$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
İnsan katılımcıları içeren tüm prosedürler, insan refahı için kurumsal, ulusal ve uluslararası yönergelere uygun olarak gerçekleştirilmiş ve yerel kurumsal inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. TMS
1. Soleus kasının elektromiyografik kayıtlarında motor uyarılmış potansiyelleri (MEP'ler) ortaya çıkarmak için sekiz rakamlı bir bobin kullanarak kontralateral hemisferin motor kortikal alanını TMS ile uyarın.
2. En uygun stimülasyon noktasını bulmak için, bobini önce tepe noktasının üzerine ve 1 cm ön tarafa yerleştirin. Bobinin sapı geriye doğru bakmalı ve bobinin merkezinde indüklenen akımın arkadan öne doğru bir akısını uyandırmalıdır.
3. Deneklerin manyetik uyarana alışması için maksimum stimülatör çıkışının yaklaşık% 20 - 30'u kadar düşük yoğunluklarla stimülasyona başlayın. Ardışık uyaranlar arasındaki duraklamayı 4 s olarak seçin.
4. Birkaç denemeden sonra, stimülasyon yoğunluğunu maksimal stimülatör çıkışının yaklaşık% 40 - 60'ına yükseltin ve m. soleus'un sıcak noktasını bulmak için bobini frontal-rostral ve medio-lateral yönde hareket ettirin. Sıcak nokta, m. soleus'taki MEP'lerin minimum stimülasyon yoğunluğu ile uyandırılabileceği konum olarak tanımlanır.
5. Soleus sıcak noktasını bulduktan sonra, art arda yapılan on denemenin altısında EMG'de 50 μV'den büyük MEP tepeden tepeye genlikleri uyandırmak için gereken minimum yoğunluk olarak dinlenme motor eşiğini (1.0 MT) belirleyin. Arka plan EMG'sinin zaten 50 μV civarında olduğu deneklerde, eşik olarak 100 μV kullanın.
2. Bobinin Sabitlenmesi
1. Deneğin kafasını bir masanın üzerine yerleştirin ve başın her yöne hareket etmesini önlemek için sert köpük kullanın. Bobini bir standa ve deneğin başını sandalyeye sabitleyin.
2. Bobini cırt cırtlı şeritlerle kafaya sabitleyin ve deney boyunca bobini ve kafa konumunu izlemek için görüntü kılavuzlu bir TMS navigasyon sistemi kullanın. Bobinin deneğin kafasına göre küçük hareketlerinden bile kaçının, çünkü bu, nöronların TMS tarafından işe alınmasını değiştirir.
3. Servikomedüller bileşkede manyetik stimülasyon
1. Kortikospinal sistemin aksonlarını uyarmak için servikomedüller bileşkeye yerleştirilmiş çift konili bir manyetik bobin kullanın.
2. Bobini, indüklenen akımın ilk türevi kraniyal olarak yönlendirilecek ve merkezi kısmı inyonun üzerinde veya yakınında olacak şekilde konumlandırın. Maksimum stimülatör çıkışı (% 100) ile stimülasyon uygulayın.
NOT: Bu yüksek stimülasyon yoğunluğunda bile, uyaran çoğu denekte spinal motonöronları yeterince işe almak ve alt bacak kaslarını (yani, m. soleus ve m. tibialis anterior) aktive etmek için çok zayıftır. Bu nedenle, servikomedüller stimülasyon ile alt bacak kaslarının yüzey EMG'sinde bileşik potansiyel yoktur. Bu nedenle, spinal motonöronların uyarılabilirliğini artırmak için servikomedüller simülasyonu H-refleksi ile birleştirin.
4. Ön ölçüm
1. H-refleksinin (periferik sinir stimülasyonu) boyutunu ayarlayın
1. H-refleks koşullandırma için, elektrik stimülatörünün stimülasyon yoğunluğunu değiştirerek H-refleksinin boyutunu maksimum M-dalgasının (Mmax) %20'sine ayarlayın. Mmax elde etmek için bir H-refleks işe alım eğrisi kaydedin. Bu amaçla, farklı stimülasyon yoğunluklarına sahip uyaranlar uygulayın. Ardışık denemeler arasındaki duraklama 4 saniyedir.
2. Kayıt yazılımında çevrimiçi olarak EMG'de (mV cinsinden) tepeden tepeye genlikler olarak H-reflekslerini ve M-dalgalarını hesaplayın. Kontrol H-refleksinin boyutunun deney boyunca Mmax'ın %20'sinde sabit kalmasına dikkat edin ve her denemede boyutunu kontrol edin. H-refleks boyutunun sistematik bir sapmasını tespit ederken (kontrol H-refleksi her zaman hedef boyuttan daha küçük veya daha büyüktür), ardışık denemeden hemen önce stimülasyon yoğunluğunu ayarlayın.
2. Deneyden önce TMS'nin stimülasyon yoğunluğunu ayarlayın.
1. İstirahatte H-refleks koşullandırması için, motor korteks üzerindeki TMS için stimülasyon yoğunluğunu MT'nin %90 - 100'üne ayarlayın. PNS'siz denemelerde MEP'in görülmediğinden emin olun.
NOT: Erken kolaylaştırmanın kolayca tespit edilebilmesi için dinlenme sırasında koşullu H-refleksi üzerinde büyük etkiler sağlamak için simülasyon yoğunluğu MT'nin %100'üne yakın olmalıdır.
2. Deneyden önce servikomedüller stimülasyon yoğunluğunu ayarlayın. Kortikal stimülasyondan farklı olarak, servikomedüller stimülasyon için stimülasyon yoğunluğunu her zaman maksimum stimülatör çıkışının %100'üne ayarlayın.
3. H-refleksini motor korteks üzerinde manyetik stimülasyon ile koşullandırın.
1. Kortikomotonöronal iletimdeki değişikliklerin değerlendirilmesine izin vermek için iki uyaran arasındaki zamanlamayı değiştirerek (H-refleks koşullandırma) TMS ve PNS uygulayın. Erken kolaylaştırmayı tespit etmek için, koşullandırma protokolünü -5 ms'lik bir uyaranlar arası aralık (ISI) ile başlatın ve ISI'leri -5 - +1 ms arasında milisaniyelik adımlarla değiştirin (Şekil 1B).
NOT: Negatif ISI'ler, PNS'nin TMS'den önce ortaya çıktığını gösterir; pozitif ISI'ler bunun tersini gösterir.
2. TMS ve PNS arasındaki ISI'yi stimülasyon denemesinden stimülasyon denemesine rastgele değiştirin, böylece belirli bir uyaran sırasına bağlı sapma ortaya çıkmaz.
NOT: "Erken kolaylaştırma", TMS'yi motor korteks üzerine uygularken -4 ms ila -2 ms arasında gerçekleşmelidir. Bu, en hızlı (monosinaptik kortikospinal yollar) şu anda spinal motonöronlarda PNS tarafından afferent voleybol ile çarpıştığı anlamına gelir (erken kolaylaştırmayı tespit etmek için bkz. 3.2).
3. Ardışık stimülasyon denemeleri arasındaki duraklamayı 4 saniye olarak ayarlayın.
4. H-refleksini servikomedüller bileşke üzerinde manyetik stimülasyon ile koşullandırın.
NOT: Koşullandırma için servikomedüller stimülasyon kullanılarak, kortikospinal yolların uyarılması, motor korteksin uyarılmasından ziyade spinal motonöronlara uzamsal olarak daha yakındır. Bu nedenle, erken kolaylaştırmaya karşılık gelen ISI yaklaşık 3 - 4 ms kaydırılır. Örnek olarak, -4 ms'de primer motor korteks üzerinde TMS ile erken kolaylaştırma, servikomedüller stimülasyon ile -7 - -8 ms arasında bir ISI'ye karşılık gelecektir.
- Servikedüller koşullandırma için ISI-9 - -3 ms arasında 1 ms'lik adımlarla ISI'leri kullanın. TMS için ISI'leri motor korteks üzerinden ve TMS'yi servikomedüller bileşke üzerinden her zaman tek bir çalışmada birlikte uygulayın ve bu çalışmada da bir kontrol H-refleksi ve bir kontrol MEP'i kaydedin. Karşılaştırılabilir stimülasyon koşullarını sağlamak için kontrol H-refleksini şartlandırılmış H-refleksleri ve kontrol MEP'i için referans olarak kullanın. Ön ölçümde (en az) on denemeyi kaydedin.
5. Motor Korteks ve Servikomedüller Kavşak Üzerinden Alternatif Stimülasyon
1. SOL H-refleksinin koşullandırılmasını, motor korteksin manyetik stimülasyonu (M1-koşullandırma; bkz. 2.1) ve manyetik servikomedüller stimülasyon (CMS-koşullandırma; bkz. 2.2) ile aynı çalışma sırasında rastgele sırayla uygulayın.
NOT: Koşullandırılmış H-reflekslerini aynı kontrol H-refleksleri örneğine yönlendirmek için M1 ve CMS koşullandırmasının bir ve aynı denemede dönüşümlü olarak uygulanması önerilir (bkz. Şekil 1).
6. Müdahale - Yavaş Tekrarlayan TMS
1. Stimülasyon yoğunluğunu 1.2 MT'ye ayarlayın, bu da H-refleks koşullandırmasının tamamlanması birkaç dakika sürdüğü için gerekli olan kortikospinal uyarılabilirliğin uzun süreli baskılanmasına neden olur. rTMS müdahalesi sırasında, TMS'yi birincil motor korteks üzerine 1 Hz'de 20 dakika boyunca uygulayın.
