Deneysel metastaz Testi

Summary

Bu makale, insan kanser hücre hatları metastatik potansiyelini belirlemek için kullanılan deneysel bir metastaz testinin prosedürleri açıklamaktadır.

Abstract

Metastaz, kanser hastalarının ölüm önde gelen nedenidir. Metastaz mekanizmasını anlamak için, deneysel bir metastaz tahlil bağışık yetmezliği olan farelere kullanılarak kurulmuştur. Bu makale, numune hazırlama, intravenöz enjeksiyon ve akciğer metastaz hücreleri kültür de dahil olmak üzere, bu testte yer alan usul çizmektedir. Kısaca, insan kanser hücreleri önceden belirlenmiş bir sayı hazırlanmıştır.

Protocol

1. Numune Hazırlama

1. ~% 70 büyüme faktörleri veya FBS ile kendi özel medya konfluent (örneğin, MC-1 hücreler için% 10 FBS DMEM) hücreleri büyütün. Plaka medya aspire ve 1 x PBS (8 NaCl Na ₂ HPO ₄ g / L KCl, 0.2 g / L, 1.15 g / L 0,7 H ₂ O, 0.2 g / L KH ₂ PO ile hafifçe birkaç kez yıkayın _4, pH 7.3).
2. Aspire PBS ve versene% 0.05 tripsin (0.014 g / L fenol kırmızı ve 1 x PBS, pH 7.2 0.2 g / L EDTA-Na) 2 mL ekleyin. Plaka plaka hücre ayrılması kolaylaştırmak için hafifçe sallayın. Hücrelerin mikroskop altında uyun. Genellikle hücreleri ayırmak için 2-5 dakika sürer.
3. Tripsin aktivitesi sö....

Discussion

Metastaz, kanser hastalarının ölüm önde gelen nedenidir. Birincil lokusların, dolaşıma giriş (intravasation), dolaşım (ekstravazasyonu) çıkış, ve uzak bir organ hayatta kalma ve büyüme kanser hücrelerinin ayrılması: Bu dört ana adımdan oluşur. Insan metastaz yavaş bir süreç olarak görülür ve genellikle gecikme yıl sonra tezahür eder. Zamanında ilerlemesi çalışma için, yukarıdaki nispeten hızlı deneysel assay bağışık yetmezliği olan farelere kurulmuştur ⁴ Kurulduğu günden bu yana, farklı metastatik yetenekleri.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
DMEM	İnvitrojen	10313-021
FBS	Hyclone	SH30088.03
HBSS	İnvitrojen	14175-095
NaCl	Sigma-Aldrich	S9888
KCl	Mallinckrodt Baker Inc.	6838-04
Na2 HPO4.7H2O	Mallinckrodt Baker Inc.	7896-04
KH2PO4	Mallinckrodt Baker Inc.	7100-12
Fenol kırmızı	Sigma-Aldrich	P3532
EDTA-Na	EMD Millipore	4010
Tripan Mavi	Invitrogen	15250-061
Tripsin %2.5	İnvitrojen	15090-046
Etanol	Ultrasaf	200-CSGP
50 ml Falcon Tube	VWR uluslararası	89039-656
Mikrosantrifüj Tüpleri	Axygen Scientific	MCT-175-C
Falcon 70μ m Hücre Süzgeci	BD Biosciences	352350
5ml Falcon Kültür Tüpü	VWR uluslararası	60818-576
Hemasitometre	Hausser Scientific	15170-208
1 ml şırınga	BD Biosciences	329650
30 ½ ölçer iğne	BD Biosciences	305106
Fare tutucu	Plas Labs Inc.	551-BSRR
Cerrahi makas	Fisher Scientific	08-940
Forseps	Fisher Scientific	08-902
Diseksiyon Mikroskobu	Nikon Aletleri	SMZ1500
Tezgah Üstü Santrifüj	Thermo Fisher Scientific, Inc.