Beslenme Testi: Drosophila melanogaster'de Beslenme Tercihlerinin Değerlendirilmesi

Özet

Kaynak: Bovier, T. F., et al. Drosophila melanogaster'de Endokrin Bozulmasını Test Etme Yöntemleri. J. Vis. Uzm. (2019).

Bu videoda, meyve sinekleri için renkli gıdaların beslenmeyi izlemek için kullanıldığı bir besleme testi ve eklenen bileşiklerin besleme aktivitesi üzerindeki etkisi açıklanmaktadır. Örnek protokol, çeşitli endokrin bozucu kimyasalların (EDC) etkilerini test eder.

Protokol

Bu protokol, Bovier ve ark., Drosophila melanogaster'de Endokrin Bozulmasını Test Etme Yöntemleri, J. Vis. Exp. (2019).

1. Besleme Testi

NOT: Bu tahlil, ortamda seçilen EDC'nin varlığının sineklerin beslenmesini etkileyip etkilemeyeceğini test etmek için önerilir.

1. Seçilen EDC'nin farklı konsantrasyonları ve bir renklendirici gıda ile desteklenmiş Mısır unu ortamı (CM) içeren şişelere 15 genç sinek koyun. Sineklerin 1 gün boyunca ortamda beslenmesine izin verin.
   NOT: Örneğin, 40 numaralı kırmızı boya (1 mg/mL) kullanın.
2. 15 genç sineği tek başına çözücü ile takviye edilmiş CM ve kontrol için bir renklendirici gıda içeren şişelere koyun. Sineklerin 1 gün boyunca medyada beslenmesine izin verin.
3. Her sinek grubunu ayrı ayrı eter ile uyuşturun.
   1. Her grubun sineklerini, açık uca bir huni yerleştirilmiş silindirik bir cam kaba (eterizör) aktarın, şişeyi huni üzerinde ters çevirin ve sineklerin eterizöre düşmesini sağlamak için iki kabı hafifçe birbirine vurun.
      NOT: Huni, eterleştiriciden çıkmalarını önleyecektir.
   2. Etherizer'ı fare altlığı gibi yumuşak bir yüzeye hafifçe vurarak sinekleri yıkın ve huniyi hızlı bir şekilde eterle ıslatılmış bir pamuk ve gazlı bezle değiştirin.
   3. Sinekler dibe düşene ve hareket etmeyi bırakana kadar yaklaşık 1 dakika bekleyin.
      NOT: Süreyi aşmayın yoksa sinekler ölür.
4. Hareketsiz hale getirilmiş sinekleri stereo mikroskop altına koyun ve her tedavi grubunun abdominal rengini kontrol grubuna göre karşılaştırın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
17α-Etinilenstradiol	Sigma	E4876-1G
Drosophila medium için Agar	BIOSIGMA (BIOSIGMA)	789148
Bisfenol A	Sigma	239658-50G
Bisfenol AF	Sigma	90477-100MG
Mısır unu	CA' BIANCA
Dietil eter	Sigma
Drosophila Şişeleri	BIOSIGMA (BIOSIGMA)	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila Şişeleri	BIOSIGMA (BIOSIGMA)	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila Şişeleri	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
etanol	FLUKA (FLUKA)	2860
Eterleştirici	El sanat -ları		Pamuk tapalı silindirik cam kap
El blenderi Pimmy	Ariete Belediyesi		Mutfak Robotu
Anında Başarı mayası	ESKA (ESKA)		Toz maya
Kırmızı boya no. 40	Sigma	16035
LED ışıklı stereomikroskop	Leica Belediyesi		S4E Serisi

adet