| Hücre Hatları | | | |
| Erişkin insan dermal fibroblastları | | | [C2 pasaj #7] Donör 67 yaşında bir kadındı. John van Geest Beyin Onarım Merkezi'ndeki (Cambridge, İngiltere) Parkinson Hastalığı Araştırma ve Huntington hastalığı kliniklerinden elde edilen hücreler. |
| Fibroblast Kültürü, Transdüksiyon ve Konversiyon için Reaktifler | | | |
| Dulbecco'nun fosfat tamponlu tuzlu su (DPBS) [-CaCl2, -MgCl2] | Gibco (Gibco) | 14190094 | |
| Tripsin-EDTA [% 0.5] | Gibco (Gibco) | 15400-054 | DPBS'de% 0.05'e seyreltin. |
| Virkon (virüsü nötralize etmek için kullanılan ajan) | Viroderm Belediyesi | 7511 | Ilık suyla% 1'lik çözeltiye seyreltin. |
| Milli-Q Su | Kırlangıç | | |
| Bazal ortam - Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamı (DMEM) + GlutaMax | Gibco (Gibco) | 61965059 | |
| Penisilin / Streptomisin [10.000 U / mL] | Gibco (Gibco) | 15140-122 | |
| Fetal Sığır Serumu (FBS) | Gibco (Gibco) | 10270-106 | |
| CryoMACS® dimetil sülfoksit (DMSO) 10 | Miltenyi | 170-076-303 | |
| Nöral farklılaşma ortamı - NDiff 227 | Takara-Clontech | Y40002 Serisi | |
| LM-22A4 | Tocris (Türkçe) | 4607 | 1450 μL DMSO.
içinde 10 mg seyreltin
Stok konsantrasyonu: 20 mM. |
| Glial hücre hattı kaynaklı nörotrofik faktör (GDNF) [rekombinant insan] | Ar-Ge sistemleri | 212-GD-010 | DPBS'de 10 ug'yi 500 μL% 0,1 BSA'da seyreltin. Stok konsantrasyonu: 20 μg/mL. |
| NT3 [rekombinant insan] | Ar-Ge sistemleri | 267-N3-025 | DPBS'de 25 mL'de 2,5 μg %0,1 BSA ile seyreltin. Stok konsantrasyonu: 10 μg/mL. |
| db-cAMP | Sigma Aldrich | D0627 | 1 g'ı 40,7 mL Milli-Q su ile seyreltin.
Süzün ve 500 μL'lik alikotlar veya 10 mL'lik stok tüpleri yapın. Stok konsantrasyonu: 50 mM. |
| CHIR99021 | akson | 1386 | 2 μg'yi 429,8 μL DMSO.
içinde seyreltin
Stok konsantrasyonu: 10 mM. |
| LDN-193189 | akson | 1509 | 2 mg'ı 360 μL DMSO.
içinde seyreltin
Stok konsantrasyonu: 10 mM. |
| Valproik asit sodyum tuzu (VPA) | Merck Kırlangıç | 676380 | 1 M'lik bir stok konsantrasyonu elde etmek için 5 g Milli-Q su ile seyreltin. DİKKAT: Yutulmasından, cilt ile temasından ve toz oluşumunu solumaktan kaçının. |
| Kaplamalar için Reaktifler | | | |
| jelatin | Sigma Aldrich | G2500 | Milli-Q suda% 0.1'e seyreltin. |
| Poli-L-ornitin | Sigma Aldrich | P3655 Serisi | Milli-Q suda çözülür. 15μg / mL'de kullanın. |
| Fibronektin | ThermoFisher Bilimsel | 33010-018 | 2 mL Milli-Q su + 70 μL 0,25 M NaOH. 5 μg/mL'de kullanın. |
| Laminin | ThermoFisher Bilimsel | 23017-015 | -80 ° C'de saklayın. Buz üzerinde çözdürün, serin tutun ve 30 μL'de alikot edin. 5 μg / mL'de kullanın. |
| ekipman | | | |
| T75 şişesi [Nunclon Delta Yüzeyi] | ThermoFisher Bilimsel | 156499 | |
| 24 kuyulu plaka [Nunc] | ThermoFisher Bilimsel | 142485 | |
| 1,5 mL polipropilen tüp | Sigma Aldrich | Z336769 | |
| 15 mL şahin tüpü | Sarstedt | 6,25,54,502 | |
| 50 mL şahin tüpü | Sarstedt | 6,25,47,254 | |
| Pippette denetleyicisi | | | 1-25 mL pipetleme hacimleri için. |
| Steril serolojik pipetler: 5, 10 ve 25 mL | Sarstedt | 86.1253.001, 86.1254.001, 86.1685.001 | |
| Ayarlanabilir hacimli pipetleyiciler: 5, 20, 200 ve 1.000 μL | | | |
| Steril pipet uçları | | | 0,5 - 1.000 μL'lik pipetleme hacimleri için. |
| ThawSTAR Otomatik Hücre Çözme Sistemi | BiyoKesim | BCS-601 | |
| Kontes II Otomatik Hücre Sayacı | ThermoFisher Bilimsel | AMQAX1000 | |
| Hücre sayma odaları [50 slayt] ve tripan mavisi [% 0.4] | ThermoFisher Bilimsel | C10228 | Kontes II Otomatik Hücre Sayacı ile kullanım için. |
| Laminer akış başlığı | | | |
| Nemlendirilmiş %5 CO2 37 °C inkübatör | | | |
| merkezkaç | | | 1,5, 15 ve 50 mL'lik tüpler için uygundur. |
| Yörünge çalkalayıcı | | | |
| Ters floresan mikroskobu | Leica Belediyesi | DMI6000 B | |
