Ozmotik Kaçınma Testi Kullanarak Transgenik Solucanlarda Kemokaçınma Davranışını İnceleyin

Abstract

Kaynak: Wang, Q. ve diğerleri, Z. Caenorhabditis elegans, Poliglutamin Aracılı Nörotoksisiteye Karşı Biyoaktif Bileşiklerin Keşfedilmesi İçin Bir Model Sistem Olarak. J. Vis. Uzm. (2021).

Bu videoda, bir transgenik solucan modelinde kemokaçınma davranışını incelemek için bir ozmotik kaçınma testi açıklanmaktadır. Kaçınma davranışı, yüksek ozmotik bir bariyer ve kemoatraktan varlığında bir plakada test edilir. Fonksiyonel nöron kaybı olan solucanlar kemoatraktan tarafından çekilir, yüksek ozmotik bariyeri geçer ve anestezik çözelti nedeniyle tuzak bölgesinde felç olur.

Protocol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

NOT: Bu protokolde kullanılan çözeltilerin tarifleri için Tablo 1'e bakın.

>1. Caenorhabditis elegans testi için malzemelerin hazırlanması

1. C. elegans suşlarının bakımı
   1. C. elegans (AM141 ve HA759) ve Escherichia coli (OP50 ve NA22) suşlarını elde edin (Malzeme Tablosuna bakınız).
   2. Nematodları, AM141 için 20 ° C'de veya HA759 için 15 ° ....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
C. elegans suşları
HA759 rtIs11 [osm-10p::GFP + osm-10p::HtnQ150 + dpy-20(+)]	Caenorhabditis Genetik Merkezi (CGC)		https://cgc.umn.edu/strain/HA759
E. coli suşları
NA22	Caenorhabditis Genetik Merkezi (CGC)		https://cgc.umn.edu/strain/NA22
OP50	Caenorhabditis Genetik Merkezi (CGC)		https://cgc.umn.edu/strain/OP50
reaktif
Ağar	Şangay EKEAR Biyo-Teknoloji Co., Ltd.	EQ1001-500G	https://www.ekear.com
Bütandion	Sinopharm Kimyasal Reaktif Co., Ltd.	80042427	https://www.reagent.com.cn/goodsDetail/d027c00e64c9404d9aa41391fbb 595d0
kolesterol	Sigma-Aldrich	C8667	https://www.sigmaaldrich.cn/CN/zh/product/sigma/c8667?context=product
Gliserol	Aladdin Co., Ltd.	G116203	https://www.aladdin-e.com/zh_cn/g116203.html
Pepton	Guangdong HuanKai Mikrobiyal Bilim ve Teknoloji Co., Ltd.	050170B	https://www.huankai.com/show/21074.html
Sodyum azid	Sinopharm Kimyasal Reaktif Co., Ltd.	80115560	https://www.reagent.com.cn/goodsDetail/5e981aa807664e26af 551E96FF5F07CD
Sodyum hidroksit	Sinopharm Kimyasal Reaktif Co., Ltd.	10019718	https://www.reagent.com.cn/goodsDetail/450dfdb1132a4d8a817 D3d8c68ec25e6
Sodyum hipoklorit çözeltisi	Guangzhou Kimyasal Reaktif Fabrikası	7681-52-9	http://www.chemicalreagent.com/product/DetailProduct.aspx?id=125
Tripton	Oksoit Ltd. Şti.	LP0042B	https://www.thermofisher.cn/order/catalog/product/LP0042B#/LP0042B
Maya özü	Oksoit Ltd. Şti.	LP0021B	https://www.thermofisher.cn/order/catalog/product/LP0021B#/LP0021B
ekipman
48 oyuklu hücre kültürü plakası	Nest Biyoteknoloji Co., Ltd.	748001	https://www.cell-nest.com/page94?_l=en&product_id=85
90 mm Petri kabı	Sangon Biyoteknoloji (Şangay) Co., Ltd.	F611003	https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F611003
otoklav	Panasonic Belediyesi	MLS-3781L-Bilgisayar
Diseksiyon mikroskobu	ChongQing Optik Co., Ltd.	ZSA0745	http://www.coicuop.com/plus/view.php?aid=64
Mikrosantrifüj	Gen Şirketi	GENESPEED X1 IŞLEMCI DESTEĞI	https://www.genecompany.com/index.php/Home/Goods/goodsdetails/gid/189.html
Parafilm M	Sigma-Aldrich	P7793-1EA	https://www.sigmaaldrich.cn/CN/en/product/sigma/p7793?context=product
Shaker	Zhicheng A.Ş.	ZWY-2102C	http://www.zhicheng.net/Product/0865291356.html