Aort Halka Testi

Summary

Anjiyogenez, önceden mevcut olan damarsal kan damarlarının çimlenme hem de doğal ve patolojik süreçleri ile ilişkilidir. Burada anjiyogenik potentiators ve inhibitörleri doğrudan kültür aort halkalar eklenecek sağlayan bir aort halka tahlil göstermektedir. Çimlenme ve neovessel akıbet aort halkaları 6-12 günlük bir süre içinde inceleyerek tespit edilebilir.

Abstract

Anjiyogenez, önceden var olan damarsal kan damarlarının çimlenme, doğal ve patolojik süreçler ile ilişkilidir. Çeşitli anjiyogenez testleri, kültür koşulları (1), bireysel endotel hücreleri çalışma içerir. Aort halka testi organ kültürü temel alan bir anjiyogenez modeli. Bu testte, anjiyogenik damarları aorta ((2) değiştirilmiş) bir segment büyür. Kısaca, fare torasik aort eksize edilir, yağ tabakası ve adventisya kaldırılır, halkalar yaklaşık 1 mm uzunluğunda hazırlanır. Bireysel halkaları sonra 48 plaka ayrı kuyu içine dökme bodrum matris ekstresi (BME), küçük bir katı kubbe içinde gömülürler. Anjiogenik faktörler ve anjiyogenez inhibitörleri doğrudan halkalar eklenecek ve aort halkaları ve diğer hücre türleri karışık bir ko-kültür, parakrin anjiyogenik etkileri çalışması için istihdam edilebilir. Çimlenme 6-12 günlük bir süre içinde bir stereomikroskop altında incelenmesi ile görülmektedir. 6-lamasını zorlaştırmaktadır aort kesimleri, deneme düzensizlikler neden büyük değişkenlik nedeniyle şiddetle tavsiye edilir. Neovessel akıbet faz mikroskopi kullanılarak deney ve görüntülü boyunca izlenir ve süpernatantlar ilgili anjiyogenik ve anti-anjiogenik faktörler, hücre ölümü işaretleri ve nitrit ölçümü için toplanan.

Protocol

Bir gün önce deney:

1. BME (düşük büyüme faktörü, Cultrex, Trevigen) Çözülme için izin ver buz üzerinde veya 4 ° C; bir kez yeniden katılaşmasını önlemek için buz üzerinde tutmak çözülmüş.

Deney Gün:

1. Fare (eski 6-7 hafta), anestezi ve dışarı kanadı için.
2. Torasik aort soğuk steril PBS ile dolu bir Petri kabı çıkarın.
3. Çevreleyen yağ dokusu mekanik temizlik yapın. Not, herhangi bir zamanda Aort kurutulması önlemek.
4. 1 mm halkalar şeklinde bir cerrahi bıçak kullanarak, eşit Aort dilim. Kesilmiş, düzgün ve temiz olmalıdır.
5. Taze soğuk PBS halkaları transferi ve her zaman buz üzerin....

Discussion

Aort halka testi yolda anjiyogenik yanı sıra anti-anjiogenik faktörler olarak değerlendirmek için yararlı bir araçtır. In vivo neovessels anatomik olarak benzer olduğu anlamı, endotelyal hücre tüp ile ilişkilendirmek için aort halkaları işe düz kas hücreleri ve perisitlerden dışarı büyümek gemiler. Ayrıca, fare aort halka testi bu tür için transgenik araçlar geniş bir dizi avantajı tutar. Yine de, aort halka tahlil çeşitli dezavantajları vardır. İlk olarak, in vivo damarları akıbet mikrodamarlar ve aor.......