Bir Murin Modelinden Kasık Drenaj Lenf Nodunun Çıkarılması

Özet

Kaynak: Rezende, R. M. ve diğerleri, Ex-Vivo Konfokal Mikroskopi Kullanarak Lenf Nodu Yapısını ve Hücresel Lokalizasyonu Görselleştirme.J. Vis. Uzm.(2019)

Bu video, bir fare modelinden kasık boşaltma lenf nodunun cerrahi izolasyon prosedürünü göstermektedir. Karın bölgesinin kesisi, cerrahi olarak alınan kasık lenf bezine erişim sağlar. Hasat edilen yarı saydam kasık lenf nodu immünolojik çalışmalar için kullanılabilir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Deney için kullanılan fareler

1. B6 arka planında 8 haftalık erkek ve dişi fareler kullanın.

2. Kasık boşaltan lenf düğümünü çıkarmak için cerrahi prosedür

1. CO kullanarak farelere ötenazi yapın₂ boğulma ve ardından servikal çıkık.
2. Akrilik sahnedeki fareleri yapışkan bantla hareketsiz hale getirin ve insizyon çevresinde kürk birikmesini önlemek için karın derisine pamuklu çubukla mineral yağ uygulayın (Şekil 1B). Kürk çıkarma gerekli değildir.
3. Karın içinde pubisten ksifoid sürece kadar mikrocerrahi kavisli makas (11,5 cm) ve mikrocerrahi kavisli forseps (12,5 cm) kullanarak orta hat insizyonu yapın (Şekil 1C).
4. Abdominal kas sistemini deriden ayırın (Şekil 1D).
5. İlgilenilen tarafta cilt flepleri oluşturmak için dikey insizyon hattının üstünde ve altında yatay cilt insizyonları yapın (antikor karışımı enjeksiyonunun tarafına göre) ve lenf düğümünü görselleştirmek için cildi flep yapın (Şekil 1E).
6. Cilt kanadını akrilik plaka üzerine bantlayın (Şekil 1F).
7. Mikrocerrahi kavisli forseps kullanarak inguinal drenaj lenf nodunu çıkarın (Şekil 1F). Lenf düğümleri cilt altında yarı saydam, genellikle bilobüler küreler olarak görünecektir.

Sonuçlar

Şekil 1: Kasık lenf nodu hazırlığı.
(A) FACS antikor ana karışımının iç uyluğa deri altı enjeksiyonu. (B) Enjeksiyondan 3 saat sonra, fareyi ötenazi yapın, fareyi yapışkan bantlı akrilik bir plaka üzerinde hareketsiz hale getirin ve insizyon çevresinde kürk birikmesini önlemek için karın derisine mineral yağ uygulayın. (C) Karın bölgesinde pubisten ksifoid sürecine kadar orta ha...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Mikrocerrahi kavisli forseps	WEP Cerrahi Aletler	ısmarlama	12,5 cm
Mikrocerrahi kavisli makas	WEP Cerrahi Aletler	ısmarlama	11,5 cm