Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Etilen Salan Bir Bileşik Kullanarak Etilene Bakteriyel Tepkinin Araştırılması

365 görüntüleme

26 Eylül 2025

Bu makalede

Özet

Kaynak: Augimeri, R. V. ve diğerleri, Bakterilerde Etilen Tepkisini İncelemek İçin Bir Araç Olarak Etilen Salan Bileşik 2-Kloroetilfosfonik Asitin Kullanılması. J. Vis. Uzm. (2016)

Bu video, 2-kloroetilfosfonik asit (CEPA) tarafından üretilen etilenin bakteri üremesi ve selüloz üretimi üzerindeki etkisini göstermektedir. Etilen, selüloz sentezini uyaran sinyal yollarını aktive ederek pelikül oluşumunun artmasına neden olur. Bu sonuçlar, etilene bakteriyel tepkiyi vurgulamaktadır.

Protokol

  1. Pelikül Testleri
    1. Komagataeibacter xylinus Başlangıç Kültürlerini Üç Kopya Halinde Büyütün ve Ölçün:
      1. Üç kopya halinde, tek bir Komagataeibacter xylinus kolonisini, %0.2 (h/h) filtreyle sterilize edilmiş selülaz ile desteklenmiş 5 ml Schramm ve Hestrin (SH) ortamına (pH 5) aşılayın. Kültürleri 30 °C'de 150 rpm'de çalkalayarak 600 nm'de (OD600) 0,3 ila 0,4'lük bir optik yoğunluğa ulaşılana kadar (yaklaşık 72 saat) inkübe edin.
      2. Başlangıç kültürlerini santrifüjleme ile hasat edin (2.000 x g; 4 °C; 10 dakika). Hücreleri iki kez 5 ml steril salin ile yıkayın ve h....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1

Şekil 1: Pelikül tahlili ve analizi için kullanılan protokolü gösteren akış şeması. Stok CEPA takviyeli pH 7 SH ortamı (60 ml), üç ayrı biyolojik kopya aşılama ve bir steril kontrol (her biri 14 ml) için alikotasyona tabi tutulur. Bu kültürler daha sonra 24 oyuklu bir pla.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Trichoderma reesei ATCC 26921'den selülazSigmaC2730 (İngilizce)Sulu çözelti
Sitrik asitBiyo MağazaCIT002.500SH ortamı için
Ethephon (%≥ %96; 2-kloroetilfosfonik asit)SigmaC0143 (İngilizce)Etilen salan bileşik
GlikozBiyoTemelGB0219 (İngilizce)SH ortamı için
Komagataeibacter xylinus ATCC 53582ATCC53582Bakteriyel selüloz üreten alfaproteobakteri
Sodyum fosfat, dibazik heptahidratBiyo MağazaSPD579.500 SerisiSodyum fosfat, SH ortamı için dibazik heptahidrat
NaClBiyoTemelSOD001.1Tuzlu su ve kontrol solüsyonu için sodyum klorür
Sodyum fosfat, monobazik monohidratBiyo MağazaSPM306.500 SerisiSodyum fosfat, kontrol çözeltisi için monobazik monohidrat
NaOHBiyo MağazaSHY700.500 SerisipH ayarı için sodyum hidroksit
Parafin filmiParafilmPM996Plakaları ve şişeleri kapatmak için
Pepton (bakteriyolojik)Biyo MağazaPEP403.1 (İngilizce)SH ortamı için
Petroff-Hausser sayım odasıHausser bilimsel3900Bakteri hücre sayma odası
Polietersülfon sterilizasyon filtresi 0,2 μmVWR28145-501Selülazı sterilize etmek için
Maya özüBiyoTemelG0961 SerisiSH ortamı için

Etiketler

Etilen Yan tBakteriyel Sel lozCEPA UygulamasPellikel Olu umuSel loz SenteziPetroff Hauser Say m OdasAlkalin LizizKuru A rl k l mStatik nk basyonok Kuyucuklu Plaka