Bu video, tek tip bir süspansiyon oluşturmak için filament kültürlerini homojenleştirerek, bir mikroskop lamı üzerinde bir Petri plakası tahlili kurulumu hazırlayarak ve filament hareketini görselleştirerek Phormidium lacuna'daki kayma hareketliliğini değerlendirme prosedürünü göstermektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Phormidium lacuna Filamentlerinde Kayma Hareketliliği
377 görüntüleme
⸱
30 Ekim 2025
Bu makalede
Özet
Protokol
- Sıvı ortamda hareket için tahlil
- Hareketliliğin doğrudan gözlemlenmesi için, P. lacuna içeren 8 mL ortamı 6 cm'lik bir Petri kabına aktarın. Numune oda sıcaklığına ulaşana kadar birkaç dakika bekleyin, ardından Petri kabını selofan folyo ile kapatın.
- Kameralı standart bir mikroskobun xy masasına bir mikroskop lamı yerleştirin. Mikroskop ışığını açın. İdeal olarak, aydınlatma için her zaman aynı elektrik ve optik ayarları kullanın. 4x veya 10x bir hedefi ışığın yoluna taşıyın.
- Petri kabını slaydın üstüne yerleştirin. Tek filamentleri veya filament demetlerini tablonun x, y ve z hareketlerine göre ayarlayın.
NOT: Üç boyutlu düzenleme nedeniyle, ilgili bölümün yalnızca bir kısmı odakta olabilir. Selofan folyo, odağın kısıtlama olmaksızın ayarlanmasına izin verir. - Tek filamentlerin veya demetlerin hareketlerini gözlemleyin. Objektif merceğin sıvıya temas etmediğinden emin olun. Filamentlerin hareketlerini standart bir mikroskop kamerası ile kaydedin.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Züccaciye, farklı | |||
| Mikroskop DM750 | Zeiss | ||
| Oküler kamera MikrOkular Full HD | Bresser | Raspberry Pi mini bilgisayarına bağlı hızlandırılmış kayıtlar için | |
| Petri kapları polistiren, 60 mm x 15 mm | Merck | P5481-500EA Serisi | |
| Yazılım, URL | |||
| ResimJ | görüntü işleme yazılımı (piksel yoğunlukları, daire çapı) | ||
| Kültür medyası | |||
| Yapay deniz suyu | 0,41 M NaCl, 53 mM MgCl₂, 28 mM Na₂SO₄, 10 mM CaCl₂, 9 mM KCl , 2,4 mM NaHCO₃ ,0,84 mM KBr, 0,49 mM H3BO₃, 90 μM SrCl₂, 72 μM NaF | ||
| f/2 -sıvı ortam | yapay deniz suyu, %0,1 (h/h) eser element çözeltisi, %0,05 (h/h) vitamin çözeltisi, 0,88 mM NaNO₃, 36 μM NaH₂PO₄ | ||
| Eser element çözeltisi | 0,36 mM NaH₂PO₄, 12 μM Na₂EDTA, 39 nM CuSO₄, 26 nM Na₂MoO₄ , 77 nM ZnSO₄, 42 nM CoCl₂, 0,91 μM MnCl₂ | ||
| Vitamin çözeltisi | 0,3 μM tiamin-HCl, 2,1 nM biyotin, 0,37 nM siyanokobalamin |
