Bir Fare Beyninden Amigdala Bölgelerini Açığa Çıkaran Koronal Beyin Dilimi Oluşturma

Bu makalede

Özet

Kaynak: Bosch, D., et al. Beyin dilimlerinde korku devrelerinin ex vivo optogenetik diseksiyonu. J. Vis. Uzm. (2016).

Bu video, medial prefrontal korteksten sinaptik bağlantılar açısından zengin amigdala bölgelerini açığa çıkaran bir murin beyninden ince koronal beyin dilimlerinin hazırlanmasını göstermektedir. Dilimler daha sonra nöronal canlılığı korumak için oksijenli yapay beyin omurilik sıvısında geri kazanılır.

Protokol

1. Akut Dilimlerin Hazırlanması

ACSF, kesme solüsyonu, aletler (makas, neşter, forseps, spatula, Pasteur pipeti) ve agar blokları hazırlayın.
NOT: Deney başına 1 L yapay beyin omurilik sıvısı (ACSF) gereklidir. Daha önce yayınlandığı gibi, ACSF, kimyasalların çift damıtılmış H2O içinde çözülmesiyle hazırlanır. Kesme çözeltisi, 200 ml ACSF'nin 0.87 ml 2 M_MgS04 stok çözeltisi ile desteklenmesiyle hazırlanır.
Deney boyunca %95_O2 ve %5 CO₂ ile ACSF ve kesme solüsyonunu oksijenlendirin.
İzofluran (% 3 oksijen) kullanarak küçük bir hayvan anestezi makinesi kullanarak fa....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1. stereotaktik enjeksiyonlar, akut beyin dilimlerinin hazırlanması ve presinaptik liflerin görselleştirilmesi. (A, B) Stereotaktik virüs enjeksiyonu. A) Kafatası açıkta ve enjeksiyon pipeti açıkta olacak şekilde stereotaktik bir çerçeveye yerleştirilmiş anestezi uygulanmış bir farenin resmi. İç: Hızlı yeşil ile karıştırılmış virüs çözeltisi ile doldurulmuş enjeksiyon pipetinin .......