Bir Fare Modelinde İntratrakeal Bakteri Dağıtımının Gerçekleştirilmesi

Özet

Kaynak: Venuprasad, K., ve diğerleri. Hava Yolu Enflamasyonunu İncelemek İçin Fare Modellerinde Haemophilus influenzae'nin Trakeal İçi Uygulaması. J. Vis. Uzm. (2016)

Bu video, alt solunum yolu enfeksiyonunu modellemek için akciğer patojenik bir bakteri inokulumunun anestezi uygulanmış bir fareye intratrakeal olarak verilmesini göstermektedir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Trakeal (i.t.) Damlatma

1. Fareye intraperitoneal olarak (ip) 0.1 mL / 10 g vücut ağırlığı ile 150 mg / ml ketamin + 20 mg / ml ksilazin çözeltisi enjekte edin. İşlem, hayvanı sıcak tutmak için bir ışık kaynağı ile başlıkta yapılmalıdır.
2. Farenin yeterince uyuşturulduğunu doğrulamak için farenin interdigital alanını sıkıştırın.
3. Fareyi sırtına yerleştirin. Boynun ventral bölgesini tıraş edin ve klorheksidin ve %70 etil alkol ile dezenfekte edin.
4. Sıçan dişi forseps kullanarak boynun üst ventral kısmının derisini kaldırın. Bir neşter kullanarak timusun üzerinde küçük bir kesi (0,5-1,0 cm) yapın ve trakeayı ortaya çıkarmak için kası dikkatlice inceleyin.
   1. 27 G'lik bir iğne ile 1 ml'lik bir şırınga kullanarak, yavaşça 0.05 ml hava, ardından kontrol olarak 0.05 ml tiplenemeyen Haemophilus influenzae (NTHi) veya salin ve ardından 0.05 ml hava enjekte edin. Hayvanı yaklaşık 1 dakika dikey tutun.
5. Kesiği cerrahi yapıştırıcı ile kapatın. Fareyi yaklaşık 10 dakika boyunca yanal olarak yaslanmış ve sıcak tutun.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Usta hızlı çözüm	Sigma	GS500-500ML
Şırınga iğnesi 20/26 g	BD	REF305115/175
1 mL şırınga	BD	REFERANS 309602
Diseksiyon makası, düz, 10 cm uzunluğunda	Kentbilimsel	INS600393
İris forseps, tırtıklı, 10 cm uzunluğunda	Kentbilimsel	INS650915
Cımbız 5 paslanmaz çelik, 11 cm uzunluğunda	Kentbilimsel	INS600095