Fotosentez

KavramlarEğitmen HazırlığıÖğrenci Protokolü
0 görüntüleme04:45 dk
Print Procedure Steps
  1. Bitki Pigment Kromatografisi ul class="lab-items">
  2. NOT: Bu deneyde kromatografi kağıdı kullanarak ıspanak yapraklarından pigmentleri ayıracaksınız. Bireysel pigmentler kağıt boyunca farklı oranlarda hareket eder ve farklı renklere sahip olabilir. Pigmentlerin kat ettiği bağıl mesafeyi, çözünürlük faktörlerini hesaplayarak ve bunları literatür değerleriyle karşılaştırarak farklı pigmentleri tanımlayabilirsiniz. HİPOTEZLER: Bu alıştırmada deneysel hipotez, ıspanak yaprakları içinde güneş ışığının farklı dalga boylarını emen birden fazla pigment olacağıdır. Sıfır hipotezi, ıspanak yaprağının içinde yalnızca bir tür pigment olduğudur.
  3. Kromatografi kağıdının bir ucundan iki santimetrelik bir çizgi oluşturmak için bir kalem kullanın.
  4. Ardından, 400 mL'lik temiz bir beherin üstüne yatay olarak bir boru temizleyici yerleştirin.
  5. Kromatografi şeridinin kalemle işaretlenmiş tarafını beherin altına yerleştirin.
  6. Ardından, kağıdı boru temizleyicinin etrafına, alt kenarı beherin altına zar zor değecek şekilde sarın ve ardından bir ataşla sabitleyin.
  7. Kağıt boru temizleyicinin etrafına sabitlendiğinde, beherden çıkarın ve ardından kromatografi kağıdı üzerindeki işaretli çizginin üzerine okşayarak kuru bir ıspanak yaprağı yerleştirin.
  8. Kalem çizgisi boyunca ıspanak yaprağının üzerine bir bozuk para yuvarlayın, birkaç kez ileri geri gidin ve sabit basınç uygulayın. Yaprak çıkarıldığında, yeşil bir çizgi açıkça mevcut olmalıdır.
  9. Ardından, behere 8 mL kromatografi çözücüsü yerleştirin.
  10. Kromatografi şeridini, kağıdın kenarı çözücüye değecek ancak yeşil çizgi değmeyecek şekilde behere indirin. Gerekirse boru temizleyiciyi ayarlayın.
  11. Beheri rahatsız etmeden, çözücüyü kağıtta yukarı doğru hareket ederken ve tek tek pigmentler ayrılırken gözlemleyin.
  12. Çözücü, kromatografi kağıdının yarısına kadar ilerlediğinde, bu yaklaşık 10 dakika sürecektir ve pigmentler iyi tanımlanmış bantlara ayrıldığında, kağıdı beherden çıkarın.
  13. Çözücünün ne kadar ilerlediğini bir kalemle işaretleyin ve ardından kağıdın kurumasını bekleyin. NOT: Çözücü hızla buharlaşır.
  14. Ardından, görünür bantların sayısını kaydedin ve renklerini ve göreceli boyutlarını tanımlayın.
  15. Çözücü ve pigmentlerin ne kadar ilerlediğini ölçün ve bu bilgiyi her pigment için Tablo 1'e kaydedin. Tablo 1'i indirmek için buraya tıklayın
  16. Kromatografi çözücüsünü çeker ocak altındaki bir atık kabına atın. Kromatografi şeritlerini normal çöp kutusuna atın ve ardından beherleri sabun ve suyla temizleyin.
  17. Vakumda Yüzen Yaprak Diskler ul class="lab-items">
  18. NOT: Bu deneyde, bir çözelti içinde yüzen bir yaprak diski kullanarak fotosentez ve hücresel solunumu dolaylı olarak gözlemleyeceksiniz. Fotosentez sırasında hava kabarcıkları yaprakların yüzmesine neden olur ve solunum sırasında diskler batar. HİPOTEZLER: Bu alıştırmada, deneysel hipotez, yaprak disklerinin bikarbonat çözeltisinde daha yüksek bir fotosentez hızına sahip olacağıdır, çünkü bikarbonat, fotosentezi beslemek için ilave CO2 sağlayarak daha fazla yaprak diskinin yüzmesine neden olur. Ek olarak, tüm diskler hücresel solunum gerçekleştirirken karanlık koşullarda batacaktır. Sıfır hipotezi, fotosentez hızında ve dolayısıyla bikarbonat ve su veya açık ve koyu tedaviler arasında yüzen disklerin sayısında hiçbir fark olmayacağıdır.
  19. Yaprak diskleri vakum altına yerleştirmek için önce pistonları iki adet 20 mL'lik şırıngadan çıkarın ve ardından her bir şırınga tüpünün içine 10 yaprak disk yerleştirin. Bir şırıngayı "bikarbonat" olarak etiketleyin ve diğer şırıngayı "su" olarak etiketleyin.
  20. Pistonları değiştirin ve şırıngada çok az miktarda hava kalana kadar pistonu itin. Yaprak disklere zarar vermemeye dikkat edin.
  21. Bikarbonat çözeltisinin 5 mL'sini şırıngalardan birine çekin. Yaprak diskleri çözelti içinde askıya almak için şırıngayı ters çevirin ve döndürün.
  22. Çözeltiyi dışarı atmadan veya yaprak disklere zarar vermeden mümkün olduğunca fazla havayı dışarı itin.
  23. Ardından 5 mL su solüsyonunu diğer şırıngaya çekin ve daha önce açıklandığı gibi döndürün (adım 3).
  24. Vakum oluşturmak için, pistonu geri çekerken bir parmağınızı şırınganın ucunun üzerinde tutun. Yaprak diskleri askıda tutmak için şırıngayı döndürürken bunu 10 saniye basılı tutun.
  25. Ardından, vakumu serbest bırakın. NOT: Diskler, solüsyonu dokularındaki hava boşluklarına emmiş olmalı ve battıklarını görmelisiniz. Diskler batmazsa, vakum oluşturma işlemini üç defaya kadar tekrarlayabilirsiniz.
  26. Ardından, plastik bir bardağa veya cam behere 50 mL bikarbonat çözeltisi ekleyin ve ardından diskleri bikarbonat vakum şırıngasından yavaşça ekleyin.
  27. Kontrol için, aynı miktarda suyu aynı bardağa ekleyin ve ardından yaprak diskleri su vakum şırıngasından ekleyin. Kapları uygun şekilde etiketleyin.
  28. Her iki bardağı da bir ışık kaynağının altına yerleştirin.
  29. Her beş dakikada bir, 20 dakika geçene kadar bardağın yüzeyinde yüzen disk sayısını Tablo 3'e kaydedin. Tablo 3'ü indirmek için buraya tıklayın
  30. Ardından, kapları ışık kaynağından çıkarın ve ardından yüzeydeki disklerin yüzeydeki herhangi bir gazla karışması için döndürün.
  31. Bardakları karanlık bir yere taşıyın. Her beş dakikada bir, 20 dakika geçene kadar yüzeyde yüzen yaprak disklerin sayısını kaydedin. Bardağı tekrar karanlığa koymadan önce her seferinde döndürün.
  32. Temizlemek için yaprak diskleri çöp kutusuna atın ve bikarbonat solüsyonunu kanalizasyona dökün. Şırıngaları ve bardakları iyice yıkayın.
  33. Results ul class="lab-items">
  34. NOT: İlk deneyde, ıspanak yapraklarından gelen pigmentlerin kromatografi kağıdı üzerinde ne kadar uzağa gittiğini gözlemlediniz. Farklı pigmentler, farklı dalga boylarında ışığı emer.
  35. Renkli kalemler veya kurşun kalemler kullanarak, pigment bantlarının ve çözücünün konumlarını Şekil 3'te çizin.
  36. Pigmentler için tutma faktörünü veya Rf değerlerini hesaplayın, bu da söz konusu pigmentin kağıdı çizgiden yukarı doğru hareket ettirdiği mesafeyi, çözücünün kağıdı çizgiden yukarı doğru hareket ettirdiği mesafeye bölerek yapılır.
  37. Pigmentin kimliğini belirlemek için hesaplanan Rf değerlerinizi Tablo 2'deki değerlerle karşılaştırın. Tablo 2'yi indirmek için buraya tıklayın
  38. Bu verileri Tablo 1'e kaydedin. NOT: İkinci deneyde, fotosentez ve solunumun dolaylı bir ölçümü olarak yüzen ve batan yaprak disklerini gözlemlediniz.
  39. Sonuçları, x ekseninde zaman ve dakika ve y ekseninde kayan disk sayısı ile grafiklendirin. Su kontrolünü ve bikarbonat arıtımını temsil etmek için iki farklı çizgi kullanın.
  40. Disklerin aydınlık durumdan çıkarıldığı ve karanlığa yerleştirildiği noktayı belirtmek için grafiğe bir çizgi ekleyin.
  41. Ardından, bikarbonat durumundan başlayarak, yaprak disklerin %50'sinin yüzdüğü noktayı belirlemek için grafiği kullanın. Bu, etkili süre veya ET50 olarak adlandırılır. NOT: Disklerin muhtemelen aydınlık durumda bir kez ve ardından karanlık durumda tekrar %50 kayan işaretine çarptığını fark edeceksiniz.
  42. Su numuneleriniz ET50 işaretine ulaşmış olabilir veya ulaşmamış olabilir. Yaptılarsa, bu örnek için satırı da ekleyin.
  43. Son olarak, ET50 değerlerinizi ve grafiklerinizi sınıfın geri kalanıyla karşılaştırın.

Browse More Videos

Bitki Pigment Kromatografisi