Konak-Patojen Etkileşim Çalışmaları için Streptococcus Mit Kültürünün Hazırlanması

Özet

Kaynak: Naji, A., ve diğerleri. Caenorhabditis elegans'ta Mit Grubu Streptokokların Neden Olduğu Oksidatif Stresin İncelenmesi. J. Vis. Uzm. (2019).

Bu video, konakçı-patojen etkileşim çalışmaları için bakteri kültürleri hazırlamak üzere Todd-Hewitt Maya Ekstraktı veya THY agar ortamı kullanılarak mikroaerofilik koşullar altında Streptococcus mitis'in kültürlenmesine yönelik yöntemi göstermektedir.

Protokol

1. Mitis Grubu Streptokokların Enfeksiyona Hazırlanması

1. 100 mm x 15 mm THY (Todd-Hewitt Maya Ekstresi) agar üzerinde istenen streptokok suşlarını çizin (plakalar 4 °C'de saklandıysa, ilgili suşları çizmeden önce plakaları 37 °C'ye ısıtın), ardından plakaları 37 °C'de gece boyunca (~18 saat) inkübe edin streptokokların büyümesi için mikroaerofilik bir ortam sağlayan bir mum kavanozunda (çizgili plakalar 4 ° C'de bir hafta saklanabilir) C).
2. Streptokokların klinik izolatlarını çoğaltmak için triptik soya kanlı agar kullanın. Plakaları gece boyunca bir mum kavanozunda 37 °C'de (~18 saat) inkübe edin.
3. Ertesi gün, plakaları mum kavanozundan çıkarın ve steril bir halka kullanarak izole edilmiş kolonileri seçin. 2 mL THY suyu içeren 15 mL steril konik tüpleri aşılayın. Streptokokların klinik izolatlarını çoğaltmak için, THY et suyunu %5 v/v koyun kanı ile destekleyin. Kapakları sıkıca kapatın ve tüpleri statik koşullar altında 37 °C'de inkübe edin.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
BD Bacto Todd Hewitt Et Suyu	Fisher Bilimsel	DF0492-17-6
Maya özü	Fisher Bilimsel	BP1422-500 Serisi
Tek Kullanımlık Polistiren Serolojik Pipetler 10 mL	Fisher Bilimsel	07-200-574
Tek Kullanımlık Polistiren Serolojik Pipetler 25 mL	Fisher Bilimsel	07-200-575
Falcon Kapaklı Bakteriyolojik Petri Kapları (35 mm x 10 mm)	Fisher Bilimsel	08-757-100A
Şeffaf Kapaklı Petri Kabı (60 mm x 15 mm)	Fisher Bilimsel	FB0875713A
Şeffaf Kapaklı Petri Kapları (100 mm x 15 mm)	Fisher Bilimsel	FB0875712
S. mit ATCC 49456 Serisi
Agar