Yumuşak Agar Koloni Oluşumu Deneyi: Yeni Bileşiklerin Kanser Hücresi Proliferasyonu Üzerindeki Etkilerini Test Etmek İçin Bir Yöntem

Özet

Kaynak: Horibata A. ve diğerleri, Meme Kanseri Hücrelerinde Tümörjenisite İnhibitörlerini Tanımlamak için Yumuşak Agar Koloni Oluşum Testinin Kullanımı. J. Vis. Uzm. (2015).

Bu videoda, bir PADI enzim inhibitörü ve BB-Cl-amidin'in in vitro meme kanseri tümörjenitesi üzerindeki etkilerini test etmek için bir yumuşak agar koloni oluşumu testi açıklanmaktadır. Bu test aynı zamanda genetik bozulmalar bağlamında hücre dönüşüm potansiyelinin kantitatif değerlendirmesini de sağlar.

Protokol

1. %3 2-Hidroksietil Agarozun Hazırlanması

1. Temiz, kuru 100 ml'lik bir cam şişeye 0.9 g 2-hidroksietil agaroz (Agarose VII) ve ardından 30 ml damıtılmış su ekleyin.
2. Karışımı 15 saniye mikrodalgada pişirin ve hafifçe döndürün. Agaroz tozu tamamen eriyene kadar bu adımı en az üç kez daha tekrarlayın.
3. Solüsyon içeren şişeyi 15 dakika otoklavlayın.
4. Daha fazla kullanmadan önce agaroz çözeltisinin RT'ye soğumasını bekleyin. Çözümü RT'de depolayın.

2. Alt Katmanın Hazırlanması: %0,6 Agaroz Jel

1. 5 ml ve 10 ml'lik birkaç pipeti 37 °C'lik bir inkübatörde önceden ısıtın, böylece agarozun kulla....

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Zeiss Aksiyomot	Carl Zeiss Mikroskobu	1021859251
Ters Mikroskop	Olympus	CKX41
DMEM/F-12	Lonza BioWhittaker	12-719F
HyClone Donör At Serumu	Balıkçı Bilimsel	SH30074.03
Penisilin Streptomisin	Yaşam Teknolojileri	15140-122
2-Hidroksietilagaroz: Tip VII, düşük jelleşme sıcaklığı	Sigma-Aldrich	39346-81-1

Serisi · Gazetesi