Method Article

İnsan Nöronal Kök Hücrelerinin Gözenekli İskele Kullanılarak 3D Kültüre Ayırt Edilmesi

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Stevanato, L. et al., İnsan Nöral Kök Hücre Hattının Üç Boyutlu Kültürlerde Farklılaşması, MikroRNA ve Varsayılan Hedef Genlerin Analizi. J. Vis. Uzm. (2015)

Bu video, üç boyutlu bir yapı iskelesi içinde insan nöral kök hücrelerinin gelişimini ve farklılaşmasını göstermektedir. İskele üzerindeki bir laminin kaplama, hücre bağlanmasını teşvik ederken, büyüme faktörü içermeyen bir nöral ortam, süreçlerini gözenekli bir mimari içinde birden çok yöne uzatan ve üç boyutlu bir kültür oluşturan nöral progenitör hücrelere hücre farklılaşmasını indükler

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Üç Boyutlu (3B) Kültürde HNSC farklılaşması

>NOT: İnsan nöral kök hücrelerini (hNSC'ler) önceki bir yayında açıklanan etik olarak onaylanmış bir dokudan izole edin ve türetin. Lütfen bu prosedürü takip ederken etik ve kurumsal yönergeleri takip edin.

  1. 12 oyuklu Plaka Kullanarak 3D Kültür
    1. Prosedür boyunca aseptik bir teknik kullanın. Biyolojik bir güvenlik kabininde, sulama için su (WFIr) kullanılarak hazırlanan 2 ml/kuyu %70 etanol ekleyerek iskeleleri yeniden hidratlayın. % 70 etanolü her kuyunun duvarından aşağı dağıtarak iskelelere dokunmaktan kaçının.
    2. %70 etanolü dikk....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
DMEM: F12Canlandırıcı21331-020RMM ortam hazırlığı için
İnsan Albümin Çözeltisi Baxter sağlık hizmetleri sınırlı 1501052%0,03'lük bir nihai konsantrasyonda kullanılan RMM ortamı için
Transferrin, İnsan rekombinantıSigmaT81585 μg/ml'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılan RMM ortamı için
Putresin DiHCl SigmaP5780 Serisi16,2 μg/ml nihai konsantrasyonda kullanılan RMM ortamı için
İnsülin, İnsan rekombinantı SigmaI92785 μg/ml'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılan RMM ortamı için
Progesteron SigmaP6149 Serisi60 ng/ml'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılan RMM ortamı için
L-Glutamin Canlandırıcı25030-242 mM'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılan RMM ortamı için
Sodyum Selenit SigmaS9133 Serisi40 ng/ml'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılan RMM ortamı için
bFGF (İngilizce) Peprotech teknolojisiAF-100-15RMM ortamına eklenmek üzere, 10 ng / ml'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılır
EGF (Türkçe) Peprotech teknolojisiAF-100-188RMM ortamına eklenecek, 20 ng / ml'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılacak
4-OHTSigmaH7904RMM ortamına eklenecek, 100 nM'lik bir nihai konsantrasyonda kullanılacak
LamininAMS Biyoteknoloji3400-010-10
Sulama için suBaxter SağlıkUKF7114
Alvetex 12 kuyulu plaka Reinnervate LtdAVP002
etanol Merck 1.00986.1000
Serisi Serisi arası Serisi Serisi Serisi Serisi

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Human Neural Stem Cells3D CulturePorous ScaffoldLaminin CoatingGrowth Factor Free MediumNeural Progenitor CellsCell MigrationMultidirectional GrowthScaffold RehydrationMedium Replacement

Related Articles