Bu video, Vibrio türlerini tanımlamak için kültüre dayalı bir yöntemi göstermekte ve kromojenik agarın yaygın olarak kullanılan tiyosülfat-sitrat-safra tuzları-sakaroz veya TCBS agar'a daha doğru bir alternatif olduğunu vurgulamaktadır. Kromojenik agar, türe özgü enzimatik aktiviteleri tespit ederek Vibrio suşlarının üstün farklılaşmasını sağlar.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Vibrio Türlerinin Hızlı Tespiti için Yeni Bir Kromojenik Ortam
778 görüntülenme
⸱
26 Eylül 2025
Bu makalede
Özet
Protokol
Seçici ve Diferansiyel Medyada Büyüme
- Deneyden iki ila dört gün önce, koloni izolasyonu için tüm mikrobiyal suşları seçici olmayan ortama (TSAS, BHI veya çikolata agar) çizin. Plakaları 35-37 °C'de 48 saat inkübe edin. İnkübasyondan sonra koloni morfolojisini gözlemleyerek kültürlerin saflığını kontrol edin. Saf kültürler, benzer koloni morfolojisi sergileyen koloniler vermelidir.
- Birkaç izole koloniyi 5 ml et suyuna aktarın. Tüpleri 35-37 °C'de 16-24 saat inkübe edin.
NOT: Tüm deneylerde gece kültürleri hazırlamak için dört günden küçük genç kolonileri kullanın.
- Koloni izolasyonu için seçici ve diferansiyel ortam (TCBS ve kromojenik agar) üzerinde bir döngü dolusu gece kültürü çizin. Plakaları 35-37 °C'de 96 saate kadar inkübe edin.
- Hem plaka üzerindeki kültür yoğunluğunu hem de izole edilmiş kolonilerin boyutunu inceleyerek tüm suşların genel büyümesini kaydedin. Ortam ve/veya UV ışığı altında kolonilerin rengini kaydedin. İzole koloninin yükseklik, kenar ve biçim gibi diğer özelliklerine dikkat edin.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Reaktif/Ekipman | |||
| Agar | Fisher Bilimsel | DF0140-15-4 Serisi | Diğer markaları kullanabilir |
| BHI tozu | Fisher Bilimsel | DF0418-17-7 Serisi | Diğer markaları kullanabilir |
| CampyGen gaz jeneratörü | Hardy Teşhis | CN035A Grubu | mikroaerofilik bir atmosfer sağlamak; Diğer markaları kullanabilir |
| Çikolatalı agar tabakları | Hardy Teşhis | E14 | Diğer markaları kullanabilir |
| Kültür tüpleri | Fisher Bilimsel | S50712 | Diğer markaları kullanabilir |
| HardyChrom Vibrio agar plakaları | Hardy Teşhis | G319 Serisi | Bu çalışma bu ortamı değerlendirmektedir |
| Kuvöz | Herhangi | ||
| Aşılama döngüleri | Fisher Bilimsel | 22-363-606 | Bu çalışmada 10 mikrolitre boyutu kullanılmıştır |
| Petri kabı | Fisher Bilimsel | FB0875713 | Diğer markaları kullanabilir |
| Pipet ve uçlar | Herhangi bir Sterilize edilmiş uç | ||
| TCBS tozu | Hardy Teşhis | 265020 | Bu çalışma bu ortamı değerlendirmektedir |
| TSB tozu | Fisher Bilimsel | DF0370-07-5 Serisi | Diğer markaları kullanabilir |
| UV görüntüleme kabini | Herhangi | Uzun dalga UV ışığı yayar | |
| Su banyosu | Herhangi | ||
| Bakteri türleri ve suşları | |||
| Aeromonas hydrophila | ATCC | ||
| Candida albicans | ATCC | ||
| Campylobacter jejuni | ATCC | ||
| Escherichia coli | ATCC | ||
| Proteus mirabilis | ATCC | ||
| Pseudomonas aeruginosa | ATCC | ||
| Staphylococcus aureus | ATCC | ||
| Salmonella Choleraesuis | ATCC | ||
| Shigella boydii | ATCC | ||
| Shigella flexneri | ATCC | ||
| Shigella sonnei | ATCC | ||
| Vibrio alginolitikus | ATCC | ||
| V. cholerae (serotipler arasında O139, O1, O1 olmayan, El Tor biyovarları bulunur) | FDA, ATCC | ||
| V. küçük kız | FDA | ||
| V. balıkçı | Çevre | ||
| V. fluvialis | CDC | ||
| V. furnissii | CDC | ||
| V. hollisae | FDA | ||
| V. metschnikovii | ATCC | ||
| V. mimicus | FDA | ||
| V. parahaemolyticus (serotipler arasında O3:K6, O1:K56, O4:K8, O5:K15, O8 vb. bulunur) | ATCC, FDA, CDC, Çevre | ||
| V. proteolyticus | FDA | ||
| V. vulnificus | FDA |
