Dokunma Alışkanlığı Testi: C. elegans'ta İlişkisel Olmayan Öğrenmeyi İncelemek İçin Bir Yöntem

Özet

Kaynak: Mersha, MD ve diğerleri. Düşük Doz Toksik Maddelere Embriyonik Maruz Kalmanın Uzun Vadeli Davranışsal ve Üreme Sonuçları. J. Vis. Uzm. (2018).

Bu video, C. elegans'ın mekanosasyonu değerlendirmek ve alışmaya kadar geçen süreyi ölçmek için davranışsal bir yöntemi olan dokunma alışkanlığı testini tanıtmaktadır.

Protokol

Aşağıdaki protokol Mersha et al.'den bir alıntıdır. Düşük Doz Toksik Maddelere Embriyonik Maruziyetin Uzun Vadeli Davranışsal ve Üreme Sonuçları, J. Vis. Exp. (2018)

1. Ön Dokunma Alışkanlığı Testi
   1. Yaklaşık 10 senkronize genç yetişkin solucanı, ateşte sterilize edilmiş 30 G platin tel kıracağı kullanarak yeni tohumlanmamış NGM plakalarına aktarın. Yeni tabağa alışmaları için zaman tanımak için solucanları 5 dakika boyunca rahatsız edilmeden bırakın.
   2. Alışkanlık tepkisi için, tahta bir şiş veya kürdanın ucuna bağlı bir kaş kılı kullanın ve% 70 etanole batırarak sterilize edin. Temiz, tüy bırakmayan bir mendille silin ve etanolün buharlaşması için 1 dakika bekleyin. Kaş kıllarını kullanarak kafadaki solucana (faringeal ampulün önü) hafifçe dokunun. Solucanın iyileşmesine izin vermek için dokunuşlar arasında 10 saniye izin vererek dokunuşları tekrarlayın.
   3. Solucan artık geriye doğru hareket etmeyene kadar dokunmaya devam edin (10 s ara uyaran aralıklarına izin vererek). Bu noktada, solucan uyarana alışmıştır. Solucanın alışması için gereken dokunuş sayısını + ber'i kaydedin.
   4. Tedavi edilen ve edilmeyen kontrollerin ortalama alışkanlık oranları arasındaki farkı, tek yönlü ANOVA ve ardından Tukey'in post hoc testi kullanarak analiz edin.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
EtOH	Sigma-Aldrich	64-17-5
N2 (Yabani tip C. elegans) solucanları	CGC (Cesaret Gösteri		U of Minnesota'daki Depo
Platinum tel çekme	Genesee Bilimsel	59-AWP
Petri plakaları	balıkçı	07-202-011
Diseksiyon Mikroskobu	AmScope (AmScope)	SM-2TYY