Yöntem makalesi

Larva Hareket Deneyi: Zebra Balığı Larvalarında Bir Bileşiğin Nörodavranışsal Toksisitesini İncelemek İçin Yüksek Verimli Yöntem

30 Nisan 2023

Bu makalede

Özet

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Zhang B., et al. Çevresel Kirleticilerin Zebra Balığı Larvaları Üzerindeki Nörodavranışsal Etkilerinin İncelenmesi. J. Vis. Uzm. (2020)

Bu makale, zebra balıklarının larva hareketini izleyerek toksik bileşiklere karşı davranışsal tepkisini açıklamaktadır. Protokol ayrıca zebra balığı larvalarının çevresel kirleticiye verdiği tepkinin bir örneğine de bakıyor.

Protokol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Davranış testi için hazırlık

  1. 800 μL maruz kalma solüsyonunu 48 kuyulu mikroplakanın her kuyucuğuna aktarın.
    not: Her grup için 16 kuyucuk kullanın (yani kontrol solüsyonu, 5 μg/L ve 50 μg/L grubu).
  2. 1 mL'lik bir pipet ucu kullanarak 200 μL'lik maruz kalma solüsyonunu cam Petri kabından 48 oyuklu mikroplakanın bir kuyucuğuna aktarın.
  3. 6 kuyulu mikroplakanın her kuyucuğuna 4 mL maruz kalma solüsyonu aktarın.
    not: Her grup için bir adet 6 oyuklu mikroplaka kullanın.
  4. 1 kuyulu mikroplakanın her bir oyuğuna iki larva ile 200 μL maruz kalma solüsyonunu aktarmak için 6 mL'lik bir pipet ucu kullanın.
    not: Her grubun altı tekrar eden grubu vardır.
  5. Testten 2 saat önce test odasının sıcaklığının 28 °C olduğundan emin olun.
    not: Davranış testleri genellikle öğleden sonra yapılır.

2. Hareket ve yol açısı testi

  1. Protokolü kaydedin ve test odasının ışığını kısın.
  2. Larvaları sistemde 10 dakika boyunca alıştırın ve sırayla "Deney" "Yürüt" düğmesine tıklayın, ardından deney dosyalarının kaydedildiği klasörü seçin ve sonuç adını girin.
  3. Testi başlatmak için sırayla "Arka Plan" "Başlat" düğmesine tıklayın.
  4. Test bittiğinde deneyi durdurmak için sırayla "Deney" "Durdur" düğmesine tıklayın.
    not: Sistem durduğunda sistem test edilen verileri gösterir. Veriler, üç hız sınıfında izlenen mesafeyi ve her dakika sekiz açı sınıfında yol açısı numaralarını içerir. Sunulan örnekteki hareket testi için, her ışık periyodundaki (10 dakika) toplam mesafe hesaplanır ve kontrol grubu ile tedavi grupları arasındaki fark karşılaştırılır.
  5. Diğer deneyler için 48 kuyulu mikroplakayı ışık inkübatörüne geri aktarın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
48 kuyulu mikroplaka Corning 3548Embyros konutları
6 kuyulu mikroplaka Corning 3471Embyros konutları
zebra kutusu bakış açısı Zebra Kutusu Davranış aracı
Zebra Laboratuvarı bakış açısı Zebra Laboratuvarı Davranış yazılımı
Pipet Eppendorf Belediyesi 3120000267Transfer çözümü
adet

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Zebrafish LarvaeLocomotion AssayNeurobehavioral ToxicityEnvironmental PollutantHigh Throughput MethodBehavioral TestingLight Dark CycleDistance TraveledCompound Exposure48 Well Plate

İlgili makaleler