Antijen-antikor etkileşimlerini tek molekül düzeyinde incelemek için kütle fotometrisi

Özet

Kaynak: Wu, D. et. al., Kütle Fotometrisi ile Antikor-Antijen Afinitesinin Hızlı Belirlenmesi. J. Vis. Uzm.(2021)

Bu videoda, bir akış odasındaki antijen-antikor etkileşimlerini incelemek için kütle fotometrisinin kullanımını gösteriyoruz. Odaklanmış ışık, moleküllerin kütlesine bağlı olarak farklı şekilde dağılır. Bir dedektör, saçılan ışığı toplar ve moleküler kütlelerle ilişkili olan çeşitli yoğunluklarda noktalar olarak girişim modelini oluşturur.

Protokol

1. Akış odalarını hazırlayın

1. Cam lamellerin temizlenmesi
   1. Damıtılmış su, etanol ve izopropanol içeren yıkama şişelerini kullanarak 24 mm x 50 mm'lik lamelleri şu sırayla durulayın: su, etanol, su, izopropanol, su. Lamelleri temiz bir nitrojen akışı ile kurulayın. Lamelleri yukarıdan aşağıya doğru, alt köşeyi yumuşak uçlu forseps ile tutarak durulamak önemlidir. Forsepsten kontaminasyonun aktarılmasını önlemek için lamel aynı yönde kurutun (Şekil 1A).
   2. Benzer şekilde, 24 mm x 24 mm lamelleri damıtılmış su, etanol ve damıtılmış su ile durulayın. Lamelleri temiz bir nitrojen akışı ile kurulayın.
   3. Lamelin çalışma....

Sonuçlar

Şekil 1: MP akış odası hazırlığı ve yüklemesi. (A) Temizleme prosedürü için lamel tutma pozisyonu. (B) 24 x 24 mm lamel (orta katman) ve çift taraflı bandın (üst katman) alüminyum folyo yüzeyinde hizalanması (alt katman, gösterilmemiştir). Mavi kesikli çizgiler, kesilen çizgilerin konumunu gösterir. (C) İki numune kanalı ile monte edilmiş akış odasını.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
MP'yi edinin	Refeyn		MP veri toplama yazılımı
Anti-insan trombin	Hematolojik Teknolojiler	AHT-5020	RRID: AB_2864302
Pamuk uçlu aplikatörler	Thorlab'lar	CTA10	Lens temizliği için pamuklu optik çubuklar
Lameller 24x24 mm	Küre Bilimsel	1405-10
Lameller 24x50 mm	Balıkçı Bilimsel	12-544-EP
KeşfetMP	Refeyn		MP veri işleme yazılımı
Forseps	Elektron Mikroskobu Bilimleri	78080-CF	Lamellerin taşınması için yumuşak uçlu forseps
İnsan α-trombin	Hematolojik Teknolojiler	HCT-0020
Daldırma yağı	Thorlab'lar	KÖPÜRTME-30
İzopropanol	Alfa Aesar	36644
Microsoft Excel	Microsoft Bilişim Sistemleri		elektronik tablo
Bir MP	Refeyn		Kütle Fotometrisi cihazı
köken	Köken Laboratuvarı		Bilimsel grafik yazılımı
Pbs	Corning	46-013-CM	10x hisse senedi
Şırınga filtresi	Kırlangıç	SLGSR33SS	Tampon ve örnek filtreleme

Serisi Serisi Serisi Serisi Teknolojisi