Drosophila melanogaster (meyve sineği)

Büyük boyutları ve nispeten basit organizasyonları nedeniyle, Drosophila hemşire hücreleri canlı hücre görüntüleme çalışmaları için idealdir. Bu video, hücrelere eksojen bileşiklerin verilmesi için bir mikroenjeksiyon yöntemini açıklar ve öne çıkan protokol, endojen mRNA transkriptlerini görselleştirmek için kullanılan moleküler işaretler (MB'ler) adı verilen floresan oligonükleotid probları ile prosedürü gösterir.

Drosophila embriyosu koruyucu dış zarlarla çevrilidir. Embriyoya erişmek için, zarların en dışında bulunan koryon sıklıkla çıkarılır. Bu video, sodyum hipoklorit kullanılarak yaygın olarak kullanılan bir dekoryonasyon yöntemini açıklamaktadır. Örnek protokol, aksenik veya gnotobiyotik hayvan yetiştiriciliği için gerekli steril teknikler kullanılırken prosedürü göstermektedir.

Drosophila geç evre oositlerinin immün boyanması, oositlerin çevresindeki zarlar nedeniyle zor olabilir. Bu videoda, oositlerin elde edilmesi, bunların sabitlenmesi ve immün boyama için zarların çıkarılması için yüksek verimli bir yöntem açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, mayoz bölünmenin farklı aşamalarını görselleştirmek için kullanılan geç evre oositlerle bu teknikleri göstermektedir.

Bu videoda, daha önce sabitlenmiş olgun Drosophila oositlerinden koryon ve vitellin zarlarını mekanik olarak çıkarmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, floresan in situ hibridizasyon deneyleri ile uyumlu oositler veren prosedürün ayrıntılı bir gösterimini göstermektedir.

Bu videoda, canlı Drosophila embriyolarına reaktifler veren mikroenjeksiyonların nasıl gerçekleştirileceği açıklanmaktadır. Araştırmacılar bu yöntemi, embriyo gelişiminin erken aşamalarında nükleik asitler ve proteinler gibi eksojen bileşikleri tanıtmak için kullanabilirler. Öne çıkan protokol, herhangi bir çözünür reaktifin enjeksiyonu için prosedürün nasıl kurulacağını ve gerçekleştirileceğini gösterir - burada, canlı görüntüleme deneyleri için bir floresan protein.

Source:Siddarth Gunnala1, Nafisa M. Jadavji2,3,41Department of Biomedical Sciences, Midwestern University, Glendale, AZ, USA2Division of Integrative and Molecular Physiology, Department of Biomedical Sciences, Southern University of Illinois, Carbondale, IL, USA3Department of Child Health, College of Medicine Phoenix, University of Arizona, Phoenix, AZ, USA4Department of Neuroscience, Carleton University, Ottawa, ON, CanadaThis video demonstrates hypoxia-induced climbing behavior in Drosophila...

Bu video, Drosophila larvalarında oyuk açma ve tünel açma yeteneklerini değerlendirerek hipoksiyi test etmek için bir yöntem göstermektedir. Araştırmacılar bu tekniği kullanarak oksijen yoksunluğu yaşayan larvaları gelişimsel eksikliği olanlardan ayırt edebilirler. Örnek protokol, bu testin kurulumunu gösterir.

Drosophila hayali diskleri boyanırken, genellikle disklerin açıkta kaldığı ancak vücuda bağlı kaldığı kaba bir diseksiyon yapılır. Lekelendikten sonra, ilgilenilen diskler izole edilir ve monte edilir. Örnek protokol, kanat hayali disk diseksiyonu ve montajı için bir prosedürü göstermektedir.

Drosophila nöromüsküler kavşağı (NMJ), sinapsların morfolojisini ve işlevini incelemek için bir model olarak kullanılır. Bu video, araştırmacıların NMJ'yi karakterize etmek için ölçtüğü önemli özellikleri açıklamaktadır. Örnek protokol, nicelemeyi otomatik olarak gerçekleştirebilen bir yazılımı gösterir.

Bu videoda, bir Drosophila melanogaster larvasındaki aksonların iki fotonlu lazer ablasyonu ve yaralanmayı indüklemek ve yaralanma bölgesini görüntülemek için örnek bir protokol açıklanmaktadır.

Bu videoda, duyusal dendritik arborizasyon (da) nöronlarını ve bunlarla ilişkili epidermal hücreleri görselleştirmek için kullanılan larva filetolarının nasıl hazırlanacağı açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, hücrelerin morfolojisini korurken kas dokusunun vücut duvarından nasıl çıkarılacağını ayrıntılı olarak gösterir, bu da aksi takdirde gizlenmiş da nöronlarının ve epidermal hücrelerin immün boyamayı ve görselleştirilmesini geliştirir.

Drosophila hemolenf, larva ve yetişkin aşamalarında vücutta dolaşan hem kan hem de interstisyel sıvı görevi görür. Bu video, dolaşımdaki hücreleri ölçmek için larva hemolenfini toplamak için bir protokolü açıklamaktadır.

>Drosophila larvaları ışığa duyarlıdır ve çevredeki ışıktaki değişikliklere tepki verir. Bu videoda, ışık noktası tahlili adı verilen, ışıktan kaçınma yeteneklerini test eden bir tahlil açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, mavi ışıklı bir LED ile testin nasıl kurulacağını ve ışıkla karşılaşmaya yanıt olarak hayvanın davranışının nasıl kaydedileceğini gösterir.

Bu video, ekdisteroidlerin ve diğer hormonların biyosentezi ve salgılanması için önemli olan karmaşık bir endokrin yapı olan Drosophila halka bezini tanımlar. Özellikli protokol diseksiyonunu, fiksasyonunu ve immün boyamayı gösterir.

>Drosophila larvaları, potansiyel olarak zararlı termal uyaranlara tepkileri hayvanda caydırıcı veya "nosifensif" olarak adlandırılan davranışları tetikleyen özel duyusal nöronlara (nosiseptörler) sahiptir. Bu video, bir ısı probunun kütikül üzerine lokal olarak uygulanmasına yanıt olarak larva davranışını kaydederek termal nosisepsiyonunu değerlendirmek için bir yöntemi açıklar. Bu nedenle bu yönteme yerel ısı probu tahlili denir.

>Drosophila meyve sinekleri, sıcaklıktaki küçük değişiklikleri ayırt edebilir ve bu nedenle uygun termal koşullara sahip ortamları seçebilir. Bu video, Drosophila larvalarının sıcaklık tercihini doğrusal bir termal gradyan üzerinde test eden davranışsal bir testi açıklamaktadır.

Bu video, sinek larvasındaki hematopoezin birincil bölgesi olan Drosophila lenf bezini tanımlar ve immünohistokimya ve floresan görüntüleme için organı incelemek ve monte etmek için örnek bir protokol gösterir.

Bu makale, bir böceğin pupariumunu çıkarırken, iç pupayı sağlam tutarken ve bu nedenle daha fazla araştırma için uygun hale getirme tekniğini açıklar. Örnek protokol, Drosophila guttifera ile prosedürü gösterir; ancak bu teknik diğer Drosophila türleri için de geçerlidir.

Bu videoda, göz-beyin kompleksinin Drosophila pupae'den nasıl disekatlanacağı ve izole edileceği anlatılmaktadır. Öne çıkan protokol, örneğin immün boyama ve diğer gen ekspresyonu deneyleri ile uyumlu, yüksek kaliteli doku veren prosedürü göstermektedir.

Drosophila uçuş kasları, kas gelişimi ve fizyolojisi için model bir sistem olarak kullanılır. Bu video, yetişkinlerin uçuş kaslarını açıklar ve pupalardan RNA dizilimi için uygun olan dolaylı uçuş kaslarının geliştirilmesini incelemek için bir protokolü vurgular.

Bu videoda, Drosophila'da öğrenme ve hafızayı test eden ve kur yapma koşullandırması adı verilen klasik bir koşullandırma testi açıklanmaktadır. Tahlil, alıcı olmayan prematize edilmiş bir kadın tarafından reddedildikten sonra erkek flörtünün azaltılmasına dayanır. Örnek protokol, kısa ve uzun süreli belleği değerlendirmek için kullanılabilecek yordam için bir kurulum gösterir.

Bu video, sinek hareketini ölçmek için basit bir yöntemi açıklar ve gerçekleştirilen tırmanma testini gösterir. Sinek tırmanma testi, negatif bir jeotaksi tepkisine dayanan genel bir motor fonksiyon testidir.

Bu video, aksesuar bezlerin erkek sineklerden diseksiyonunu açıklar ve izole bezin tek hücreli bir süspansiyona ayrılacağı bir örneği gösterir.

Bu video, Drosophila yumurtalığının genel anatomisini açıklar ve canlı veya sabit görüntüleme için yumurtalıkları diseksiyon yöntemini içerir.

Bu makale, bir dişi Drosophila sineğinden anterior Malpighian tübüllerinin (MT) diseksiyonunu ve Rossano ve ark.'dan örnek bir protokolü açıklamaktadır. (2017) MT'lerin bir perfüzyon odasında canlı görüntüleme için hazırlandığı.

Bu video, Drosophila hareketini incelemek için kullanılan davranışsal bir yöntem olan ada tahlilini açıklamaktadır. Örnek protokol, yarı otomatik görüntü analizi ile uyumlu test için bir kurulum içerir.

Bilim adamları, farklı deneysel koşulların sineklerin ömrünü nasıl etkilediğini ölçmek ve deneysel sonuçları ölçmek için süreçte hayatta kalma eğrileri oluşturmak için Drosophila yaşam süresi protokolünü kullanır. Numune protokolü, değişen konsantrasyonlarda endokrin bozucu kimyasallara veya 17-α-etinilestradiol (EE2) gibi EDC'lere maruz kalmanın uzun ömür üzerindeki etkilerini incelemek için uygulanan testi içerir.

Bu videoda, meyve sinekleri için renkli gıdaların beslenmeyi izlemek için kullanıldığı bir besleme testi ve eklenen bileşiklerin besleme aktivitesi üzerindeki etkisi açıklanmaktadır. Örnek protokol, çeşitli endokrin bozucu kimyasalların (EDC) etkilerini test eder.

Bu video, yetişkin sineklerden alınan sağlam beyinleri bir köprü lamı altına monte etme yöntemini açıklar ve floresan mikroskobu için bağışıklığı lekelenmiş beyinler üzerinde gerçekleştirilen protokolü gösterir.

Bu videoda, genomu CRISPR-Cas9 kullanılarak modifiye edilen transgenik Drosophila sineklerini tanımlamak için bir tarama yöntemi açıklanmaktadır. CRISPR-Cas9, bilim insanlarının bir organizmanın genomunu manipüle etme biçiminde devrim yaratan güçlü bir genom düzenleme aracıdır. Örnek protokolde, bir transaktivasyon dizisinin eklenmesinin dalsız (bnl) genin ilk eksonunun yerini aldığı ve böylece bnl genine özgü bir sürücü hattı olan bnl-LexA'nın oluşturulduğu CRISPR tarafından üretilen...

Taramalı elektron mikroskobu (SEM), biyolojik bir numunenin yüzey özelliklerini görüntülemek için güçlü bir araçtır. Bununla birlikte, uygun numune hazırlama, kaliteli görüntüler elde etmek için kritik öneme sahiptir. Bu video, bozulmamış yetişkin Drosophila'yı SEM için hazırlamanın dehidrasyon ve kurutma adımlarına odaklanmaktadır.

Bu videoda, sinek kafalarını seri kesitlere hazırlayan bir teknik olan yaka yöntemi kullanılarak Drosophila kafalarının parafine nasıl gömüleceği açıklanmaktadır. Parafin bölümleri, beyin anatomisinin histolojik incelemeleri ve nörodejenerasyonun değerlendirilmesi için kullanılır. Öne çıkan protokol, tek bir preparatta birden fazla sineğin nasıl işlenebileceğini, böylece zaman verimliliğini artırdığını ve deneysel artefaktları en aza indirdiğini göstermektedir.

Bu video, canlı yetişkin sineklerin enjeksiyonunun nasıl gerçekleştirileceğini açıklar ve fagositozu test etmek için etiketli parçacıkların ve tripan mavisinin sinek karınlarına enjekte edildiği örnek bir protokol içerir.

Bu video, tercih edilen maddenin yutulmasından sonra sineğin karın rengini değerlendirerek farklı tada sahip renkli solüsyonlara karşı çekiciliği veya kaçınmayı ölçmek için kullanılan davranışsal bir yöntem olan tat tercihi testini açıklar. Öne çıkan protokol, sineklerin değişen sakaroz konsantrasyonlarına sahip çözeltilere yönelik tercihini ölçmek için kullanılan prosedürü göstermektedir.

Bu videoda, sınırsız meyve sineklerinin gıda alımını ve tercihini ölçen davranışsal bir yöntem olan CApillary FEeder veya CAFE testi açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, gıdayı vermek ve alımını izlemek için kullanılan sıvı dolu kılcal damarlardan minimum buharlaşma ile testin nasıl gerçekleştirileceğini gösterir.

Bu video, yetişkin Drosophila beyninin nasıl inceleneceğini ve izole edileceğini açıklar – aksi takdirde kütikül, göz ve trakeal doku tarafından gizlenen organı görselleştirmek için gerekli bir prosedür. Örnek protokol, Drosophila nörobiyolojisinde immün boyama ve görüntüleme yöntemleri için kullanılabilecek yüksek kaliteli preparatları veren ayrıntılı bir gösterimi göstermektedir.

>Drosophila mikrobiyotası hayvanın gelişimini, bağışıklığını ve fizyolojisini etkiler. Bu video, tüm vücut preparatlarından koloni oluşturan birimleri belirleyerek sineklerden bakteri miktarını belirlemek için bir yöntemi açıklamaktadır. Öne çıkan protokol, dört bakteri türü kullanılarak gnotobiyotik koşullar altında yetiştirilen sineklerle yapılan tekniği göstermektedir.

Bu videoda, Drosophila yetişkin bacağını, görüntüleme analizi için nörokas sistemini sağlam tutarken diseksiyon, düzeltme ve monte etme yöntemi açıklanmaktadır.

Bu videoda, genel hareket kabiliyetlerini değerlendirmek için serbestçe yürüyen sineklerin nasıl izleneceği açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, video izleme yazılımı kullanarak tahlilin kurulumunu ve veri analizini gösterir.

Bu videoda, böcekleri anestezi olmadan muhafazalar arasında aktarmak için kullanılabilecek bir sinek aspiratörü oluşturma yöntemi açıklanmaktadır. Örnek protokoldeki aspiratör, bireysel bakım davranışlarını ölçmek için bir deney için...

Bu videoda, GCaMP kullanılarak Drosophila nöronlarında in vivo kalsiyum görüntüleme açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol klibi, bir koku alma koşullandırma deneyi sırasında mantar vücut nöronlarından GCaMP floresansındaki değişikliklerin nasıl kaydedileceğini gösterir.

Meyve sinekleri karmaşık bir koku alma sistemine sahiptir, yüzlerce koku maddesini ayırt edebilir ve davranışsal kararları yönlendirmek için koku alma duyularını kullanabilirler. Bu video, sineklerde koku alma davranışsal tepkilerini incelemek için bir yöntem olan dört olfaktometre testini açıklamaktadır. Öne çıkan protokol klibi, test sineklerinin nasıl ele alınacağını ve testi gerçekleştirirken kritik adımların neler olduğunu gösterir.

Saldırganlık doğuştan gelen bir davranıştır ve önceki dövüş deneyimi, sineklerde dövüş stratejisini ve sonraki yarışmaların sonucunu etkiler. Bu video, Drosophila'nın agresif davranışını incelemek için kullanılan bir testi açıklamaktadır. Örnek protokol, sinek işlemeyi ortadan kaldıran ve bu nedenle hayvanlar için stresi azaltan, aksi takdirde deneklerin performansını etkileyecek olan bir kurulumda gerçekleştirilen tahlili içerir.

Bu videoda, meyve sineğinde koku alma keşif davranışını test etmek için Y-labirenti adı verilen bir yöntem açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol klibi, testin nasıl kurulacağını ve yürütüleceğini gösterir.

Bu videoda, lokomotor aktiviteyi izlemek için kullanılan Drosophila aktivite monitörü (DAM) sistemi açıklanmaktadır. Araştırmacılar, meyve sineklerinde sirkadiyen ritimleri incelemek için DAM'dan toplanan aktivite verilerini kullanıyorlar. Öne çıkan protokol klibi, cihaza sineklerin nasıl yükleneceğini ve sirkadiyen deneyler için etkinlik verilerinin nasıl kaydedileceğini gösterir.

Optogenetik, ışık aktivasyonu nöronun durumunda bir değişikliği tetikleyen ışığa duyarlı proteinler olan belirli opsinleri ifade etmek için genetik olarak tasarlanmış nöronları manipüle etmek için ışığın kullanılmasını sağlar. Burada, opsin Channelrhodopsin2 kullanarak Drosophila'da optogenetik bir yaklaşımı açıklıyoruz. Örnek protokol, sineğin kaçış davranışının arkasındaki nöronal devreyi incelemek için bir optogenetik test setine sahiptir.

Bu videoda, bağırsak kök hücrelerini izole etmek için yetişkin Drosophila bağırsağının diseksiyonunu ve tek hücreli ayrışma ve FACS'ye uygun orta bağırsakların toplanmasını vurguluyoruz.

Bu video, sineğin yetişkin kalbini veya başka bir şekilde Drosophila sırt damarı olarak adlandırılıyor. Özellikli protokol, canlı kalp hazırlıkları için bir diseksiyon prosedürünü göstermektedir.

Drosophila dişileri, alt tabakalar arasında seçim yapar ve yumurtlama için çekici olan bölgeleri seçer. Bu video, yumurtlama tercihi testi olarak adlandırılan, karar verme süreçlerini test eden davranışsal bir testi açıklamaktadır. Öne çıkan klip, araştırmacıların yalnızca aynı anda birçok dişinin davranışını test etmelerini sağlamakla kalmayıp aynı zamanda video kaydı ve optogenetik kurulumlarla da uyumlu olan özel olarak oluşturulmuş bir kurulumla prosedürü göstermektedir.