Küçük Moleküllü Nematisit Tarama Deneyi: Potansiyel Nematisitleri Ditylenchus dipsaci'ye Karşı Taramak İçin Orta Verimli Bir Yöntem

Abstract

Kaynak: Cammalleri, S. R., et al. Parazit Nematod Ditylenchus dipsaci'nin Kültürlenmesi ve Taranması. J. Vis. Uzm. (2022).

Bu videoda, küçük moleküllü nematisitlerin nematodlara karşı etkinliğini belirlemek için bir tarama testi gösteriyoruz. Nematisitler, maruziyetten sonra numunedeki mobil nematod sayısında bir azalmaya neden olurlarsa etkili kabul edilirler.

Protocol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir

.

1. İn vitro küçük molekül ekranı

1. Aşağıdaki adımları izleyerek tahlil plakalarını hazırlayın.
   1. Otoklavlanmış damıtılmış suyu steril bir oluğa dökün ve çok kanallı bir pipet kullanarak, oluktan 40 μL damıtılmış suyu düz tabanlı 96 oyuklu bir plakanın her bir oyuğuna dağıtın.
2. Sabitleme aletini hazırlayın ve kimyasalları ekleyin.
   1. Pinner tepsilerini kurun (Malzeme Tablosuna bakın) bir laboratuvar tezg....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
50 mL beher	Borcam	CLS100050
96 kuyulu plaka	Sarstedt	83,3924
alüminyum folyo	Alcan Artı
Diseksiyon kapsamı	Leica Belediyesi	Leica MZ75
DMSO (Türkçe)	Sigma-Aldrich	472301-500ML
cam kaydırak	Magna	60-1200
Tüy Bırakmayan Kurutma Kağıdı	V&P Bilimsel	Başkan Yardımcısı 522-100
Düşük tutma noktalı pipet uçları (200 uL)	LABORATUVAR GÜCÜ	1159M44
çok kanallı pipet	Eppendorf araştırma artı	3125000036
NaOH (NanoOH	Sigma-Aldrich	S8045-500G
parafilm	Bemis	PM-996
Pim temizleme çözümleri	V&P Bilimsel	VP110A
Pinner	V&P Bilimsel	VP381N
Pinner durulama tepsileri	V&P Bilimsel	Başkan Yardımcısı 421
Çok kanallı pipetler için kapaklı reaktif haznesi	Sigma-Aldrich	BR703459
sallama inkübatörü	New Brunswick Bilimsel	I26