Method Article

Bir Fare Beyninden Amigdala Bölgelerini Açığa Çıkaran Koronal Beyin Dilimi Oluşturma

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Bosch, D., et al. Beyin dilimlerinde korku devrelerinin ex vivo optogenetik diseksiyonu. J. Vis. Uzm. (2016).

Bu video, medial prefrontal korteksten sinaptik bağlantılar açısından zengin amigdala bölgelerini açığa çıkaran bir murin beyninden ince koronal beyin dilimlerinin hazırlanmasını göstermektedir. Dilimler daha sonra nöronal canlılığı korumak için oksijenli yapay beyin omurilik sıvısında geri kazanılır.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Akut Dilimlerin Hazırlanması

  1. ACSF, kesme solüsyonu, aletler (makas, neşter, forseps, spatula, Pasteur pipeti) ve agar blokları hazırlayın.
    NOT: Deney başına 1 L yapay beyin omurilik sıvısı (ACSF) gereklidir. Daha önce yayınlandığı gibi, ACSF, kimyasalların çift damıtılmış H2O içinde çözülmesiyle hazırlanır. Kesme çözeltisi, 200 ml ACSF'nin 0.87 ml 2 MMgS04 stok çözeltisi ile desteklenmesiyle hazırlanır.
  2. Deney boyunca %95O2 ve %5 CO2 ile ACSF ve kesme solüsyonunu oksijenlendirin.
  3. İzofluran (% 3 oksijen) kullanarak küçük bir hayvan anestezi makinesi kullanarak fa....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Şekil 1. stereotaktik enjeksiyonlar, akut beyin dilimlerinin hazırlanması ve presinaptik liflerin görselleştirilmesi. (A, B) Stereotaktik virüs enjeksiyonu. A) Kafatası açıkta ve enjeksiyon pipeti açıkta olacak şekilde stereotaktik bir çerçeveye yerleştirilmiş anestezi uygulanmış bir farenin resmi. İç: Hızlı yeşil ile karıştırılmış virüs çözeltisi ile doldurulmuş enjeksiyon pipetinin .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Yapay beyin omurilik sıvısı (ACSF)Kompozisyon için referans #16 ve #23'e bakınız
Dahili yama çözümleriKompozisyon için referans #16 ve #23'e bakınız
Dilimleyici, Mikrom HM650VFisher Scientific, Almanya920120
Doku dilimleyici için soğutma ünitesi, CU65Fisher Scientific, Almanya770180
Safir bıçakDelaware Elmas Bıçaklar
stereoskop, SZX2-RFA16Olimpos, Japonya

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Coronal Brain SliceAmygdala RegionsMouse BrainVibratome CuttingAgar Block StabilizationInterface ChamberOxygenated ACSFNeuronal ViabilityCerebellum RemovalMedial Prefrontal Cortex

Related Articles