oberfläche des Colliculus superior (SC). Technik umfasst das Bohren des Schädels, das Absaugen des Kortex, und die Anwendung Gelatineschwamm über den gesamten dorsalen Oberfläche des SC.

Zusammenfassung

Retinalen Ganglienzellen (RGC) Zählen ist notwendig, um die Degeneration der Netzhaut vor allem bei Glaukom zu bewerten. Zuverlässige RGC Kennzeichnung ist von grundlegender Bedeutung für die Beurteilung der Auswirkungen der Behandlung. Bei Ratten beträgt ca. 98% der RGCs bekannt, zur kontralateralen Colliculus superior (SC) (Forrester und Peters, 1967) Projekt. Anwenden von Fluor-Gold (FG) auf der Oberfläche der SC-Label fast alle RGCs, so dass wir auf diesem am stärksten gefährdeten retinalen Neurons in Glaukom konzentrieren können. FG wird durch das Axon-Terminals von retinalen Ganglienzellen genommen und bilateral retrograd seiner SOMAS in der Netzhaut transportiert. Vergleichen mit retrograde Markierung von RGC indem FG am Stumpf des durchtrennten Sehnerven für 2 Tage, ist die Einmischung der RGC Überleben minimiert. Vergleichen mit Kresylviolett-Färbung, die Flecken RGCs, Amakrinzellen und Endothel der Blutgefäße in der Netzhaut Ganglienzellen, diese Kennzeichnung Methode genauer auf die RGC ist. Dieses Video beschreibt die Methode der retrograden Markierung von RGC indem FG auf der Oberfläche des SC. Das chirurgische Verfahren umfassen das Bohren der Schädel; Absaugen der Rinde in den SC aussetzen und die Anwendung Gelatineschwamm über den gesamten dorsalen Oberfläche des SC gezeigt. Nützliche Tipps zur Vermeidung von massiven Hirnblutungen und Streben des SC gegeben worden.

Protokoll

1. Betäuben die Ratte durch intraperitoneale Injektion von Ketamin (80mg/kg) und Xylazin (8mg/kg) (Volumen-Verhältnis bei 2:1). Bewerben sterile Auge Schmiermittel Salbe zu verhindern Trocknung der Hornhaut während der Operation.
2. Shave den Kopf Pelz (von Auge zu Ohr-Ebene) und fixieren Sie den Kopf auf den Kopf der Bühne durch einen Kopf Klammer und setzen Sie seine Schneidezähne im Schneidezahn bar.
3. Desinfiziert den Betrieb mit 10% Povidon-Iod-Lösung um 70% Alkohol.
4. Schneiden Sie die Haut und Muskeln, um Schädel und Nähte (sagittalen, koronalen und transversalen Nähte) (Abbildung 1) aussetzen. Wenden Sie Schmerzmittel, Bupivacain als Spritzschutz an Schni....

Diskussion

1. Warum Sie diese OP-Methode für retinalen Ganglienzellen zu zählen?
   
   In Ratten etwa 98% der retinalen Ganglienzellen (RGC) ist bekannt, dass auf der Gegenseite Colliculus superior (SC)-Projekt. Anwenden von Fluor-Gold auf der Oberfläche der SC können fast alle Label der RGCs, so dass wir auf diesem am stärksten gefährdeten retinalen Neurons in Glaukom konzentrieren können. Vergleichen mit retrograde Markierung von RGC indem FG am Stumpf des durchtrennten Sehnerven für 2 Tage, ist die Einmischung der RGC Überleben minimiert. .......