Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
1K görüntülenme
⸱
8 Temmuz 2025
Kaynak: Lazaro-Pena, M. I. et al. Caenorhabditis elegans'ta Dokuya Özgü Proteostatik Düşüşün Ölçülmesi.J. Vis. Uzm. (2021)
Bu video, yaşlanmaya bağlı proteostaz düşüşünü belirlemek için in vivo görüntülemeye dayalı bir testi göstermektedir. Test, yaşa bağlı poliglutamin agregasyonunu ve proteotoksisitenin indüksiyonunu ölçmek için vücut duvarı kaslarında poliglutamin YFP-füzyon proteinini eksprese eden Caenorhabditis elegans'ı kullanır ve felce yol açar.
1. Poliglutamin eksprese eden hayvanlar kullanılarak kas dokusundaki proteostazdaki düşüşün ölçülmesi
NOT: Kas hücrelerinde proteostaz düşüşünü tanımlamak için iki yöntem kullanılabilir: yaşlanma sırasında protein agregatlarının oluşumunu görüntüleme (1.1) ve bu agregatların felç başlangıcına kadar yaşla birlikte neden olduğu proteotoksisitenin ölçülmesi (1.2).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Şekil 1: C. elegans kası içindeki polyQ::YFP ekspresyonu, yaşlanma sırasında ilerleyici odak birikimi ve felç ile sonuçlanır. (A) C. elegans unc-54p::Q35::YFP ekspresyonu yetişkinliğin 1. ve 4. günlerinde (sırasıyla üst ve alt panel). Oklar temsili odakları gösterir. (B) Yetişkinliğin ilk 4 günü boyunca floresan odaklarının ölçülmesi. Odakla.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Cam mikroskop slaytları | VWR (VWR) | 160004-422 | |
| Sodyum Azide, CAS #26628-22-8 | Sigma-Aldrich | S2002 Serisi | |
| AxioVision v4.8.2.0 yazılımına sahip Zeiss Axio Imager M2m mikroskobu | Zeiss | ||
| Zeiss StemiSV11 M2 Bio Dörtlü mikroskop | Zeiss |
