Serbestçe Yürüyen Sineklerin İzini Sürmek: Drosophila'da Hareketi Değerlendirmek İçin Bir Yöntem

Özet

Kaynak: Sun, M. ve Chen, L. L. Drosophila'da Kronik Travmatik Ensefalopatiyi Modellemek İçin Yeni Bir Yöntem. J. Vis. Uzm. (2017).

Bu videoda, genel hareket kabiliyetlerini değerlendirmek için serbestçe yürüyen sineklerin nasıl izleneceği açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, video izleme yazılımı kullanarak tahlilin kurulumunu ve veri analizini gösterir.

Protokol

Bu protokol, Sun ve Chen, Drosophila'da Kronik Travmatik Ensefalopatiyi Modellemek İçin Yeni Bir Yöntem, J. Vis. Exp. (2017).

1. Video Destekli Hareket Takibi

1. İzleme alanını yapmak için 6 cm çapında bir Petri kabını şeffaf silikon elastomer ile doldurun. Sineklerin serbestçe yürümesine izin vermek ancak uçmamasını sağlamak için silikon ile bulaşık kapağı arasında 3 mm'lik bir boşluk bırakın.
2. Her seferinde sahte veya tedavi edilen gruptan dört sineği uyuşturun ve arenaya yerleştirin. Sinekleri 22 °C'de 1 saat bekletin.
3. Arenaların üzerine bir Şarj Bağlantılı Cihaz (CCD) kamerası yerleştirin ve 5 dakika boyunca kayıt yapın.
4. Ctrax yazılımını (Caltech'ten ücretsiz olarak edinilebilir) kullanarak kaydedilen hareket yörüngelerini analiz edin. İzlenen verileri programlama dili (örneğin, Matlab) uyumlu bir formatta dışa aktarın ve verileri çerçeve başına kat edilen mesafeye göre analiz edin. Her sinek için ortalama yürüme mesafesini hesaplayın ve aynı gruptaki dosya popülasyonu tarafından kat edilen ortalama kümülatif mesafeyi elde etmek için kaydedilen diğer tüm sinekler/gruplarla birleştirin.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
60 mm Petri Kapları	Balıkçı Bilimsel	FB0875713A	İzleme arenaları olarak kullanılır
Akış Regülatörü	Genesee Bilimsel	59-122WC
İnce Fırça	Genesee Bilimsel	59-204
Flypad (Uçma Paneli)	Genesee Bilimsel	59-114
Sylgard Silikon Elastomer	Dow Corning	4019862
CCD Kamera	Microsoft Bilişim Sistemleri	HD-5000
Ctrax Yürüyüş Sinek İzleyici	Caltech	Ctrax 0.2.11
MATLAB Görüntü İşleme Araç Kutusu	MATLAB (MATEMAT)	R2015b

Serisi