Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Epileptiform aktiviteyi kaydetmek için elektroensefalografi tabanlı kayıt tekniği

1.1K görüntülenme

⸱

8 Temmuz 2025

Bu makalede

Özet

Kaynak: Carvalho, M. et al., Rhinal Korteks-Hipokampus Organotipik Dilim Kültürlerinde Bir Epileptogenez Modeli. J. Vis. Uzm. (2021).

Bu videoda, rhinal korteks-hipokampus organotipik dilimlerinin epileptiform aktivitesinin elektrofizyoloji veya EEG kurulumu kullanılarak ex vivo olarak kaydedilmesi tekniği açıklanmaktadır. Bu, epileptogenezin dinamiklerini ve ilerlemesini incelemeye ve epilepsiyi tedavi etmek için potansiyel terapötik hedefleri taramaya yardımcı olur.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Rinal korteks-hipokampus dilimlerinin hazırlanması

NOT: Rinal korteks-hipokampus dilimlerinin hazırlanmasında P6-7 Sprague-Dawley sıçanları kullanılır.

  1. Kültür kurulumu ve besiyeri hazırlama
    1. Kültürden bir gün önce gerekli besiyerini hazırlayın ve 4 °C'ye yerleştirin.
    2. Diseksiyon ortamını hazırlayın: Gey'in Dengeli Tuz Çözeltisinde (GBSS) 25 mM glikoz.
    3. Kültür ortamını hazırlayın:% 50 Opti-MEM,% 25 HBSS,% 25....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1: Rinal korteks-hipokampus organotipik dilimlerinin hazırlanması için ayrıntılı prosedür. (A) Beyni kafadan çıkarın ve sırt yüzeyi yukarı bakacak şekilde buz gibi GBSS'ye yerleştirin. (B) Forsepsleri beyinciklere yerleştirin. Beyni orta hattan açın ve hipokampus üzerindeki fazla dokuyu çıkarın. (C) Oklarla gösterildiği gibi hipokampusun altında.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Yapay beyin omurilik sıvısı (aCSF)Ev yapımı
B-27™ Takviyesi (50X), serumsuzThermo Fisher Bilimsel17504-044
Neşter sapı için bıçaklarGüzel Bilim Araçları10011-00
Sığır Serum Albümini (BSA)NZYTech (İngilizceMB04602Primer antikorları seyreltmek için %5 BSA kullanılır. 10 mL PBS'ye 0,5 g BSA ekleyin.
Beyin/Doku Dilim Odası SistemiWarner Enstrümanları
Hücre kültürü ekleri, 30 mm, hidrofilik PTFE Kırlangıç SASPICM03050
Konvansiyonel kuluçka makinesi Termo Bilimsel HeraeusBB15, Fonksiyon Hattı37 °C ve %5 CO2'ye ayarlayın
Gey'in Dengeli Tuz Çözeltisi (GBSS) Biyolojik Endüstriler01-919-1A
Cam Elektrotlar Bilim ÜrünleriGB150F-10Yuvarlak ipuçları ev yapımı
Arayüz odası Warner EnstrümanlarıBSC-HT Haas Üst
İris Spatula KavisliGüzel Bilim Araçları 10092-12
Lens Temizleme KağıdıSERTLEŞME
L-Glutamin çözeltisi 200 mM (Q)Thermo Fisher Bilimsel25030-024
Doku DoğrayıcıMickle Laboratuvar Mühendislik A.Ş. LTD.MTC/2350 μm'ye ayarlayın
) Serisi Serisi

Daha fazla makale keşfet

Elektroensefalografi KaydıOrganotipik Kesit KültürleriElektrofizyolojik DüzenekRinal Korteks HipokampusYapay Beyin Omurilik SıvısıSürekli Edinme ProtokolüArayüz Odacığı DüzeneneğiElektrogram Analiziİktal Olay Tespiti