Yöntem makalesi

May-Grunwald Giemsa boyama: kemik iliği hücrelerini boyamak için bir yöntem

30 Nisan 2023

Bu makalede

Özet

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Mopin, A. et al. Murine C1498 Hücre Hattını ve İlişkili Lösemi Fare Modelini Karakterize Etmek İçin Ayrıntılı Bir Protokol. J. Vis. Uzm. (2016).

Bu videoda, May-Grünwald Giemsa Boyama kullanılarak kemik iliği hücrelerinin boyanması tekniği açıklanmaktadır. Protokolde, morfolojiyi ve diferansiyel sayımı analiz etmek için murin miyeloid lösemi hücrelerini, C149 hücrelerini boyayacağız.

Protokol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. C1498 Hücre Hattının In vitro Karakterizasyonu

  1. C1498 hücrelerinin in vitro kültürü
    1. 50 ml fetal sığır serumu (FBS), 5 ml penisilin (100 U/ml)-streptomisin (100 μg/ml), 500 μl 50 mM β-merkaptoetanol, 5 ml N-2-hidroksietilpiperazin-N-2-etan sülfonik asit (HEPES), 5 ml esansiyel olmayan amino asit ve 500 ml RPMI ortamına 5 mL sodyum piruvat ekleyerek tam RPMI (Roswell Park Memorial Institute) 1640 ortamı hazırlayın.
    2. C1498 hücre hattını tam RPM'de büyütün. Hücreleri pipetleme ile süspansiyon halinde toplayın ve hücreleri 50 ml'lik bir tüpe aktarın. 350 x g'da 10 dakika santrifüjleyin ve süpernatanı çıkarın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
C1498 hücre hattı ATCC (Uzay Servisi)TİB 49
2-Merkaptoetanol, Gibco ThermoFisher Bilimsel21985
Fetal Sığır Serumu (FBS) ThermoFisher Bilimsel10270
HEPES, Gibco (1 M) ThermoFisher Bilimsel15630
Penisilin-Streptomisin, Gibco ThermoFisher Bilimsel15140
RPMI 1640 Orta (Gibco, GlutaMAX Takviyesi) ThermoFisher Bilimsel61870
Tripan mavisi çözeltisi (% 0.4 ThermoFisher Bilimsel15250-061Konsantrasyon 1/2
Hazne ve filtre kartı (EZ Cytofunnel Shandon) Termo BilimselA78710003
May-Grünwald çözümü RAL Teşhisi320070
Giemsa R çözümü RAL Teşhisi320310Konsantrasyon 1/20
pH 6.8 tampon çözeltisi RAL Teşhisi330368
Slaytlar (Starfrost - zemin kenarları 90) Örgü CamVS1137# 077FKB
Mikroskop Kapak Camları, 24 x 24mm Örgü CamVD1 2424 Y100
Shandon Cytospin 3 Sitosantrifüj ThermoFisher Bilimsel
Yılı Haber Bülteni )

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Diferansiyel BoyamaSitosantrif j Haz rlTampon zelti pH 68Giemsa R zeltisiMikroskobik Morfoloji AnaliziEozin Metilen Mavisi BoyasFACS Tampon Haz rlKapatma Ortam Uygulamas

İlgili makaleler