Analiz Teknikleri

Bu videoda, bir deniz deniz anemonunu olan Anthopleura dowii'den elde edilen ham zehir ekstraktında fosfolipaz varlığını belirlemek için bir test gösteriyoruz. Test, fosfolipaz enziminin katı ortama dahil edilen fosfolipidleri radyal bir şekilde yaydığı ve parçaladığı bir agaroz jel difüzyon tekniği kullanır.

Bu videoda, halka mikro modeli gibi sınırlı bir geometrik sınırdaki hücrelerin hizalama yanlılığını belirlemek için bir hücre kiralite testini açıklıyoruz. Kiralite, çoğu hücre tipinin doğal bir özelliğidir ve genetik ve çevresel faktörler tarafından belirlenir. Normal bir hücre popülasyonunun kiralitesini bilmek, ilaçla tedavi edilen hücrelerin taranmasına yardımcı olabilir.

Bu videoda, Drosophila'nın doku homojenatında bulunan mitokondriyal sitrat sentaz aktivite testini ölçmek için bir kolorimetrik test açıklanmaktadır.

Bu videoda, fare karaciğer dokusundaki hem olmayan demir içeriğini belirlemek için kolorimetrik tabanlı bir yöntemi açıklıyoruz. Batofenantrolin sülfonat, ferrik demiri şelatlanabilir demirli demire dönüştüren bir indirgeyici ajanın varlığında kromojenik substrat olarak kullanılır.

Bu video, 14C-radyoaktif işaretli substrat kullanılarak substrat oksidasyonu sırasında salınan CO2 için bir miktar belirleme tekniğini göstermektedir. Serbest bırakılan 14CO2, alkali bir çözelti içinde tutulur ve bir sintilasyon sayacı ile ölçülür. Farklı substratların oksidasyonu dokular arasında değişir ve dokunun patofizyolojik durumunu yansıtır.

Bu videoda, toplam iç yansıma floresan mikroskobu kullanarak in vitro olarak cam destekli bir lipid çift tabakası üzerinde septin organizasyonunu araştırmak için bir prosedür gösteriyoruz.

Bu video, lipid çift katmanları ile kaplanmış mikroküreler üzerinde septin protein düzeneğini inceleme tekniğini açıklar. Bu teknik, eğri yüzeyler üzerindeki eğriliğe bağlı protein düzeneklerinin anlaşılmasına yardımcı olur.

Bu videoda, küçük moleküllü nematisitlerin nematodlara karşı etkinliğini belirlemek için bir tarama testi gösteriyoruz. Nematisitler, maruziyetten sonra numunedeki mobil nematod sayısında bir azalmaya neden olurlarsa etkili kabul edilirler.

Bu videoda, anyonik bir boya olan Alizarin Red S kullanılarak osteoblast tarafından salgılanan kalsiyum birikintilerinin tespiti için bir yöntem açıklıyoruz. Kültürlenmiş osteoblastlar önce boyanır ve daha sonra boya, kalsiyum birikintilerinin kolorimetrik miktar tayini veya osteoblast mineralizasyon derecesi için geri kazanılır.

Bu videoda, çeşitli insan bulaşıcı hastalıklarının bilinen vektörleri olan sivrisineklerin üçüncü instar evre larvaları üzerindeki dopamin reseptör antagonisti amitriptilinin toksisitesini değerlendirmek için larva temas testini açıklıyoruz. Farklı zaman aralıklarında farklı amitriptilin konsantrasyonları ile inkübasyon üzerine larva mortalitesinin değerlendirilmesi, öldürücü konsantrasyonunun 50 belirlenmesine yardımcı olur.

Bu videoda, yetişkin dişi sivrisinekler üzerindeki potansiyel bir böcek ilacının toksisitesini belirlemek için topikal test testini gösteriyoruz. Sivrisineklerde nörotransmisyonun ölümcül inhibisyonuna neden olan bir dopamin reseptör antagonisti kullanan bu yöntem, topikal uygulama üzerine insektisitlerin toksik etkilerini değerlendirmenin bir yolunu tanımlar.

Bu video, dişi sivrisinekler üzerinde yeni etki modlarına sahip test bileşiklerinin mortalitesini ve doğurganlığını değerlendirmek için bir kanla besleme testini göstermektedir. Bu teknik, dirençli sivrisinek popülasyonunu öldürmek ve hastalığın yayılmasını kontrol etmek için yeni böcek ilacı sınıflarının taranmasına yardımcı olur.

Bu videoda, proteazom aktivitesini bloke eden, yanlış katlanmış, mutant proteinlerin, bir floresan etikete kaynaşmış, ubikitine bağımlı proteazomal bozunmaya uğramasını önleyen proteazom inhibitörleri kullanılarak hücre bazlı bir protein agregasyon testini gösteriyoruz, bu da hücre sitoplazması içinde birikmelerine yol açar. Protein agregatları daha sonra floresan mikroskobu ile görselleştirilir ve ölçülür.

Bu video, kemilüminesans tabanlı bir yöntemle bir tam kan örneğindeki endotoksin aktivitesini araştırmak için hızlı bir biyo-testi göstermektedir. Bu test, endotoksin aracılı sepsisin erken evre tanısı için hızlı ve hassas bir biyobelirteç testidir.

Bu video, PEGile lipozomal doksorubisin nano formülasyonlarında endotoksin kontaminasyonunu tahmin etmek için Limulus amoebosit lizat veya LAL testinin türbidimetrik formatını açıklar. Endotoksinin LAL reaktifi ile reaksiyonunu takiben çözeltinin bulanıklığı, numunedeki endotoksinin tahmin edilmesine yardımcı olur.

Bu videoda, at nalı yengeçlerinin kan hücrelerinden elde edilen Limulus Amip Losit Lizat kullanılarak nano formülasyonlarda bakteriyel endotoksinlerin varlığını belirlemek için bir jel-pıhtı testi açıklanmaktadır. Test, nano bazlı formülasyonlar da dahil olmak üzere farmasötik ürünlerin endotoksin kontaminasyonunun test edilmesine yardımcı olur.

Bu videoda, çözünmeyen kromojenik polimer hidrojel substratları kullanılarak karbonhidrat aktif enzim taraması için yüksek verimli bir test gösteriyoruz. Enzim, bu substratları, ürünün renk yoğunluğunun ölçülmesiyle ölçülebilen çözünür renkli bir ürüne indirger.

Bu videoda, çözünmeyen kromojenik biyokütle veya ICB kullanılarak bitki biyokütlesindeki kompleks polisakkaritlerin parçalanmasında etkili olan enzimlerin taranması için bir test gösterilmektedir. Enzimler, çözünür boyaya bağlı oligosakkaritleri serbest bırakmak için ICB'yi hidrolize eder ve enzim aktivitesi, reaksiyon ürününün kolorimetrik analizi ile değerlendirilir.

Bu video, mitokanın ilaca duyarlı kanser hücreleri ve sağlıklı varyantlar üzerindeki sitotoksik etkisini tespit etmek için bir nükleer boyama yöntemini göstermektedir. Promidyum iyodür ve Hoechst boyası gibi DNA bağlayıcı boyalarla yapılan çift boyama, ölü ve canlı hücreler arasında net bir ayrım sağlar, böylece ilacın sitotoksisitesinin değerlendirilmesine yardımcı olur.

Bu videoda, aktin-miyozin etkileşimlerini analiz etmek için bir in vitro motilite testi gerçekleştiriyoruz. Aktin filamentlerinin hareketsizleştirilmiş miyozin molekülleri üzerindeki kayma hareketi, floresan mikroskobu kullanılarak görselleştirilir.

Bu videoda, aktin-miyozin etkileşimlerini analiz etmek için bir in vitro motilite testi gerçekleştiriyoruz. Aktin filamentlerinin hareketsizleştirilmiş miyozin molekülleri üzerindeki kayma hareketi, floresan mikroskobu kullanılarak görselleştirilir.

Bu video, hücre içi nükleotid ikinci haberci bağlayıcı proteinlerin sistematik yüksek verimli taraması için bir teknik olan ligand testinin diferansiyel radyal kılcal etkisini göstermektedir. Bu teknik, habercilerin hücre lizatındaki aşırı eksprese edilen hedef proteine doğrudan bağlanmasına izin verir - protein saflaştırma ihtiyacını atlar.

Bu videoda, deterjan fraksiyonlaması ile birlikte sikloheksimid muamelesi kullanılarak yanlış katlanmış proteinler için bir bozunma testi açıklanmaktadır. Bu yöntem, yanlış katlanmış proteinlerin dinamiklerini incelemeye ve protein döngüsünün derinlemesine mekanizmalarını ortaya çıkarmaya yardımcı olur.

Bu videoda, transfekte edilmiş memeli hücrelerinin çekirdeğinde eksprese edilen floresan etiketli yanlış katlanmış lusiferaz mutant proteinin bozunma kinetiğini incelemek için in vitro floresan bazlı bir mikroplaka testi açıklanmaktadır. Test, yanlış katlanmış proteinin proteazom aracılı bozunmasını değerlendirmek için floresan mutant proteini eksprese eden hücrelerin bir translasyon inhibitörü ve bir proteazom inhibitörü ile işlenmesini içerir.

Video, lusiferaz etiketli proteinleri ölçmek için kullanılan lusiferaz testini göstermektedir. Tahlil, ilgilenilen bir protein ile konjuge edilen küçük parçaya bağlanan büyük bir parçadan oluşan tasarlanmış bir lusiferaz enzimi kullanır. Bağlı alt birimler, substratın varlığında ışıldayan bir sinyal yayan aktif bir enzim oluşturur. Bu sinyal daha sonra bir luminometre kullanılarak ölçülür.

Bu video, yaşlanmaya bağlı proteostaz düşüşünü belirlemek için in vivo görüntülemeye dayalı bir testi göstermektedir. Test, yaşa bağlı poliglutamin agregasyonunu ve proteotoksisitenin indüksiyonunu ölçmek için vücut duvarı kaslarında poliglutamin YFP-füzyon proteinini eksprese eden Caenorhabditis elegans'ı kullanır ve felce yol açar.

Bu videoda, boncuk tabanlı bir yakınlık testi olan güçlendirilmiş ışıldayan yakınlık homojen testini gösteriyoruz. Protein etkileşimlerini inhibe eden potansiyel küçük molekülleri taramak için etkileşime girme eğiliminde olan iki protein ile hareketsiz hale getirilmiş, homojen boyutta alıcı ve verici boncuklar kullanır.

Bu video, Drosophila sineklerinde bağırsak asitlenmesini izlemek için yapılan bir testi göstermektedir. pH indikatör boyası ile takviye edilmiş gıdaların yutulmasından sonra, bağırsak lümeninin asitleşmesi boyanın renginde bir değişikliğe neden olur. Renk değişimini incelemek için sineklerin sindirim sisteminin görsel olarak incelenmesi, asitleşmenin kanıtını sağlar.

Bu videoda, izole mitokondride mitokondriyal kalsiyum alımını ölçmek için plaka okuyucu tabanlı bir test açıklanmaktadır. Tahlil, mitokondriyal kalsiyum alımının ve aşırı kalsiyum yükünün kinetiğini incelemek için kalsiyuma duyarlı bir floresan boyanın floresan sinyalini analiz eder.

Bu videoda, bitki dokularındaki çözünür protein içeriğini ölçmek için kolorimetrik bir yöntem açıklanmaktadır. Yöntem, dokudaki çözünür protein içeriği ile orantılı olarak mavi renkli kararlı bir protein-boya kompleksi oluşturmak için çözünür protein ile etkileşime giren Coomassie Brilliant Blue G-250 boyasını kullanır.

Bu video, bitki dokularında bulunan sindirilebilir karbonhidratları ölçme yöntemini açıklar. Bu, beslenme ekolojisini, bitki-otobur etkileşimlerini ve besin ağı dinamiklerini incelemek için çeşitli bitki dokularından veri toplamaya yardımcı olur.

Bu videoda, hücre içi patojen Toxoplasma gondii'nin büyümesini ölçmek için lusiferaz testini gösteriyoruz. Konakçı hücreleri enfekte ettikten sonra lusiferaz enzimini eksprese eden bir Toksoplazma suşu kullanılarak, parazitin başarılı bir şekilde üremesini belirlemek için enfekte hücre kültüründe lusiferaz aktivitesi tespit edilir.

Video, hücre içi patojen Toxoplasma gondii'ye karşı bir antiparaziter kimyasal inhibitörün etkinliğini belirlemek için kullanılan lusiferaz testini göstermektedir.Çalışma, çoğalmak ve hayatta kalmak için konakçı hücreleri istila eden lusiferaz eksprese eden parazitleri içerir. Kimyasal inhibitör, parazitin sistein proteazlarına bağlanır ve replikasyonu inhibe eder. Tespit edilen lusiferaz aktivitesi, ilacın parazite karşı etkinliğini belirleyen, parazit büyümesindeki kıvrım değişiklikleri ile...

Bu video, lipozomların lipid çift tabakasına entegre edilmiş yanlış lokalize TA proteinlerinin Msp1 aracılı uzaklaştırılmasını incelemek için bir in vitro protokolü göstermektedir. Msp1 ve TA proteinleri lipozomlara birlikte sulandırılır ve TA proteinlerinin ATP'ye bağlı translokasyonu, afinite saflaştırması yoluyla doğrulanır.

Bu videoda, β-galaktosidaz enzimini eksprese eden bir parazit olan Trypanosoma cruzi'ye karşı tripanosidal bir ilacın sitotoksik potansiyelini belirlemek için basit ve sağlam bir yöntemi açıklıyoruz. β-galaktosidaz bir hücre lizis göstergesi olarak hizmet eder ve aktivitesi ilacın etkilerini değerlendirmek için kullanılabilir.

Bu videoda, test ilaçları ile tedavi edildiğinde metabolik olarak aktif ex vivo sıçan beyin dilimlerinin nöronlarından monoamin salım mekanizmalarını araştıran bir test gösteriyoruz. Test, nörostimülan ilaçların hücresel monoamin taşıyıcıları yoluyla monoamin salınımını indüklediğini, yüksek KCl konsantrasyonunun ise sinaptik vezikül ekzositoz aracılı veziküler monoamin salınımını indüklediğini göstermektedir.

Bu videoda, nematodların vücut duvarı kas hücrelerinde poliQ agregasyonunu azaltmada ve agregasyonla ilişkili proteotoksisiteyi iyileştirmede nöroprotektif test bileşiklerinin koruyucu potansiyelini taramak için in vivo bir yöntem açıklanmaktadır.

Bu videoda, bir test bileşiği olan astragalan'ın, poliQ aracılı nörotoksisiteden Caenorhabditis elegans'ta nöronal sağkalım üzerindeki nöroprotektif etkisini değerlendirmek için bir yöntem açıklıyoruz. Test, test bileşiği tedavisini takiben nöronal sağkalımı ölçmek için ASH nöronlarında GFP'ye kaynaşmış anormal şekilde genişlemiş poliQ tekrarlarını ifade eden Caenorhabditis elegans'ı kullanır.

Bu videoda, bir transgenik solucan modelinde kemokaçınma davranışını incelemek için bir ozmotik kaçınma testi açıklanmaktadır. Kaçınma davranışı, yüksek ozmotik bir bariyer ve kemoatraktan varlığında bir plakada test edilir. Fonksiyonel nöron kaybı olan solucanlar kemoatraktan tarafından çekilir, yüksek ozmotik bariyeri geçer ve anestezik çözelti nedeniyle tuzak bölgesinde felç olur.

Bu videoda, laktat dehidrojenaz enzimi kullanılarak hücre lizatlarında laktat ölçümü için bir kolorimetrik test açıklanmaktadır. Bu enzim, NAD'nin tetrazolyum boyalarla reaksiyona giren NADH'ye dönüştürülmesiyle birlikte laktatı piruvata dönüştürür ve laktatı kantitatlamak için spektrofotometrik olarak ölçülebilen renkli bir ürün verir.

Bu videoda, Caenorhabditis elegans'ın hücresel fraksiyonlarında piruvatın kantitatif olarak ölçülmesi için kolorimetrik bir test açıklanmaktadır. Piruvat oksidazın hücresel piruvat ile enzimatik reaksiyonundan üretilen hidrojen peroksit kullanılarak, piruvat konsantrasyonunu belirlemek için kolorimetri kullanılarak ölçülen renkli bir ürün üretmek için kromojenik bir boya oksitlenir.

Bu videoda, glikojen sentaz aktivitesinin tahmini için bir spektrofotometrik test açıklanmaktadır. Yöntem, zamanla NADH absorbansındaki azalmaya dayanır ve glikojen sentaz aktivitesini gösterir.

Bu videoda, karakterize edilmemiş bir yapıya sahip bir glikojen numunesindeki dallanma derecesini belirlemek için kalitatif bir spektrofotometrik testi açıklıyoruz. Karakterize edilmemiş numunenin absorbans maksimumlarının bilinen dallı yapılara sahip polisakkaritlerinkiyle karşılaştırılması, karakterize edilmemiş numunede dallanmanın varlığını gösterir.

Bu video, biyolojik örneklerdeki oksidatif stresi değerlendirmek için tiyobarbitürik asit reaktif maddeler (TBARS) testini göstermektedir.

Bu video, protein-protein etkileşimlerini tespit etmek için bölünmüş lusiferaz tamamlama testini göstermektedir. Bu tahlilde, ilgilenilen proteinler, lusiferaz enziminin küçük ve büyük parçalarına etiketlenir. Proteinler etkileşime girdiğinde, büyük ve küçük fragmanlar, belirli bir substratın varlığında ölçülebilen parlak ışıldama açığa çıkaran aktif bir enzim kompleksi oluşturmak üzere birleşir.

Bu video, hidrolik özellik analizi için bir toprak numunesi toplama tekniğini göstermektedir. Numune alma alanı temizlenir ve üst kabuk boşaltılır. Numune alma halkası daha sonra numuneyi toplamak için toprağa yerleştirilir. Numunenin bulunduğu halka daha sonra temizlenir, etiketlenir, paketlenir ve analiz için rahatsız edilmeden aktarılır.

Kaynak:Léa Rubira1, Hélène Sturer1, Louise Combette1, Sandra Santini1, Stéphane Renaud1, Cyril Fersing1,21Nükleer tıp bölümü, Institut régional du Cancer de Montpellier (ICM), Univ Montpellier, 2IBMM, Univ Montpellier, CNRS, ENSCMBu video, çift hatlı kaset sistemine sahip peristaltik bir pompa kullanılarak bir radyofarmasötiğin güvenli ve kontrollü infüzyonunu göstermektedir. Kurulum, salin ve infüzyon hatlarının bağlanmasını, korumalı şişenin konumlandırılmasını ve salin ve radyofarmasötiğin...

Source:Anthony J. Yosick1,2, Christine Massie1, Emma Knapp2, Hani A. Awad1,2,31Department of Biomedical Engineering, University of Rochester, US2Center for Musculoskeletal Research, Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USA3Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USAThe video demonstrates fall-related wrist fractures using human cadaver forearms with varying bone densities. Specimens are standardized by removing upper soft tissue,...

Bu videoda, hücre dışı veziküllerin veya EV'lerin hücresel alımını görselleştirmek ve ölçmek için bir test gösteriyoruz. Bu test, konfokal bir mikroskop kullanarak 3D floresan görüntülemeyi kullanır ve içselleştirilmiş EV'leri hücre yüzeyine yapışanlardan ayırt etmeye izin verir.

Bu videoda, elektrik empedansına dayalı üç odacıklı bir dizi kullanan bir istila testi açıklanmaktadır. Bu teknik, tümör mikro ortamlarında yerleşik stromal hücreler tarafından salgılanan çözünür faktörlerin etkisi altında kanser hücrelerinin istilacı potansiyelini ölçer.

Bu videoda, A549 hücrelerinde Staphylococcus aureus içselleştirmesini ölçmek için lizostaphin bazlı bir in vitro enzim koruma testi gösteriyoruz. Test, konakçı hücrelerdeki hücre içi bakteri yükünün kalitatif, kantitatif ve karakterizasyon çalışmalarına yardımcı olur.

Bu videoda, insan periferik kan mononükleer hücre türevi osteoklastları ile kültürlenmiş kalsiyum fosfat kaplı hücre kültürü plakaları üzerinde in vitro osteoklastik rezorpsiyon testini açıklıyoruz. Osteoklastlar, hücre kültürü plakasının kalsiyum fosfat kaplı matrisi üzerinde karakteristik bir aktin halkası oluşturur ve kalsiyum ve fosfat iyonlarını serbest bırakmak için aktin halkası bölgesi içindeki matrisi bozar, bu da bozulmuş matris içinde farklı emilim çukurlarının oluşmasına neden olur.

Bu videoda, ışığa duyarlı bir oligomerizasyon alanına kaynaşmış içsel olarak düzensiz bölgeleri içeren hücre içi proteinlerin, zarsız sıvı benzeri kondensatlara kendi kendine birleşmek için mavi ışığa maruz kalma yoluyla indüklendiği bir faz ayırma testini açıklıyoruz.

Bu video, anjiyogenezin erken aşamalarında endotel filizlenmesini incelemek için perisitleri içeren modifiye edilmiş bir mikro taşıyıcı boncuk bazlı testi göstermektedir. Test, anjiyogenezin moleküler mekanizmalarını ve anti-anjiyogenetik terapötiklerin etkisini anlamak için in vitro deneysel bir model sağlar.

Bu videoda, bir insan örneğinde kalsiyum-iyonoforun neden olduğu hemolizi veya kırmızı kan hücrelerinin parçalanmasını belirlemek için bir in vitro test açıklanmaktadır. Test, yırtılmış eritrositlerden salınan hemoglobini ölçerek hemoliz yüzdesini ölçer.

Bu videoda, floresan Annexin V boyama kullanarak eritoz, eritrosit programlanmış hücre ölümü derecesini ölçmek için Annexin V bağlanma testini gösteriyoruz. Apoptotik eritrositler, hücre zarının iç kısmından dış broşürüne fosfatidilserin translokasyonu gösterir ve florofor etiketli Annexin V'nin translokasyonlu fosfatidilserine bağlanmasına ve böylece bir floresan sinyali yaymasına neden olur.

Bu video, karmaşık gıda kaynaklarında demir biyoyararlanımını değerlendirmek için bir in vitro tekniği göstermektedir. Teknik, farklılaşmış Caco-2 hücreleri tarafından demir alımı ile birlikte insan sindiriminin simülasyonunu birleştirir. Hücre içi ferritin oluşumu, hücresel demir alımı için bir belirteç görevi görür.

Bu video, hücre içi glikoz alımını dolaylı olarak ölçmek için bir in vitro testi göstermektedir. Test, hücre dışı glikoz tükenmesi ile hücre içi glikoz alımı arasında bir korelasyon kurmak için floresan etiketli bir glikoz analoğu kullanır.

Bu videoda, hasat edilmiş fare organlarında hücre dışı glikoz analog tükenmesini ölçmek için ex vivo bir teknik gösteriyoruz. Fare dokusunun, hücreler tarafından alınan floresan etiketli deoksiglukoz içeren bir çözelti içinde inkübe edilmesini içerir. Glikoz analog alımı, inkübe edilmiş ortamın floresansının ölçülmesiyle dolaylı olarak belirlenebilir.

Bu videoda, elektrik hücresi-substrat empedans algılama veya ECIS kullanılarak aort düz kas hücresi (SMC) kasılmasının ölçümü açıklanmaktadır. ECIS, hücrelerin hareketini ölçer ve kasılmaları ölçmek için güvenilir bir yöntemdir.

Bu videoda, bazofil degranülasyonunu indüklemek için bir antijenin alerjik potansiyelini değerlendirmek için bir in vitro yöntemi açıklıyoruz. β-hekzosaminidaz, kimyasal aracı salınımının bir indeksi olarak kullanılır ve β-heksosaminidazın enzim aktivitesi, florojenik bir substrat kullanılarak ölçülür.

Bu videoda, hücresel metabolik aktivite için bir belirteç olarak hücre içi ATP seviyelerini kullanan bir test ajanı ile tedavi edildikten sonra hasta kaynaklı organoidlerde hücre canlılığını değerlendirmek için hızlı, tek eklemeli bir test gösteriyoruz. Hücre içi ATP seviyeleri, yayılan ışık yoğunluğunun hücresel canlılığı ve buna bağlı olarak test ajanının büyümeyi inhibe edici gücünü gösterdiği lusiferaz/lusiferin reaksiyonu kullanılarak ölçülür.

Bu videoda, kültürlenmiş organoidlerde oksidatif stresi görselleştirme tekniği açıklanmaktadır. Bu çalışma, farklı ROS modülatörleri ile tedaviden sonra bir organoidde bulunan çeşitli hücre tiplerinde ROS birikimine bağlı oksidatif stres seviyesinin anlaşılmasına yardımcı olur.

Bu video, GFP eksprese eden transgenik farelerden elde edilen 3D bağırsak organoidlerindeki ROS seviyelerini ölçmek için bir akış sitometrisi testini göstermektedir. Bu yöntem, test bileşiklerinin ROS üretimi üzerindeki etkinliğini araştırmak için in vitro deneysel bir model sağlar.

Bu videoda, ozmolitlerin bakteriyel kalıcıların oluşumu üzerindeki etkisini değerlendirmek için bir yöntem gösteriyoruz. Bakteri hücreleri önce ozmotik stresi indüklemek için ozmolitlere maruz bırakılır, kalıcı oluşumu tetikler, daha sonra kalıcıları saymak için antibiyotiklerle muamele edilir.

Bu video, tek hücre düzeyinde bakteri rekabetini incelemek için floresan mikroskobu tabanlı bir yöntemi göstermektedir. Bu yöntem, bakteri topluluklarının yapısı ve işlevi hakkında bilgi sağlar.

Bu videoda, enfeksiyöz herpes simpleks virüsü veya HSV'nin virüs plak testi açıklanmaktadır. Seyreltilmiş viral partiküller, epitel hücrelerinin tek tabakasına aşılanır. Kuluçka sırasında, virüs plaklar oluşturur ve bulaşıcı virüs titresini belirlemek için görsel olarak sayılır.

Bu videoda, bir numunedeki apoptotik hücrelerin varlığını tespit etmek için TUNEL testi gerçekleştirilmiştir. Çalışma, bir floresan mikroskobu altında gözlemlenebilen ve tanımlanabilen, parçalanmış DNA'nın 3' terminaline etiketli dUTP'lerin eklenmesini katalize eden özel bir DNA polimeraz - terminal deoksinükleotidil transferaz - kullanmayı içerir.

Bu videoda, hücre ölümünü veya apoptozu ölçmek için in vitro Kaspaz-3/7 ışıldayan bir test açıklanmaktadır. Test, ışıldayan bir DEVD substratının kaspaz-3/7 bölünmesini takiben üretilen lüminesansı ölçer. Üretilen lüminesans, kaspaz-3/7 aktivitesi ile orantılıdır.

Bu video, Drosophila melanogaster'in homojenize embriyonik hücrelerinde apoptotik hücre yutulmasını görselleştirmek için bir immün boyama tekniğini göstermektedir. Bu yöntem, apoptotik hücre yutulmasının derecesini belirleyerek hücresel fizyoloji hakkında bilgi sağlar.

Bu videoda, konfokal mikroskopi kullanarak apoptotik hücrelerin klirensini incelemek için efferositoz testini gösteriyoruz. Efferositoz, apoptotik hücrelerin fagositler tarafından yutulduğu ve efferozom adı verilen veziküller içinde parçalandığı çok aşamalı bir süreçtir. Bu protokol, tek tek apoptotik hücrelerin içselleştirilmiş ve içselleştirilmemiş kısımlarını görselleştirmek ve efferositozu ölçmek için bir yöntem sağlar.

Bu videoda, bir fosfodiester inhibitörünün varlığında, oosit hücre döngüsünün faz-I'de durdurulduğunu ve bu sırada transkribe edilen mRNA'ların translasyon yokluğunda depolandığını gösteriyoruz. İnhibitörün serbest bırakılmasından sonra, oosit olgunlaşması devam eder ve hücreler metafaza girer. Metafaz-I'de hedef gen ile kaynaşmış raportör mRNA'nın sinyali, translasyonel mekanizmanın ve protein ekspresyonunun aktivasyonunu gösterir.

Bu videoda, resazurin bazlı Alamar mavisi solüsyonu kullanılarak yapay gözyaşı formülasyonlarının kornea epitel hücrelerinin hücresel metabolik aktivitesi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için bir in vitro florometrik test açıklanmaktadır. Toksik olmayan bir formülasyon, hücreleri sağlıklı, metabolik olarak aktif bir durumda tutar ve resazurinin yüksek floresan bir resorufin'e indirgenmesini kolaylaştırır.

Bu videoda, kültürlenmiş hücrelerde mitokondriyal kalsiyum alımını ölçmek için konfokal mikroskopi görüntülemeye dayalı bir test açıklanmaktadır. Test, geçirgenleştirilmiş kültürlenmiş hücrelerdeki mitokondriyal kalsiyumu ölçmek için kalsiyuma duyarlı floresan boya Rhod-2 /'yi kullanır.

Bu videoda, hücre zarı taklitleri (büyük unilamellar veziküller veya LUV'ler, bir floresan boya ve bir söndürücü ile kapsüllenmiş) kullanarak hücreye nüfuz eden peptitlerin hücre zarlarıyla etkileşimlerini incelemek için floresan sızıntı testi tartışılmaktadır.

Bu video, aort kapak interstisyel hücrelerinin kalsifikasyonunu in vitro olarak değerlendirmek için bir test tekniğini göstermektedir. Test, mor renkli bir kalsiyum-arsenazo kompleksi oluşturmak için kalsiyum iyonları ile reaksiyona giren kalsiyuma duyarlı bir boya olan arsenazo III reaktifi kullanılarak kalsiyum konsantrasyonunun ölçülmesine yardımcı olur.

Bu videoda, rhinal korteks-hipokampus organotipik dilimlerinin epileptiform aktivitesinin elektrofizyoloji veya EEG kurulumu kullanılarak ex vivo olarak kaydedilmesi tekniği açıklanmaktadır. Bu, epileptogenezin dinamiklerini ve ilerlemesini incelemeye ve epilepsiyi tedavi etmek için potansiyel terapötik hedefleri taramaya yardımcı olur.

Bu videoda, murin miyoblastlarının göç kapasitesini değerlendirmek için temassız bir ko-kültür yara iyileşme testi açıklanmaktadır. Bu, in vitro olarak parakrin kanonik olmayan Wnt sinyal etkileşimlerinin sinyal gönderen ve sinyal alan bileşenlerinin anlaşılmasına yardımcı olur.

Video, zararlı ajanlara maruz kaldıktan sonra DNA hasarını tespit etmek için kuyruklu yıldız testini göstermektedir. Alkali koşullar altında, DNA gevşer ve denatüre olur ve elektroforez üzerine, hasar görmemiş ve hasar görmüş DNA, agaroz jeli içinde farklı şekilde göç ederek kuyruklu yıldız şeklinde bir yapı oluşturur. Yavaş göç eden hasarsız DNA, dairesel kuyruklu yıldız kafasını oluştururken, hızla göç eden hasarlı DNA parçaları, uzun kuyruklu yıldız kuyruğunu oluşturur.

Bu video, kemik iliğinden türetilmiş stromal hücreler tarafından amino asit alımını tahmin etmek için in vitro bir tekniği göstermektedir. Na+'ya bağımlı amino asit taşıyıcıları, hücrelerin içinde radyoaktif işaretli amino asitlerin alımına aracılık eder ve hücresel alım, radyoaktivite ölçülerek tahmin edilir.

Bu videoda, bir hücresel empedans testi aracılığıyla yapışık hücrelerin çoğalması da dahil olmak üzere hücresel olayların gerçek zamanlı izleme sürecini gösteriyoruz. Burada, yapışık hücreler, elektrotlar arasındaki akım akışını kısıtlayan ve empedansı artıran yalıtkan görevi görür.

Bu videoda, CIT50 ile viral enfeksiyonların çokluğu arasındaki korelasyonu tartışıyoruz. Virüsle enfekte olmuş hücreler sitopatik etkiler gösterir, bu da ölümlerine ve altın mikroelektrottan ayrılmalarına neden olur ve bu da empedansı azaltır.

Bu videoda, sitopatik etkilere neden olan virüslerin hayatta kalma kinetiğini incelemek için hücresel empedans tabanlı bir teknik açıklanmaktadır. Yöntem, tuzlu su ile önceden muamele edilmiş virüs ile enfekte olmuş yapışkan hücrelerin elektriksel empedansını ölçer.

Bu video, oküler mikrovasküler anjiyogenezi incelemek için bir ex vivo koroid filizlenme modelinin geliştirilmesini göstermektedir. Test, koroidal mikrovasküler filizlenmeyi teşvik eden belirli koşullar altında sklera ve retina pigment epiteline bağlı koroid dokusunu içeren fare gözü eksplantlarının kültürlenmesini içerir.

Bu videoda, bitki türevli bileşiklerin östrojenik aktivitesini belirlemek için hücre bazlı bir raportör testi açıklanmaktadır. Östrojen benzeri aktiviteye sahip bir bileşik, östrojen reseptörlerine bağlanmasını taklit eder ve aşağı akış raportör enzim gen transkripsiyonunu yönlendirir. Raportör enzim, bileşiğin östrojenik aktivitesini gösteren bir reaksiyonda biyolüminesans üretir.

Bu video, bir test proteinine özgü antikorlar üzerinde etiketlenmiş donör ve alıcı floroforların yardımıyla endojen protein fosforilasyonunu belirlemek için zamana bağlı Förster rezonans enerji transferini veya TR-FRET testini açıklar. Bu teknik, hücre lizatlarındaki test proteinlerinin fosforilasyonunu ölçmek için tasarlanmıştır.

Bu videoda, nörit büyümesini teşvik eden küçük moleküllü bileşiklerin hNPC'den türetilmiş nöronların canlılığı üzerindeki nörotoksisitesini değerlendirmek için lüminesans tabanlı bir yöntemi açıklıyoruz. Test, test bileşiği tedavisini takiben nörotoksisiteyi değerlendirmek için hücre canlılığının bir göstergesi olan hücre içi ATP seviyesini ölçer.

Bu video, kemik mineral yoğunluğunu (BMD) değerlendirmek için radyofrekans ekografik çoklu spektrometre (REMS) tekniğini göstermektedir. Hasta sırtüstü yatırılır ve femurda kırılmaya eğilimli bir bölge olan femur boynuna ultrason jeli uygulanır. Prob daha sonra BMD'den etkilenen bir hızda kemik dokusundan yansıyan ultrason dalgaları yayar. Prob, bu yansıyan dalgaları yakalayarak BMD'nin nicelleştirilmesini sağlar.

Bu video, menide spermatozoa yokluğu ile karakterize bir durum olan azospermili bir hastadan epididimal spermatozoanın perkütan aspirasyonunu göstermektedir. Prosedür, skrotal alanın dezenfekte edilmesini, epididimal sıvının özel bir kültür solüsyonu ile bir şırınga kullanılarak aspire edilmesini ve canlı spermatozoayı izole etmek için toplanan numunenin işlenmesini içerir. Hazırlanan spermler daha sonra ileri kısırlık tedavi prosedürlerinde kullanıma hazır hale gelir.

Kaynak:Elettra Leo1, Luiza H.D. Cardoso1, Sabine Schmitt1, Erich Gnaiger11Oroboros EnstrümanlarıBu video, canlı ve geçirgen memeli hücrelerinde mitokondriyal solunumu değerlendirmek için oksijen akışının nasıl kullanıldığını açıklamaktadır. Farklı solunum durumlarını karakterize etmek için digitonin, metabolik substratlar, ADP, bir ayırıcı ve bir inhibitörün sıralı kullanımını gösterir. Ortaya çıkan oksijen akışı profili, tanımlanmış koşullar altında mitokondriyal fonksiyonu ve enerji...

Bu videoda, bir serum örneğindeki çeşitli antikor izotiplerini aynı anda tespit etmek için farklı antijenlerle birleştirilmiş floresan manyetik boncuklar veya mikroküreler kullanan bir immünolojik test tekniği açıklanmaktadır. Test, bir enfeksiyon sırasında veya aşılama sonrası serokonversiyonun anlaşılmasında yardımcı olur.

Bu videoda, bir numuneden antijen gösteren virüs benzeri parçacıkları veya VLP'leri izole etmek için VLP yakalama testi adı verilen bir immünopresipitasyon testi gösteriyoruz. Antijen, manyetik boncuklara bağlı spesifik antikorlarla bağlanır ve daha sonra ayrılan ve daha fazla analiz için saklanan hareketsizleştirilmiş bir antijen-antikor kompleksi oluşturur.

Bu video, tek moleküllü bir aşağı çekme testi kullanarak protein fosforilasyonunun hassas bir miktar belirleme tekniğini göstermektedir. Polietilen glikol-biyotinin işlevselleştirilmesi ve etiketli antikorların kullanılması, fosforile tirozinin özgüllük ile saptanmasını arttırır.

Bu video, sıralı bir enzim kaskad kullanılarak substrat proteinlerinin SUMOylasyonu için in vitro yöntemi göstermektedir. Ayrıca, proteinin SUMOylated durumu, elektroforez ve immünoblotlama tekniği kullanılarak tanımlanır.

Bu videoda, SARS-CoV-2 nötralize edici antikorları tespit etmek için HiBit-RBD bioreporter sistem tabanlı testi gösteriyoruz. Bu sistem, RBD alanına kaynaşmış HiBiT içeren bir biyolüminesan raportör sistemi kullanarak viral RBD alanını hedefler.

Bu videoda, koyun serum örneklerinde alkalin fosfataz eksprese eden rekombinant adeno ilişkili virüs serotip 6 (rAAV6) vektörlerine karşı nötralize edici antikorların varlığını tespit etmek için in vitro kolorimetrik bir test gösteriyoruz. Test, çözünmeyen mor bir ürün oluşturmak için bir insan plasental alkalin fosfataz genini kodlayan AAV ile substratı arasındaki reaksiyonu kullanır.

Bu video, sırasıyla DNA hasarını ve çift sarmallı DNA kırılmalarını gösteren 8-OHdG ve γH2AX seviyelerini ölçerek zebra balığı embriyolarının kalplerinde PM2.5'in neden olduğu oksidatif hasarı tespit etmek için oldukça hassas bir immünofloresan tabanlı testi göstermektedir.

Bu video, rinal korteks-hipokampus organotipik dilimlerinde nöronal ölümü değerlendirme tekniğini göstermektedir. Nöronal ölüm, in vivo epilepsiye benzeyen gelişen epileptik nöbetler yoluyla meydana gelir ve propidyum iyodür ve immünofloresan kullanılarak ölü hücrelerin çift boyanması yoluyla tespit edilir.

Bu video, sandviç enzime bağlı immünosorbent testi veya ELISA tekniği ile kimyasal olarak konjuge antikor-antijen komplekslerinin tespitini göstermektedir. Yakalanan antikor, antikor-antijen konjugatının antijeninin spesifik epitopuna bağlanır ve daha sonra enzime bağlı bir ikincil antikor kullanılarak görselleştirilebilir.

Bu videoda, hedef proteinlerin primer kortikal nöronların nörit büyümesi üzerindeki etkinliğini belirlemek için EGFP bazlı bir immünofloresan testi gösteriyoruz. Birincil nöronlar bir floresan proteini, EGFP ve bir hedef protein ile transfekte edilir ve daha sonra hedef proteinin nörit büyümesi üzerindeki etkisini araştırmak için bir immünolojik test yapılır.

Bu videoda, farklı numunelerde hedef protein seviyelerinin kantitasyonu için elektrokemilüminesans immünolojik testini gösteriyoruz. Bu tahlil, elektrokimyasal reaksiyonda üretilen lüminesansa dayanmaktadır. Yayılan ışığın yoğunluğu, numunedeki hedef proteinin miktarı ile orantılıdır.

Video, kitle sitometrisini görüntülemek için bir doku örneğinin hazırlanmasını açıklar. Doku ilk önce antijen epitoplarını maskelemek, hücrelere nüfuz etmek ve spesifik olmayan antikor bağlanma bölgelerini bloke etmek için işlenir. Daha sonra doku, metal konjuge bir antikor kokteyli ve bir nükleer leke ile inkübe edilir. Son olarak, tedavi edilen doku örneği bir optik tarayıcı kullanılarak görüntülenir.

Bu video, trombosit sayımı taraması, kanın toplanması ve santrifüjlenmesi ve trombositlerin izole edilmesi yoluyla yüksek kaliteli Trombositten Zengin Plazmanın (PRP) hazırlanmasını göstermektedir. Bu PRP, doku yenilenmesi ve iyileşmesi için terapötik uygulamalarda kullanılır.