Yöntem makalesi

Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

DOI:

10.3791/1989

⸱

4 Aralık 2010

 ,  ,  ,  ,  , 
1University Heart Center Hamburg, Transplant and Stem Cell Immunobiology Lab (TSI), University Hospital Hamburg, 2Stanford University School of Medicine

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu video sıçanlarda nakli vaskülopati (TVP) gelişimini incelemek için basit bir model olarak spontan aort nakli modeli göstermektedir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kronik rejeksiyon Araştırma modelleri, nakli vaskülopati (TVP) gelişimi sırasında pathobiological ve patofizyolojik süreçleri araştırmak için çok önemlidir.

, Kardiyovasküler kronik rejeksiyon çalışmalar için yaygın olarak kullanılan hayvan modelinde laboratuvar kemirgenlerde yapılan heterotopik kalp nakli modeli. Bu model, Ono ve Lindsey (3) tekniği yayınlanan deneylerde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bulguları analiz etmek için kan damarları, kalp kesitli olmalı ve tüm gemilerin ölçülecek.

Kardiyovasküler questionings kronik rejeksiyon araştırmak için başka bir yöntem aort nakli modeli (1, 2). Spontan aort nakli model, aort kolayca histolojik (2) değerlendirilir olabilir. Akut vasküler rejeksiyon benzer klinik ortamda bulmak CAV gelişimine engel değildir önemli bir karıştırıcı faktör ve Siklosporin A (CsA) tedavisi, (4 olduğundan, SHA-to-ACI modeli, CAV çalışmaları için özellikle yararlıdır. .) Akut rejeksiyon önlemek ve TVP gelişimi ile uzun süreli sağkalım elde etmek için bu modeli A7-CsA günlük süre gereklidir.

Bu model aynı zamanda xenogeneic modelleri (5) akut hücresel ret ve medya nekroz araştırmak için kullanılabilir.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Charles River (Sandhofer Weg 7, D-97.633 Sulzfeld) yaklaşık 250-300g ağırlığında Sıçanlar satın alınır.
Nakli PVG bağışçılar olarak sıçan ve alıcıları olarak ACI sıçanlarda kullanılarak yapılmaktadır.

Sıçanlar geleneksel koşulları, beslenen standart sıçan yemi ve su reklam libidum altında muhafaza edilir.

Tüm cerrahi aletler kullanmadan önce sterilize edilir.

Donör hazırlanması:

Indüksiyon odasına kullanarak izofluran ile sıçan (% 2,5-3) anestezisi.

  1. Abdominal ve torasik saç Tıraş ve sırtında sıçan ve anestezi yetişmek için burun ve ağız içinde bir facemask yere yerleştirin.
  2. Provo-İyot, bir sonraki kullanım% 80 etanol, bu adımı üç kez tekrarlayacak ve yaygın karın ve göğüs bölgesi dezenfekte edin.
  3. Arka ayakları sıçan yeterli anesthesized olduğundan emin olmak için refleksler kısma kontrol edin.
  4. Karın ve abdominal aort içine bir delik açarak sıçan asıl bulbus olfaktoryusları alındı.
  5. Toraks inen torasik aorta bulmak için dikkatlice açın.
  6. Torasik aorta, yağ, sinirler ve yemek borusu gibi çevre dokulara parçalara ayır.
  7. Aort doku hasarı olmadan, bir couter kullanarak aort 1.5cm parça çekin.
  8. Soğuk steril serum fizyolojik ile iyice aort greft serpmek ve 4 greft saklamak ° C

Alıcı:

Indüksiyon odasına kullanarak izofluran ile sıçan (% 2,5-3) anestezisi. Vücut ısısı, cerrahi işlem sırasında korunur.

  1. Karın bölgesinde Tıraş ve gözleri anestezi sırasında kurumasını önlemek için göz merhemi geçerlidir.
  2. Sırtında sıçan yerleştirin ve anestezi tutmak için burun ve ağız içinde bir facemask yerde.
  3. Provo-İyot, bir sonraki kullanım% 80 etanol, bu adımı üç kez tekrarlayın kullanarak karın bölgesi dezenfekte edin.
  4. Arka ayakları sıçan yeterli anesthesized olduğundan emin olmak için refleksler kısma kontrol edin.
  5. Karın açmak için iki adımda cilt ve kas ayıran orta hat abdominal kesi gerçekleştirin.
  6. Isıtılmış bir tuzlu nemli toz ücretsiz eldiven bağırsak yerleştirin. Bağırsakların çevresinde nem kaybını önlemek için eldiven katlayın.
  7. Yağ dokusu abdominal aorta kapsayan çıkarın.
  8. Aort damarları dallar üzerinde zarar vermemek için, dikkatli, çatallanma infrarenal bölgede formu parçalara ayır.
  9. Eğer aort gerekli Arter dalları.
  10. İlk kan akışını durdurmak için disseke aorta infrarenal bir mikrocerrahi kelepçe kullanın.
  11. Sonra, ikinci bir kelepçe aorta bifurkasyon yakın yerleştirin.
  12. Aort, kan akışı durdu Şimdi kısa bir bölümü çıkarın.
  13. Yeterli süresini kısaltmak ve bu boşluğu konumu, buz üzerinde% 0,9 steril serum fizyolojik tutulduğu donör aort greft, ele alalım.
  14. 8-0 prolen sütür (Ethicon, Norderstedt, Almanya) kullanarak çalışan sütür yerine donör alıcı aort aort bağlayın. Kraniyal uçtan-uca anastomoz ile başlayın.
  15. Distal uçtan-uca anastomoz bittiğinde, distal kelepçe dikkatli bir şekilde açın.
  16. Distal klemp açıldıktan sonra herhangi bir kanama olduğunda, kraniyal kelepçe dikkatli bir şekilde açın. Sütür kanama halinde, kelepçe yine yakın kanama bulmak ve tek bir dikiş kullanarak kanamayı durdurmak.
  17. Aort distal sonunda görünür bir darbe olmamalıdır.
  18. Sonraki bağırsaklar karın içine taşıyın.
  19. Karın prewarmed steril tuzlu su ile yıkayın.
  20. 6-0 prolen çalışan dikişler (Ethicon, Norderstedt, Almanya) ile karın duvarı kas tabakası kapatın.
  21. Cilt kapatmak için sütürlerinin 5-0 prolen (Ethicon, Norderstedt, Almanya) kullanın.
  22. Rat anestezi hala iken, subkutan Carprofen 4-5mg/kg enjekte edilir.
  23. Bu tür işlem için yeterli analjezi sağlamak için, metamizol 3 gün transplantasyon sonrası için ağrı kesici ilaçlar için içme suyu (100ml ortalama 50 mg metamizol) eklenir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Birçok nedenden dolayı biz ortotopik aort nakli modeli heterotopik kalp transplantasyonu modeli ile karşılaştırıldığında TVP gelişimini araştırmak için daha doğru bir şekilde bulundu:
Heterotopik kalp nakli modeli cerrah lar becerileri daha karmaşık ve hata eğilimli bir meydan okuma olarak kabul edilebilir ise, cerrahi teknik konusunda aort nakli modeli, yalnızca bir başarı end-to-end anastomoz gerektiren, kolay uygulanabilir bir yöntem şekillendirir iki ana damarları uç-yan anastomoz gerektiren.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Çıkar çatışması ilan etti.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar Christiane Pahrmann onu histolojik çalışma için teşekkür ederim.

Harçlar

Sonja Schrepfer Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 ve SCHR992/4-1) bir araştırma bursu aldı.]

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Cerrahi mikroskop (25x büyütme)
İzofluran
tıraş makinesi
Povidon-iyod
buz soğukluğunda 0.9% salin
önceden ısıtılmış 0.9% steril salin
göz pomadı
eldiven
mikrocerrahi makaslar
pensler
klempler
8-0 sütür (prolene)
6-0 sütür (prolene)
5-0 sütür (prolene)
Karprofen
Metamizol
pamuklu çubuklar

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Deuse, T., Hoyt, G., Koyanagi, T., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Prevention and Inhibition But Not Reversion of Chronic Allograft Vasculopathy by FK778. Transplantation. 85, 870-877 (2008).
  2. Mennander, A., Tiisala, S., Halttunen, J., Yilmaz, S., Paavonen, T., Hayry, P. Chronic rejection in rat allografts. An experimental model for transplant arteriosclerosis. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 11, 671-680 (1991).
  3. Ono, K., Lindsey, E. S. Improved technique of heart transplantation in rats. J Thorac Cardiovasc Surg. 57, 225-225 (1969).
  4. Poston, R. S., Billingham, M., Hoyt, E. G. Rapamycin reverses chronic graft vascular disease in a novel cardiac allograft model. Circulation. 100, 67-100 (1999).
  5. Schrepfer, S., Deuse, T., Koch-Nolte, F., Krieger, T., Haddad, M., Schäfer, H., Pelletier, M. P., Robbins, R. C., Reichenspurner, H. FK778 in Experimental Xenotransplantation: A Detailed Analysis of Drug Efficacy. J Heart Lung Transplant. 26, 70-77 (2007).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Transplant Vask lopatisiPVG den ACI ye GerinimAortik AnastomozHistopatolojik De erlendirmeKronik Red ModelSiklosporin A TedavisiNeointima Olu umuCerrahi Prosed r

İlgili makaleler