$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Tetrasikline Bağımlı Gen veya shRNA Ekspresyonunun İndüksiyonu
DİKKAT: Doksisiklin zararlı olabilir. Lütfen güvenlik bilgi formuna bakın.
NOT: Deneyin türüne ve süresine bağlı olarak, doksisiklin içme suyunda sağlanabilir.
- Kısa süreli deneyler için (<10 gün) aşağıdaki protokolü kullanarak içme suyu yoluyla doksisiklin uygulayın.
- 5 g sükrozu 100 mL musluk suyunda çözün. Otoklav.
- 15 mL'lik konik bir tüpte 5 mL sükroz çözeltisi (aşama 1.1.1) içinde 100 mg doksisiklin-hidratı çözün.
- 10 mL'lik bir şırınga kullanarak, steril çözeltiyi 0.2 μm'lik bir filtreden süzün. Adım 1.1.1'de hazırlanan sükroz çözeltisine ekleyin.
- Fareye içme suyu olarak doksisiklin-sükroz çözeltisi sağlayın. Günlük olarak kontrol edin ve çözelti bulanıklaştığında değiştirin, bu da bakteri üremesini gösterir (berrak çözeltiyi en geç üç gün sonra değiştirin).