Diş Germi ve Trigeminal Gangliyon Etkileşimlerinin Mikroakışkan Ko-Kültür Sistemi Kullanılarak Analiz Edilmesi

Özet

Kaynak: Pagella, P., et al. Mikroakışkan Ko-kültür Cihazları Kullanılarak Diş Germ İnnervasyonu Geliştirmenin Analizi. J. Vis. Uzm. (2015).

Bu video, diş germ pulpası ve trigeminal gangliyonlar arasındaki etkileşimleri incelemek için mikroakışkan bir cihazın kullanımını göstermektedir. Dokuların mikroakışkan cihazın içine yerleştirilmesini gösterir ve cihazın mikro olukları aracılığıyla diş germine doğru trigeminal nörit büyümesinin ayrıntılı bir görselleştirmesini sağlar. Ek olarak, dişten türetilen moleküler faktörlerin, doğum sonrası diş innervasyonunu verimli bir şekilde sağlamak için çok önemli olan diş germ pulpasına nörit uzantısını teşvik etmedeki veya inhibe etmedeki rolünü vurgular.

Protokol

Numune toplama ile ilgili tüm prosedürler enstitünün IRB yönergelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir.

1. Diseksiyon materyali, kültür ortamı, mikroakışkan cihazların hazırlanması

1. Otoklav mikro diseksiyon forseps ve makasları (121 °C, sterilizasyon süresi: 20 dk) ve steril bir kapta saklayın.
2. Cam lamelleri (24 mm x 24 mm) 37 °C'de bir orbital çalkalayıcı üzerinde 24 saat boyunca 1 M HCl'de inkübe ederek sterilize edin. Steril, damıtılmış H₂O ile üç kez ve% 99 etanol ile üç kez yıkayın. Daha sonra lamelleri 37 °C'de veya steril bir akış başlığı altında kurutun. Son olarak, sterilizasyonu t....

Sonuçlar

Şekil 1. Monte edilmiş mikroakışkan ko-kültür cihazının (A) yukarıdan görünümleri; (B) kısmen yanal. Kültür odaları (cc) kırmızı (eozin) ve mavi (toluidin mavisi) ile vurgulanır; Mikro oluklar (MG), kültür odaları arasında beyaz bir çizgi olarak görülebilir. Ganglionlar ve ko-kültür organları/dokuları, cihazdaki açılan delikler (ph) aracılığıyla uygun kültür odasına y.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
AXIS Akson İzolasyon Cihazları	Kırlangıç	AX15010-TC	Farklı uzunluklarda mikro kanallar mevcuttur
Laminin	Sigma Aldrich	L2020
Nörobazal	Gibco (Gibco)	21103-049
B27	Gibco (Gibco)	17504
Rekombinant Fare beta-NGF	Ar-Ge Sistemleri	1156-NG-100	İnsan ve Sıçan beta-NGF (AR-GE Sistemleri) eşdeğerdir
DMEM-F12	Gibco (Gibco)	11320-033

· Yılı Sertifikası Serisi Serisi