$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Kalp kaldırılması ve Langendorff perfüzyon
Koyun 35-40 Kg ağırlığında, 4-6 mg / kg propofol ve 60-100 mg / Kg pentobarbital sodyum ile anestezi. Kalpler torakotomi ile kaldırıldı ve (% 95 O2,% 5 CO2) 240-270 ml / dk, pH 7.4 ve 35,5-37,5 ° C sabit bir akış hızında Tyrode çözümü oksijenli dolaşan bir Langendorff-perfüzyon sistemine bağlı Tyrode kompozisyonu (mM): NaCl 130, KCl 4.0, MgCl2 1, CaCl2 1.8, NaHCO3 24, NaH2PO4 1.2, Glikoz 5.6 ve Albumin 0.04 g / L Blebbistatin 10 mcM (Enzo Yaşam Bilimleri Uluslararası, INC Plymouth Toplantı, PA, USA), kasılma gücü azaltmak için kullanılır.
2. Langendorff perfüze koyun kalbinde Streç bağlı atriyal fibrilasyon
Izole perfüze koroner kalp kulakçıklar hem eşitledi intrakaviter basınç sağlamak için trans-bir atriyal septal ponksiyon uğrar. Ve açık uçlu bir çıkış kanül; Tüm ven orifisleri sonra kanüle bir dijital sensör (BIOPAC Systems, Inc, Santa Barbara, CA, USA BIOPAC Sistemleri transduser-TSD104A) bağlı inferior vena kava, dışında, mühürlenmiş. kulakçıklar üzerinde yüksekliği intra-atriyal basınç kontrol eder. Basınç, sonra 6 cm H 2 O hacmi atriyal volüm göreceli bir ~% 30 artış neden 12 cm H 2 O, yükselmiştir Basınç deney boyunca sabit tutulur. Damarlar sızdırmazlık önce tetrapolar elektrod kateterler (Torq, Medtronic Inc / Minneapolis / MN / ABD) BIOPAC Sistemleri amplifikatör kullanarak iki distal elektrotlar (örnekleme oranı, 1.0 kHz) bipolar sinyallerini kaydetmek için pulmoner venlerin her yerleştirilir (DA100C; BIOPAC Systems, Inc, Santa Barbara, CA, USA). Sol atriyal apendiks (SAA) ve sağ atriyal apendiks üst çatı İki ek custum yapılan bipolar elektrotlar yerleştirilir.
3. Optik haritalama
- Sol atriyal apendiks epikardiyal haritalama. 5 ila 10 ml Di-4-ANEPPS (10 mg / ml) (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, ABD) ve 10 dakika yükleme süresi bir bolus enjeksiyon, lazer uyarım üzerine elde edilen voltaj duyarlı floresan ihtiyaç vardır (532 nm) epikardiyal yüzeyi. Yayılan floresan sonra (Bkz. şematik gösterimi 600 nm uzun geçiş filtresi yoluyla iletilir ve LittleJoe CCD video kamera (80x80 piksel, Analitik Systems, Inc Decatur, GA, ABD SciMeasure) yansıtılıyor ve saniyede 800 kare hızında elde edilen Şekil 1A). Beş saniyelik bir film AF sırasında 2 dakika aralıklarla elde edilir. Eşlenen epikardiyal yüzey alanı ~ 14 cm 2.
- Bozulmamış kalp PLA Endokardial optik haritalama. Ikinci LittleJoe CCD kamera (80x80 piksel) epikardiyal kamera ile senkronize edilir. 90-derecelik bir görüş alanına sahip 10 mm çap çift kanallı sert borescope (Everest VIT, Inc. Flanders, NJ, ABD), mitral kapak genelinde, sol ventrikül ön duvarı boyunca ve endokardiyal yüzey üzerinde duruldu PLA. PLA optik eşlenen alan dört pulmoner venlerin ve atriyal septo-pulmoner paket (Şekil 1A, B) görselleştirmek sağlar ~ 4 cm 2,. Borescope c, ısmarlama bir mercek adaptör ile CCD kamera monte edilmiştir. Lazer 532 nm ışık, sonra da bir sıvı (çekirdek 0.2) ışık kılavuzu ile borescope ikaz kanala teslim edilir.
4. Atriyal fibrilasyon protokolü
Sürekli atriyal gerilimin altında AF SAA üstünde bulunan bir pacing elektrod tarafından burst pacing (12 Hz, 5 ms bakliyat, 2x diyastolik eşiği) ile meydana gelir. AF, 50 dakika ve 5 saniye optik filmleri iki dakika aralıklarla satın devam etmek için izin verilir. Bipolar kayıtları sürekli olarak toplanır. Optik film Toplama bipolar kayıtları 5 sn segmentleri aynı anda satın alma tetikler.
5. Frekans analizi
Frekans analizi, sol ve sağ atrium arasındaki frekans gradyanlar ile birlikte, AF sırasında aktivasyon oranı yüksek olan bölgelerin belirlenmesi sağlar. Hakim frekans (DF) haritaları, hızlı Fourier dönüşümü algoritması (FFT) her pikselin kaydedildi zaman serisi floresan sinyal uygulandıktan sonra her bir optik film elde edilir. 7 FFT de 5 saniye bipolar sinyaller (Yüksek geçişli filtrelenmiş uygulanır 3 Hz ve düşük geçmek optik filmleri ile senkronize) 35 Hz süzülmüş.
6. Atriyal fibrilasyon dinamikleri
- Faz haritaların üretilmesi. AF dinamikleri Analizi Hilbert dönüşümü ile üretilen faz film yararlanır 14 Kısaca her spektral bileşen ilgili çeyrek döngüsü tarafından kaydırılır, orijinal zaman serisi sinyallerine dönüştürerek, her piksel kaydedilen aksiyon potansiyeli anlık faz belirlenir. Afterwar. 15ds, sinyal anlık faz, orijinal sinyal dönüştürülmüş sinyal oranı ters teğet elde edilir. Ve π radyan π arasında değerler ile faz açısı, sürekli mekansal faz değişimi eksitasyon, repolarizasyon ve iyileşme sürecini yansıtan bir faz harita oluşturmak için sürekli bir renk düzeni olarak temsil edilmektedir. 14
- Aktivasyon paternlerinin Karakterizasyonu. Aktivasyon paternlerinin çeşitli sınıflar, aşağıdakiler de dahil olmak üzere faz filmleri (Şekil 2) kullanılarak tespit edilebilir:
- A rotor, birden fazla rotasyon (Şekil 2A) süren bir tekillik noktasında birleşen tüm aşamaları varlığı ile tanımlanır.
- Bir atılım wavefront görüş alanı görünen ve bir hedef gibi desen dışa (Şekil 2B) propaganda olarak tanımlanır.
- Spatiotemporally düzenlenen periyodik dalgalar, görüş alanı içinde aynı yerde, benzer yönde ve inter-dalga aralığı (Şekil 2C) ile ortaya çıkan dört sıralı periyodik dalgalar asgari olarak tanımlanır.
Daha fazla kantitasyonu, bu belirli bir bölgede elde edilen en yaygın aktivasyon deseni ile en yüksek frekans mekansal korelasyon sağlar. Yüksek frekans akut AF sırasında nerede yaygın bölgeyi temsil eden bu yana ikincisi, PLA endokardiyal yüzey haritalama önemli rol vurgulamaktadır.
7. Temsilcisi Sonuçlar:
PLA SAA ve RAA Hakim frekans (DF) gradyanlar akut streç indüklenen AF sırasında mevcut. Yüksek DF bölge ya veya pulmoner venlerin veya yere PLA birinin yakınında lokalize 11 A temsilcisi AF bölüm (sağ inferior pulmoner ven) en yüksek DF PLA lokalize olduğu, Şekil 3'te gösterildiği gibi. Sonuçları, paroksismal insan AF ablatif prosedürler sırasında gözlenen sağ DF gradyanlar sol tutarlı PLA sürüş AF yüksek frekans kaynaklarının varlığı destek 16
Aktivasyon aşaması harita film kullanarak desen Niceleme en yüksek sayıda rotor PLA ve PLA ve SAA arasında birleşme olduğunu gösterir. 8 Bazen rotasyon merkezi (Tekillik noktası) uzun ömürlü rotorlar tespit etmek mümkün. yüksek frekans alanı ile lokalize 10 atriyal doku, üç boyutlu yapısını temsil ettiğinden dolayı, PLA eşlenen endokardiyal yüzeyinde rotorlar tanımlayan bu rotorlar dönme merkezi (filament) sonunda haritalama alanının yüzeyine dik olduğunu göstermektedir . Şekil 4 PLA ve SAA (9 ve 6.4 Hz sırasıyla) arasında bir frekans farkı ile ilişkilidir SAA, doğru eş zamanlı fibrillatory iletimi ile PLA endokard kaydedilen böyle bir rotor gösterir. Rotor sayısı, bu model aritmi korumak için PLA reentry önemli bir rol anlaşılacağı SAA daha PLA sürekli yüksek.
Genel olarak, sonuçlar, istikrarlı ve hızlı sol atrium rotorlar akut uzanan bağlı AF ve yayılan dalgalar sürebileceği teorisini desteklemek fibrillatory iletim olarak tezahür karmaşık, mekansal olarak dağınık iletim blok desen onlar başkanı olarak sağ atriyuma doğru geçmesi ve tedricen baskın azalan frekans.
Şekil 1 deneysel şematik gösterimi kurdu. A: Bir katı borescope, sol ventrikül ve mitral kapak orifis ön duvar ile tanıştırdı ve posterior sol atrium (PLA) endokardiyal yüzey üzerinde duruldu. Bir CCD kamera borescope akuple ve lazer aydınlatma borescope inferior kısmına bağlı bir lazer sıvı rehber aracılığıyla sağlanır. Epikardiyal haritalama SAA yapılır. Sağ atrium ve sol atrium çatı bipolar elektrotlar yerleştirilir. Pulmoner venlerin Ek bipolar sinyaller elde edilir. B: gösterim amaçlı lateral duvar açılış sonrası sol atriyum Yanal. Borescope ucu PLA endokardiyal yüzeyi aydınlatır. Bir bipolar elektrot sol atrium çatı yer alır. SAA: sol atriyal apendiks. LV: Sol ventrikül. RA: sağ atrium. RV: sağ ventrikül.
Şekil 2 faz film nesil sonra tanımlanan aktivasyon Farklı desen. A: Sol atriyal apendiks (SAA) Sıralı snap shot (Tekillik noktası) dönme merkezi etrafında bir rotor dönme göstermektedir. Soldan sağa, bir tam dönüş tamamlanmış olur. B: SAA örnek bir atılım aktivasyon paterni. Dalga yukarı görünürgörünüm ve dışa yayar alanının sağ köşesinde başına. C: SAA PLA doğru bölgeye gelen dört spatiotemporally düzenlenen periyodik dalgalar (sırasıyla% 0, 182, 352 ve 512 ms). İzokronlar 10 ms aralıklarla çizilir. Alt, aksiyon potansiyeli farklı aşamaları için temel renk kodlu.
Şekil 3 Langendorff izole perfüze koyun kalbinde akut streç indüklenen AF sırasında yüksek frekans aktivitesi ile bölgelerin belirlenmesi. A: sol atriyal apendiks (SAA), sağ atriyal apendiks (RAA) ve posterior sol atrium (PLA) anatomik görünümü. PLA görüntü dört pulmoner ven (PV) ile eşlenen bölge endoskopik görünümü. B: SAA ve PLA DF optik haritalama ile elde edilen haritalar. Bipolar electrograms RAA Frekans değeri elde edildi. Yüksek frekans bölge PLA yer almaktadır. C:, maksimum DF doğru sayfa gösterimi PLA bölgede 12.4 Hz tekabül eden Temsilcisi güç spektrumu,. LSPV: sol superior pulmoner ven. LIPV: sol inferior pulmoner ven. RSPV: sağ superior pulmoner ven. RIPV: sağ inferior pulmoner ven. Çoğaltılamaz referans 11 (David Filgueiras Rama & José Jalife. Atriyal Fibrilasyon altında yatan mekanizmaları. Temel Bilimler Klinik elektrofizyolog, Cilt 3 (ed. Charles Antzelevitch) 141-156 (Saunders, 2011) .
Şekil 4 Simultaneousphase haritaları (A, B) ve posterior (PLA), sol atriyum ve sol atriyal apendiks (SAA) baskın frekans haritaları (C). A: bir rotor ve onun tekillik noktası sürüklenen gösteren PLA Sıralı snap shot. B: SAA Eşzamanlı faz snap shot. Aktivasyon paternleri fibrillatory iletim yayılma dalgaları ile uyumlu göstermektedir. Singularity noktaları da fibrillatory iletim bölgesi wavebreaks ile korelasyon mevcuttur. PLA ve SAA eş zamanlı baskın frekans haritaları: C (video 4 de bakınız). Hızlı bölge bir rotor faz harita analizi varlığı ile ilişkilidir PLA (9 Hz) yer almaktadır. SAA en yüksek frekans fibrillatory iletimi ile ilişkilidir 6 Hz. Panel C Sağ tarafta, tek bir pikselin optik aktivasyonlar PLA ve SAA gösterilmiştir.