Method Article

C. elegans Blastomer Diseksiyonu: Yumurta Kabuğunu Çıkarmak ve Embriyonik Hücreleri Ayırmak İçin Bir Yöntem

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Hsu, C. R., et al. İzole Caenorhabditis elegans Embriyo Blastomerleri ve Yapışkan Polistiren Boncuklar ile Uzamsal Hücre Temas Modellerinin İn Vitro Sulandırılması.J. Vis. Uzm.(2019).

Bu video, erken embriyolardan C. elegans blastomerlerini izole etmek için bir yöntem sunar. Elde edilen hücreler, hücre kültürü veya ex vivo deneyler için uygundur.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, Hsu ve ark., İzole Caenorhabditis elegans Embriyo Blastomerleri ve Yapışkan Polistiren Boncuklar ile Uzamsal Hücre Temas Modellerinin İn Vitro Sulandırılması, J. Vis. Exp.(2019).

  1. Embriyo blastomer izolasyonu
  2. Ağartma solüsyonunun kesilmesini ve temasını önlemek için eldiven ve laboratuvar önlüğü giyin.
    1. Bir mikrokılcal damarın her iki ucunu (kapasite; 10 μL) sağ ve sol elinizle tutun.
    2. Gerilim uygulamak için mikrokılcal damarı ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Aspiratör Borusu KomplesiDrummond21-180-13Blastomer izolasyonu için.
Caenorhabditis elegans suşu: N2, vahşi tipCaenorhabditis Genetik MerkeziN2Bu çalışmada kullanılan suş
Caenorhabditis elegans suşu: KSG5, genotip: zuIs45; itIs37EvdeKSG5Bu çalışmada kullanılan suş
Kalibre Edilmiş Mirkopipetler, 10 μLDrummond21-180-13Blastomer izolasyonu için
CD Lipid KonsantresiYaşam Teknolojileri11905031Blastomer izolasyonu için. Doku kültürü davlumbazında çalışın.
CloroxClorox GölüN. A.Blastomer izolasyonu için. Hipoklorit tedavisi iyi çalışmadığında yeni bir şişe açın.
Lamel tutucuEvdeN.A.Blastomer izolasyonu için.
Diseksiyon mikroskobu: M standlı Zeiss Stemi 508. Işık kaynağı dahili LED'dir. Göz merceğinin büyütme oranı 10X'tir.Carl ZeissStemi 508Blastomer izolasyonu için.
Fetal Sığır Serumu, Nitelikli Tek Atış, Kanada menşeiliGibco (Gibco)A3160701Blastomer izolasyonu için. Doku kültürü davlumbazında çalışın.
Genel Kullanım ve Hassas Kayma Hipodermik İğneler, 25 gaugeBd14-826AABlastomer izolasyonu için
İnülinAlfa AesarAAA1842509Blastomer izolasyonu için
MEM Vitamin Çözeltisi (100x)Gibco (Gibco)11120052Blastomer izolasyonu için.
Multitest Slayt 10 KuyusuMP BiyomedikalICN6041805Blastomer izolasyonu için
Penisilin-Streptomisin (10.000 U/mL)Gibco (Gibco)15140148Blastomer izolasyonu için.
PolivinilpirolidonFisher BiyoReaktifleriBP431-100Blastomer izolasyonu için
Potasyum KlorürBiyodükkanPOC888Blastomer izolasyonu için
Schneider'in Drosophila Steril OrtamıGibco (Gibco)21720024Blastomer izolasyonu için. Doku kültürü davlumbazında çalışın.
Sodyum KlorürBiyodükkanSOD001Blastomer izolasyonu için
sodyum hidroksit çözeltisi, 10 NFisher KimyaSS255-1Blastomer izolasyonu için
Şırınga Filtreleri, PTFE, Steril OlmayanBasix13100115Blastomer izolasyonu için.
Tygon S3 Laboratuvar Hortumu, Formülasyon E-3603, İç çap 3.175 mmSaint Gobain Performans Plastikleri89403-862Blastomer izolasyonu için.
Tygon S3 Laboratuvar Hortumu, Formülasyon E-3603, İç çap 6,35 mmSaint Gobain Performans Plastikleri89403-854Blastomer izolasyonu için.
Serisi · Serisi Serisi Serisi Serisi Belediyesi

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

C elegans BlastomeresEggshell RemovalMicropipette DissectionEmbryo DissociationHypochlorite SolutionShelton s Growth MediumHand Pulled CapillariesTwo Cell StageCell Isolation TechniqueEmbryonic Cell Culture

Related Articles