Tümör İnterstisyel Sıvı Basıncının Mekansal Ölçümü: İnterstisyel Sıvı Basıncını Ölçmek İçin Bir Yöntem

Özet

Kaynak: Stapleton ve diğerleri, Katı Tümörlerde Perfüzyon, İnterstisyel Sıvı Basıncı ve Lipozom Birikimi Ölçümleri. J. Vis. Uzm. (2016).

Bu videoda, görüntü kılavuzluğunda bir robotik sistem kullanılarak perfüzyon görüntüleme yoluyla bir tümör içindeki interstisyel sıvı basıncını ölçme tekniği açıklanmaktadır. Ölçümler, katı bir tümör içindeki lipozomların intratümöral birikimi ile karşılaştırılır.

Protokol

1. Tümör İnterstisyel Sıvı Basıncının Mekansal Ölçümleri

1. IFP'yi ölçmek için 25 G spinal iğneyi basınç dönüştürücüsüne ve 50 cm PE20 polietilen boru aracılığıyla IFP toplama sistemine bağlayın. Tüm sistemi bir heparin sülfat/tuzlu su çözeltisi (1:10) ile yıkayın. Kullanmadan önce iğneyi %70 izopropil ile sterilize edin.
2. Alım sistemini açın ve IFP alım yazılımını başlatın ve mmHg cinsinden IFP ölçümlerini almak için sistemi kalibre etmek için ayar dosyalarını yükleyin. IFP verilerini sürekli olarak toplamak için al düğmesine tıklayın.
3. Açıklanan yöntemi kullanarak CT-lipozomların enjeksiyonundan 48 ila 72 saat sonra IFP ölçümleri yapın (bu, tümördeki CT-lipozomların yaklaşık pik birikim süresine karşılık gelir).
   1. 400 mg iyot ^kg-1 konsantrasyonunda bir bolus CT-lipozom enjekte etmek için şırınga pompasını kullanın. Pompayı yaklaşık 150 μl'lik bir hacim enjekte edecek şekilde ayarlayın (25 g'lık bir fare varsayılarak). Enjekte etmek için pompadaki 'başlat' düğmesine basın. Tüm ajan miktarının enjekte edildiğinden ve kateterin temiz olduğundan emin olmak için kateteri 50 μl salin (kateter hacminin iki katı) ile manuel olarak yıkayın.
      IFP iğnesini CT-IFP robotuna takın.
4. CT-IFP robotu ve CT tarayıcı için koordinat sistemlerini hizalamak üzere kalibrasyon taramaları gerçekleştirin. Referans işaretleyici ekini CT-IFP robotuna ekleyin ve referans işaretleyici ile dört farklı konumda dört hacimli bir BT taraması gerçekleştirin.
   1. CT-IFP robot kontrol yazılımını başlatın, robotu başlatın ve x, y, z hedefleme konumlarını girerek ve 'git' düğmesine tıklayarak robotu üç konuma getirin.
   2. Aşağıdaki x,y,z koordinatlarında bir CT taraması yapın: (1) 0,0,0; (2) -10,0,0; (3) 0,7,0; ve (4) 0,0,10. CT tarayıcı yazılımını kullanarak 90 kV, 10 mA, 16 sn tarama seçin ve taramayı başlatmak için 'Başlat'a basın. Taramayı açıklandığı gibi yeniden oluşturun. Şırınga pompasını salinle karıştırılmış 100 μl serbest iohexol (hacimce 9:1 oranında) enjekte edecek şekilde ayarlayarak bir DCE-CT taraması gerçekleştirin.
      1. CT tarayıcı konsolunda, 80 kV'luk bir x-ışını enerjisi ayarı, 90 mA'lık bir tüp enerjisi kullanan ve ilk 30 saniye boyunca her saniyede bir 416 görüntü projeksiyonu yakalayan ve ardından her 10 saniyede bir çekim yapan 5 dakikalık dinamik taramayı seçin. 5 saniyelik DCE-CT verilerini yakalayın ve ardından enjeksiyon pompasındaki başlat düğmesine basın.
      2. DCE-CT taramasından sonra hacimsel bir anatomik mikro-BT taraması yapın.
5. CT-IFP robot hizalama yazılımını başlatın. 'Kayıt Verileri' bölgesine yüklenen 'ekle' düğmesine tıklayın ve 1.3'te elde edilen dört yeniden yapılandırılmış kayıt taramasını seçin, ardından 'aç'a tıklayın.
   not: Referans işaretçisinin piksel konumu otomatik olarak yazılıma girilecektir.
   1. 'Dönüşümü Hesapla' düğmesini ve ardından 'Dönüşümü Uygula' düğmesini tıklayın. Bu, CT-IFP robot koordinat sistemini CT tarayıcı koordinat sistemine dönüştürmek için kullanılacak hizalama verilerini üretir. Kalibrasyon tamamlandıktan sonra, hayvan platformunu CT-IFP robotuna takın.
6. Her fareyi tıbbi hava veya oksijenle karıştırılmış %2 izofluran kullanarak uyuşturun ve ayak parmağını sıkıştırarak ve hiçbir reaksiyon gözlemlemeyerek onaylayın. Hayvanı CT-IFP robot platformunda hareketsiz hale getirin ve fareyi, tümörün CT-IFP robot sistemi tarafından erişilebilir olacağı şekilde konumlandırın. IFP iğnesi yerleştirilmesi sırasında hareket etmeyecek şekilde tümörü bant kullanarak hareketsiz hale getirin.
7. IFP iğnesini yerleştirmeden önce anatomik bir mikro-BT taraması yapın. 1.2'de açıklanan adımları kullanarak CT verilerini yeniden oluşturun.
8. İğne yerleştirme öncesi CT verilerini CT-IFP robot hizalama yazılımına yükleyin. Tümörü görselleştirmek için pencereyi ve seviyeyi ayarlayın. Herhangi bir görüntüde tümörün kenarına tıklayın, ardından ikinci bir kenar konumuna tıklayın.
   not: Yazılım, iki konum arasındaki doğrusal bir çizgi boyunca bir dizi konumu hesaplayacaktır. Listeden 5 ila 8 eşit aralıklı konumdan oluşan bir dizi için x, y ve z koordinatlarına dikkat edin.
9. Yerleştirmeden önce iğneyi heparin salin solüsyonu ile yıkayarak IFP sistemini hazırlayın.
10. Önceden belirlenmiş ilk iğne pozisyonlarını x, y, z'ye, CT-IFP robot kontrol yazılımına girin ve robotu istenen konuma hareket ettirmek için 'git' düğmesine basın. İğneyi dokuya sokmak için 'İğne Yerleştir' düğmesine tıklayın.
    1. İğneyi yerleştirdikten sonra, PE20 tüpünü sıkıştırıp serbest bırakarak IFP iğnesi ile doku arasında iyi bir sıvı iletişimi sağlayın, IFP ölçümünün arttığını ve IFP edinme yazılımındaki ön kıstırma değerine geri döndüğünü unutmayın. Referans değer çizgisine dönmeyen ölçümleri reddedin.
11. İğne takılıyken anatomik bir BT taraması yapın, ardından iğneyi dokudan geri çekmek için CT-IFP robot kontrol yazılımındaki 'İğneyi Geri Çek' düğmesine tıklayın. İğne çekildikten sonra IFP değerinin iğne yerleştirme öncesi değere dönmediği herhangi bir IFP ölçümünü reddedin. Bu, ölçüm sırasında iğnenin tıkanmış olabileceğini gösterir. Her iğne konumu için 1.8 ila 1.10 arasındaki adımları tekrarlayın.
12. İğnenin yerleştirilmesi sonrası hacimsel BT taramasında tanımlandığı gibi tümör hacminin kütle merkezine göre iğne portunun x, y ve z konumlarını hesaplayarak tümör hacmi içindeki iğne konumunu belirleyin.
13. Tüm ölçümler tamamlandıktan sonra hayvanları kafeslerine geri koyun. Hayvanları gözetimsiz bırakmayın ve bilinçleri yeniden kazanılana ve sternal yaslanmalarını sürdürebilene kadar onları gözlemlemeye özen gösterin.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Omnipaque (Iohexol) 300 mg iyot / ml	GE Sağlık, CA
eXplore Locus Ultra mikro-CT sistemi	GE Sağlık, CA		CT-Konsol Yazılımı kullanılarak manipüle edildi
27 G Kateter SURFLO Kanatlı İnfüzyon Seti	Terumo Medikal Ürünler, ABD	SV*27EL
PE20 polietilen boru	Becton Dickinson, Amerika Birleşik Devletleri	427406
Kalem ucu 25 G × 3.5" Whitacre omurga iğnesi	Becton Dickinson, Amerika Birleşik Devletleri	405140	IFP iğnesi
P23XL basınç dönüştürücü	Harvard Aygıtı, CA	P23XL
PowerLab 4/35, Köprü Amplifikatörü, LabChart Pro 7.0 ile	ADInstruments Pty Ltd., Amerika Birleşik Devletleri	PL3504, FE221	IFP edinim sistemi ve edinim yazılımı
CT-Sabre Küçük Animall Müdahale sistemi (CT-IFP Robotu)	Paralaks Yenilikleri, CA		CT-IFP robot Kontrol Yazılımı kullanılarak manipüle edildi
CT-IFP robot hizalama yazılımı Özel Matlab yazılımı
DCE-CT Analiz Yazılımı			Özel Matlab yazılımı