Sıcaklık Gradyanı Deneyi: Drosophila Larvalarında Sıcaklık Tercihini Test Etmek İçin Bir Yöntem

Abstract

Kaynak: Liu, J., et al. Drosophila Larvalarının Termal Tercihlerini Belirlemek İçin Bir Sıcaklık Gradyanı Deneyi. J. Vis. Uzm. (2018).

>Drosophila meyve sinekleri, sıcaklıktaki küçük değişiklikleri ayırt edebilir ve bu nedenle uygun termal koşullara sahip ortamları seçebilir. Bu video, Drosophila larvalarının sıcaklık tercihini doğrusal bir termal gradyan üzerinde test eden davranışsal bir testi açıklamaktadır.

Protocol

Bu protokol Liu ve ark.'dan bir alıntıdır. Drosophila Larvalarının Termal Tercihlerini Belirlemek İçin Bir Sıcaklık Gradyanı Deneyi, J. Vis. Exp. (2018).

1. Sıcaklık Gradyanı Kurulumu

1. Tek yönlü gradyan hazırlama
   1. Tahliller sırasında nemli bir ortam yaratmak için, iki su banyosuna bağlı iki alüminyum bloğu 10 cm arayla ıslak kağıt havluların üzerine yerleştirin (Şekil 1A).
   2. Alüminyum blokların sıcaklığının dengelenmesi için yeterli zaman tanımak için tahlili başlatmadan ~ 2 saat önce iki su banyosunu açın.
      NO....

Results

Şekil 1: Tek ve çift yönlü gradyan tahlil kurulumları. (A) İki alüminyum blok üzerinde iki alüminyum tahlil plakası ile tek yönlü gradyan kurulumu. Alüminyum blokların sıcaklıkları, iki su banyosundan su sirkülasyonu ile kontrol edilir. (B) Çift yönlü bir gradyan için üç alüminyum bloğun, su banyolarının ve bir alüminyum plakanın (250 x 220 mm) düzenlenmesi. Sol ve sağ bloklar aynı su ban.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Gradyan tahlil aparatı
PolyScience 9106, Soğutmalı/Isıtmalı 6L Sirkülasyon Banyosu	Thomas Bilimsel	9106	Bu modelin üretimi durduruldu. Güncellenen yedek modeller şunları içerir: 120 V, 60 Hz veya 1184L08 için 1186R00 ve 1197U04 ve 240 V, 50 Hz için 1197U04.
Alüminyum tahlil plakası (tek yönlü gradyan için)			Dış boyut: 14 x 10.1 x 0.9 cm, iç boyut: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, siyah eloksallı.
Alüminyum levha (çift yönlü gradyan için)			25 x 22 x 0,2 cm, siyah eloksallı.
Alüminyum blok			Dış boyut: 25,5 x 5 x 1,4 cm, iç kanalların parametreleri Şekil 1D'de gösterilmiştir.
Alüminyum bloklar ve borular için konektör	McMaster-Carr	91355K82
Tygon Sıhhi Silikon Boru	Tygon Gölü	57296	1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" duvar
ad	şirket	Katalog Numarası	Yorum
Test için öğeler ve reaktifler
Havaneli	ABD Bilimsel	17361	1,5 mL mikrosantrifüj tüpleri için havaneli
termometre	Tesadüftü	51II
Termokupl	Tesadüftü	K türü
Üniversal mikroplaka kapağı	Corning	6980A77
35 mm çanak	Corning	9380D40
Etiketleme bandı (çift yönlü gradyan için)	Balıkçı Bilimsel	15-951	Fisherbrand etiketleme bandı 2 inç x 14 yds
agaroz	Canlandırıcı	16500500	% 1 çözelti hazırlayın
Sakaroz	Sigma	S0389-5KG	Tahlillere başlamadan hemen önce %18'lik çözelti hazırlayın
Boya fırçası	Balıkçı Bilimsel	11860
50 mL santrifüj tüpleri	Denville	C1062-P
Kepçe	Balıkçı Bilimsel	14-357Ç
500 mL yuvarlak geniş ağızlı şişe	Borcam	1395-500
Hücre süzgeci (300 mm gözenek)	Çoğul Seçimi	43-50300	Larva yıkama için isteğe bağlı ürün
Karton kutu (flakon tepsisi)	Genesee Bilimsel	FS32-124