Manyetik Platformlarda Manyetik Nano Parçacık Yüklü Nöronların Büyümesi ve Farklılaşması

Özet

Kaynak: Indech, G., et al. Birbirine Bağlı Nöronların Mikron Ölçekli Organizasyonu için Manyetik Platformların İmalatı. J. Vis. Exp. (2021).

Bu video, floresan manyetik nanopartiküllerin (MNP'ler) endositoz yoluyla nöronal hücreler tarafından alımını göstermektedir. Bu MNP yüklü nöronların manyetik olarak desenli substrat üzerinde büyütülmesi, hücrelerin bağlanmasını sağlar. Ortam içeren bir büyüme faktörünün eklenmesi, nöron uzantılarının büyümesine yardımcı olurken, substratın manyetik alanı, uzantının yönelimini yönlendirir.

Protokol

1. Hücresel manyetik nanoparçacık (MNP) alımı

1. Roswell Park Medical Institute (RPMI) ortamına% 10 at serumu (HS),% 5 fetal sığır serumu (FBS),% 1 L-glutamin,% 1 penisilin / streptomisin ve% 0.2 amfoterisin ekleyerek PC12 hücre kültürü için temel büyüme ortamını hazırlayın ve 0.22 μm naylon filtre kullanarak filtreleyin.
2. PC12 farklılaşma ortamını hazırlamak için RPMI ortamına %1 at serumu (HS), %1 L-glutamin, %1 penisilin / streptomisin ve %0,2 amfoterisin ekleyin ve 0,22 μm naylon filtre kullanarak süzün.
3. 10 mL bazik büyüme ortamı ile işlenmemiş bir kültür şişesinde hücreleri büyütün; her 2-3 günde bir şişeye 10 mL bazik....

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
6 oyuklu hücre kültürü plakası	doğan	353846
96 oyuklu hücre kültürü plakası	SPL yaşam bilimleri	30096
Amfoterisin B çözeltisi	Biyolojik Endüstriler	03-028-1B
Sığır serum albümini (BSA)	Biyolojik Endüstriler	03-010-1B
Hücre ve Doku kültür şişesi	Biyofil	TCF002250	75,0 cm^2 250 mL Havalandırma kapağı, İşlenmemiş
Hücre kültürü kabı	Greiner Bio-Bir	627-160	35 Milimetre
Santrifüj tüpü	Biyofil	CFT021500	50 mL
Kollajen tip I	Corning A.Ş.	354236	Sıçan Kuyruğu, konsantrasyon aralığı 3-4 mg / mL
Tek kullanımlık iğne	KDL (Türkçe)		23 gr
Tek kullanımlık şırınga	Medispo	1160227640	10 mL
Donör at serumu	Biyolojik Endüstriler	04-124-1A
Etanol %70	ROMİK LTD. ŞTİ.	19-009102-80
Etanol mutlak (Susuz)	Biyolab-kimyasallar	52505
Fetal sığır serumu (FBS)	Biyolojik Endüstriler	04-127-1A
Taze murin β-NGF	Peprotech teknolojisi	450-34
GMW C-çerçeve elektromıknatısı.	Buckley sistemleri LTD		3470, 45 mm
L-glutamin	Biyolojik Endüstriler	03-020-1B
PBS 10 kat	HyLabs (Türkçe	BP507/1LD
PC12 hücre hattı	ATCC (Uzay Servisi)	CRL-1721
Penisilin-streptomisin nistatin çözeltisi	Biyolojik Endüstriler	03-032-1B
L-glutamin ile RPMI 1640	Biyolojik Endüstriler	01-100-1A

Belediyesi ) Serisi