Larva Fileto Hazırlama: Sağlam Duyusal Nöronları ve İlişkili Epidermal Hücreleri Görselleştirmek İçin Bir Yöntem

Bu makalede

Özet

Kaynak: Tenenbaum, C. M., Gavis, E. R. Duyusal Nöronların ve Epidermal Hücrelerin İmmünofloresan Analizi için Larva Filetolarından Drosophila Kas Dokusunun Çıkarılması. J. Vis. Uzm. (2016).

Bu videoda, duyusal dendritik arborizasyon (da) nöronlarını ve bunlarla ilişkili epidermal hücreleri görselleştirmek için kullanılan larva filetolarının nasıl hazırlanacağı açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, hücrelerin morfolojisini korurken kas dokusunun vücut duvarından nasıl çıkarılacağını ayrıntılı olarak gösterir, bu da aksi takdirde gizlenmiş da nöronlarının ve epidermal hücrelerin immün boyamayı ve görselleştirilmesini geliştirir.

Protokol

Bu protokol, Tenenbaum ve Gavis, Duyusal Nöronların ve Epidermal Hücrelerin İmmünofloresan Analizi için Larva Filetolarından Drosophila Kas Dokusunun Çıkarılması, J. Vis. Exp.(2016).

NOT: Kas çıkarma prosedürü (Şekil 1), larva filetolarının hazırlanması için daha önce açıklanan yöntemlerin bir modifikasyonudur. Kasın çıkarılmasından önceki ve sonraki adımlar kısaca özetlenmiştir ve okuyucu, Brent, et al., J. Vis. Exp. (2009) ve Karim ve Moore, J. Vis. Exp. (2011) daha ayrıntılı açıklamalar için.

1. Larvaları soğuk tuzlu ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1: Kas çıkarma prosedürüne genel bakış. Bir larva disseke edilir ve bir silikon elastomer diseksiyon kabına tutturulur. Kas dokusunu çıkarmak için, kas ve epidermal hücre tabakası arasına, dorsal orta hattan başlayarak bir segment sınırının yakınında bir forseps ucu yerleştirilir (2.2). Forseps, kas ile vücut duvarı arasındaki bağlantıyı kırmak için yukarı doğru çekilir (2.3). Bu, ilgilenilen segmentler için tekrarl.......