Trifeniltetrazolyum klorür kullanarak Vibrio cholerae suşlarını karşılaştırmak için hareketlilik testi

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Brumfield, K. D. ve diğerleri. Vibrio cholerae biyotiplerinin klinik ve çevresel izolatlarının korunması ve ayırt edilmesi için kullanılan laboratuvar teknikleri. J. Vis. Exp. (2017)

Bu video, aktif göç eden hücreler etrafında kırmızı bölge oluşumu yoluyla metabolik aktiviteyi görselleştirerek trifeniltetrazolyum klorür kullanılarak Vibrio cholerae suşlarının hareketliliğini değerlendirip karşılaştırmak için yumuşak bir agar testini göstermektedir.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hareketlilik Testi
1. Vibrio cholerae suşlarının gece kültürünü sıvı LB (Luria-Bertani) çorbasında hazırlayın.
2. Gece kültüründen 1,8 mL pellet 2 dakika boyunca santrifüjle (≥8.600 x g) steril bir 2 mL mikrosantrifüj tüpünde ve süpernatantı pipet ile çıkarın. Hücre pelletini pipetleme ile 1,8 mL 1x PBS (fosfatla tamponlanmış tuzlu serişde) içinde yeniden askıya alın.
3. Yıkama prosedürünü üç kez tekrarlayın, ardından 1.8 mL 1x PBS ile son bir yeniden süspansiyon yapılır.
4. Hareketli agar plakalarını, yıkanmış sıvı kültüre aşılayıcı bir saplama yerleştirerek ve dikey olarak ortama saplayarak aşılayın. Her aşı arasında, tel sapını Bunsen brüleri ile sterilize edin ve agar bıçaklarken, aşılama darbesinin bükülmediğinden emin olun, çünkü bu sonuçları değiştirebilir.
5. Plakaları kapağı açık şekilde 14 ila 24 saat boyunca 37 °C'de kuluçka yapın. 14 saat sonra, kültürlerin aşırı büyümesini önlemek için hareketlilik plakalarını yakından takip edin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Şirket

Katalog numarası

Yorumlar

Agar

Becto, Dickinson ve Co.

214030

http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=214030&parentCategory=&parentCategoryName=&categoryId=&categoryName=&searchUrl=%2FsearchResults%3Fkeyword%3D214030%26typeOfSearch%3DproductSearch

Tezgah üstü santrifüj

Eppendorf

5424

1.5ml eppendorf tüpleri için herhangi bir santrifüj

Le Stab

Decon Labs Inc.

MP186-5

http://deconlabs.com/products/lestab/

LB suyu (Miller)

Thermo/Gibco

10855021

Statik bakteriyel kültür ve OD ölçümü için

Petri Kabları (150 mm x 15 mm)

Fisher Scientific

FB0875714

https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-petri-dishes-clear-lid-12/fb0875714?searchHijack=true&searchTerm=FB0875714&searchType=RAPID

PBS 1x

Statik bakteriyel kültür ve OD ölçümü için

Trifeniltetrazolyum klorür

Alfa Aesar

A10870

https://www.alfa.com/en/catalog/A10870/

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

İlgili makaleler