Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
1K görüntülenme
⸱
8 Temmuz 2025
Kaynak: Trujillo, M., et al. Fare Beyni Hipokampal Dokusunun Kombine Mekanik ve Enzimatik Ayrışması. J. Vis. Uzm. (2021)
Bu video, otomatik mekanik ayrışma ve enzimatik sindirime yardımcı olmak için bir enzim karışımının bir kombinasyonunu kullanarak fare beyin hipokampusundan oldukça canlı bir tek hücreli süspansiyon elde etmek için bir protokolü göstermektedir.
Hayvan örneklerini içeren tüm prosedürler, uygun hayvan etik inceleme komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır.
>1. Her numune için Enzim Karışımı 1 ve 2'yi hazırlayın
NOT: 2 mL'den büyük hacimler için 10 mL serolojik pipet kullanın; hacimler için 200 μL-2 mL, 1000 μL pipet kullanın; hacimler için, 21-199 μL, 200 μL pipet kullanın; 2-20 μL hacimler için 20 μL pipet kullanın; 2 μL'nin altındaki hacimler için 0-2 μL pipet kullanın.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Şekil 1: Adım 2.4'te seçilen durum
Şekil 2: Adım 3.5'teki üç katmanlı süspansiyon: Tampon (üst katman), hücre kalıntısı, kalıntı giderme çözeltisi ve hücreler (alt katman).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 1.5 mL Mikrosantrifüj Tüpleri | Balıkçı Bilimsel | 02-682-003 | Basix, çeşitli renk |
| 15 mL Falcon Tüpleri | Becton Dickinson Laboratuvar Gereçleri Avrupa | 352009 | Polistiren |
| 25 mL Serolojik Pipetler | Balıkçı Bilimsel | 14-955-235 | |
| 70 μm hücre süzgeci | Balıkçı Bilimsel | 08-771-2 | |
| Yetişkin Beyin Ayrışma Kiti | Miltenyi Biyotec | 130-107-677 | Enzim P, Tampon Z, Tampon Y, Enzim A, Tampon A, Kalıntı Giderme Çözeltisi içerir |
| Bsa | Sigma-Aldrich | A7906-50G | |
| Falcon 50 mL Konik Santrifüj Tüpleri | Balıkçı Bilimsel | 14-432-22 | |
| gentleMACS C Tüpleri | Miltenyi Biyotec | 130-093-237 | |
| gentleMACS Isıtıcılı Octo Dissociator | Miltenyi Biyotec | 130-096-427 | |
| Gibco DPBS (1X) | ThermoFisher Bilimsel | 14190144 | |
| Cam Beher | Balıkçı Bilimsel | 02-555-25A | |
| Pipet uçları GP LTS 20 μL 960A/10 | Yağmur | 30389270 | |
| Pipet Uçları GP LTS 250 μL 960A/10 | Yağmur | 30389277 | |
| Pipet uçları RT LTS 1000 μL FL 768A/8 | Yağmur | 30389213 | |
| Rainin Pipet-Lite XLS (2, 20, 200, 1000 μL) | Yağmur | 30386597 | |
| Kapaklı Yuvarlak Buz Kovası | Balıkçı Bilimsel | 07-210-129 | |
| Hücre Süzgeç Kapaklı Yuvarlak Tabanlı Tüpler | doğan | 100-0087 |
