Method Article

Antikor mikrodizisi: miRNA ile tedavi edilen akciğer kanseri hücrelerinin protein ekspresyonunu incelemek için bir teknik

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Hossian, A. et. al. Hücre Döngüsünü ve Anjiyogenezi Düzenlemek için Kombinatoryal miRNA Tedavilerinin Analizi. J. Vis. Uzm. (2019).

Bu videoda, spesifik gen ekspresyonunu ölçmek için antikor mikrodizisi kullanarak miRNA transfekte edilmiş akciğer kanseri hücrelerindeki protein ekspresyonunu inceleme tekniği açıklanmaktadır. Özellikli protokolde, hücre döngüsünü ve anjiyogenezi durdurmada kombinatoryal bir miRNA tedavisinin aktivitesinin tanımlanması için antikor mikrodizisi gerçekleştiriyoruz.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. miR-143 ve miR-506 iletimi

>DİKKAT: Açıklanan deneyleri gerçekleştirirken lateks eldiven, koruyucu gözlük ve laboratuvar önlüğü kullanın. Gerektiğinde, biyogüvenlik kabinini, kabin fanı açıkken, hava yollarını tıkamadan veya laminer hava akışını bozmadan kullanın. Koruyucu cam pencereyi her zaman üretici tarafından açıklandığı gibi uygun yüksekliğe ayarlayın.

  1. NSCLC A549 hücrelerini, bir doku kültürü başlığında% 10 FBS ve% 1 penisilin-streptomisin (kültür ortamı) ile desteklenmiş DMEM / F12K ortamında bir T25 cm2 şişe / 6/96 oyuklu plakada tohumlayın ve bir doku kültürü inkübatöründe% 5 CO2

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
A549 Küçük Hücreli Dışı Akciğer Kanseri Hücreleri ATCC (Uzay Servisi)ATCC CCL-185
Penisilin-streptomisin 10/10 Antlanta BiyolojisiB21210
Fetal Sığır Serumu (FBS) Balıkçı Bilimsel10438026
Antikor Dizi Test Kiti, 2 Reaksiyon Dolunay Biyografisi KAS02
Hücre Döngüsü Antikor Dizisi, 2 Slayt Dolunay BiyografisiACC058
ScanArray Hızlı PerkinElmerAdım 2.33: Mikroarray analiz yazılımı
HyClone Fosfat Tamponlu Salin (PBS) Balıkçı BilimselSH30256FS
Thermo Scientific Pierce BCA Protein Testi Termo BilimselPI23226
Serisi Serisi Serisi Serisi

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Antibody MicroarrayProtein ExpressionmiRNA TreatedLung Cancer CellsCell CycleAngiogenesisBiotin LabelingFluorescent DetectionMicroarray ScannerWashing Buffer

Related Articles